35. Возбудитель сифилиса. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения.

Сифилис – циклически протекающее венерическое заболевание человека, вызываемое бледной спирохетой (Treponema pallidum).

Характеристика. Бледная трепонема – микроорганизм спиралевидной формы (обеспечивается за счет эндофлагелл, которые также способствуют вращению и скручиванию, т. е. передвижению), размерами 0,09-0,018. В электронном микроскопе имеет вид змеи или дождевого червя. Относится к грамотрицательным бактериям. Является облигатным паразитом, то есть не может существовать вне живого организма (вне человеческого тела). При неблагоприятных условиях может образовывать цисты.

К внешним воздействиям малоустойчивы. Быстро погибают при высушивании и при повышенных температурах. В 0,3-0,5% HCL быстро утрачивают свою подвижность; также быстро утрачивают ее и погибают при использовании препаратов мышьяка, висмута и ртути. Запомнить: в цельной крови или в сыворотке при температуре 4°С сохраняют жизнеспособность в течение 24 часов, что важно при переливании крови!

Антигены трепонем плохо изучены. Установлено, что в составе трепонем имеются группоспецифические антигены, видоспецифические антигены (характерны для Treponema pallidum) и кардиолипиновый антиген (который также вырабатывается нашим организмом).

Трепонема восстанавливает нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности микроба и делает его видимым в тканях: при окраске по Морозову трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. При окраске по Романовскому-Гимзе приобретают бледно-розовый цвет.

Первая фотография – окраска по Морозову, вторая – по Романовскому-Гимзе

Патогенез и клиника. Инкубационный период при приобретенном сифилисе длится от 2 до 10 недель, обычно 20-28 дней. Входными воротами инфекции чаще всего являются слизистые оболочки половых органов, реже – полости рта, а также поврежденная кожа.

Лабораторная диагностика сифилиса. Диагностика приобретенного сифилиса начинается с обнаружения спирохет в жидкости из шанкра, что возможно благодаря темнопольной микроскопии. Также исследуемым материалом может являться: пунктат лимфатического узла, соскоб из розеолы, ликвор. Диагноз подтверждается с помощью серологических тестов, которые ищут антитела к антигенам Treponema pallidum. Их можно использовать на различных стадиях заболевания, кроме серонегативного первичного сифилиса (первые три недели). Серологические тесты делятся в свою очередь на нетрепонемные и трепонемные.

• К нетрепонемным тестам с визуальным определением результатов относят: реакция связывания комплемента (реакция Вассермана = РСКк = RW) с кардиолипиновым антигеном сердечной мышцы быка (перекрестно реагирующий антиген), реакция микропреципитации (МР, или РМП) – микрореакция с плазмой и инактивированной сывороткой; RPR – тест быстрых плазменных реагинов. Нетрепонемные тесты могут давать ложноположительные результаты.

• В трепонемных тестах используют антигены трепонемного происхождения. Их применяют для подтверждения результатов нетрепонемных тестов при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрениях на сифилис, для диагностики скрытых и поздних форм. Это: РСКк, РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем), РИФ, РПГА, ИФА, иммуноблотинг.

Диагностика врожденного сифилиса отличается. Необходимо параллельное изучение результатов у матери и ребенка. Например, если нетрепонемный серологический титр ребенка в четыре раза больше, чем у матери, то это говорит о том, что у ребенка врожденный сифилис.

Профилактика. Принципы лечения. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение. Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные, иногда эритромицин. Используют также препараты мышьяка, висмута и ртути.

!Реакция Яриша-Герксхаймера! Когда спирохеты умирают и разрушаются, высвобождается сразу много антигенов, что заставляет иммунную систему работать с перегрузкой. Возникает лихорадка, потоотделение, боль в мышцах и суставах, которые могут длиться от нескольких часов до нескольких дней. Это не аллергическая реакция, поэтому нужно продолжать лечение.

36. Возбудитель туляремии. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.

Таксономия.

Возбудитель – Francisella tularensis (открыта в провинции Туляре, США) относится к роду Francisella, 2 группы патогенности. Выделяют 4 подвида, различающихся по ареалу распространения, вирулентности и АГ-структуре (Novicida, Holarctica, Tularensis, Mediaasiatica).

Морфология.

Очень мелкие (0,1*1.5мкм) полиморфные(кокки, овоиды, зерна, неправильной формы) Гр (-) палочки, неподвижные, не образующие спор, могут образовывать капсулу.

Культуральные свойства.

Факультативный аэроб, оптим. температура+37С. На простых питательных средах не растет. Культивируется на желточных средах, на средах с добавлением крови и цистеина. Рост медленный. На ППС образуют мелкие колонии молочно-белого цвета. Хорошо культивируется в желточном мешке куриного эмбриона.

При культивировании на искусственных средах происходит аттенуация бактерий и превращение их из вирулентной в авирулентную форму.

Биохимические свойства.

Бх активность очень низкая. Слабо ферментируют до кислоты без газа глюкозу и мальтозу. Образует сероводород. Непостоянно ферментирует маннозу и левулезу. Ферментируют глицерин подвиды Tularensis, Mediaasiatica.

Антигенные свойства.

Содержит соматический О- и поверхностный Vi- антигены. Имеют антигенную близость с бруцеллами. В R- форме теряют Vi- антиген, а вместе с ним вирулентность и иммуногенность.

Факторы патогенности

Вирулентными являются S-формы колоний. Патогенные свойства связаны с оболочечным антигенным комплексом и токсическими веществами типа эндотоксина. Вирулентность обусловлена: капсулой, угнетающей фагоцитоз; нейраминидазой, способствующей адгезии; эндотоксином (интоксикация); аллергенными свойствами клеточной стенки. У подвида Tularens в геноме имеется дополнительный островок патогенности, продукт которого предотвращает лизис микроба.

Эпидемиология

Туляремия - природно-очаговое заболевание. Источник инфекции – мелкие грызуны и зайцы. Передача среди млекопитающих (КРС, свиньи, овцы) чаще через клещей и комаров. Человек заражается контактным, алиментарным, трансмиссивными путями. Восприимчивость человека очень высока.Болеют чаще жители сельской местности и лица с проф. Контактом с грызунами.

Устойчивость в окружающей среде

В окружающей среде сохраняется долго при низких температурах, особенно в зерне и соломе. Бактерии нестойки к высокой температуре, УФ-лучам и чувствительны к большинству АБ.

Патогенез

На месте внедрения возбудителя (кожа, слизи­стые оболочки глаз, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта) развивается первичный воспалительный очаг, откуда воз­будитель распространяется по лимфатическим сосудам и узлам, поражая их с образованием первичных бубонов; в различных органах формируются гранулемы. Микроб и его токсины проникают в кровь, что приводит к бактериемии и генерализации процесса, метастазированию и развитию вто­ричных туляремийных бубонов.

Клиническая картина

Инкубационный период от нескольких часов до 3 недель. В среднем - 3—7 дней. Болезнь начинается остро с лихорадкой. Различают бубонную, язвенно-бубонную, глазо-бубонную, абдоминальную, легочную и генерализованную (септи­ческую) клинические формы туляремии. Болезнь протекает длительно. Летальность при заражении подвидом Tularens около 6%, остальными 0,1% и ниже.

Иммунитет

После перенесенной инфекции иммунитет со­храняется длительно, иногда пожизненно; развивается аллергизация организма к антигенам возбудителя.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования – кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, мокрота.

Бактериоскопическое исследование. Из исследуе­мого материала готовят мазки, окрашивают по Граму. В чис­той культуре - мелкие кокки. В мазках из органов преобладают палочковидные формы. Спор не образуют, Гр (-).

Бактериологическое исследование и биопроба. Бактериологический метод редко дает положительный результат. Чистую культуру выделяют после накопления на восприимчивых лаб. Животных. Для биопробы используют белых мышей и морских свинок. Мышей заражают подкожно, свинок – внутрибрюшинно. Животные погибают на 3-6 сутки. Чистую культуру выделяют из внутренних органов на желточной среде или гликозоцистеиновом кровяном агаре. При идентификации опираются на морфологию и тинкториальные свойства, отсутствие роста на МПА, агглютинацию гомологичной сыворотки.

Серодиагностика – развернутая реакция агглютинации, РПГА, РИФ. Ставится реакция агглютинации с туляремийным диагностикумом. Относительно позднее появление агглю­тининов в крови (на 2-й неделе болезни) затрудняет применение этой реакции для ранней диагностики, однако их длительное сохранение делает возможной ретроспективную диагностику.

Для экспресс-диагностики применяется кровяно-капельная ре­акция: кровь из пальца наносят на стекло, добавляют каплю дистиллированной воды (для лизиса эритроцитов), вносят каплю диагностикума и смешивают стеклянной палочкой. При наличии в крови агглютининов в диагностическом титре (1:100 и выше) в капле немедленно на­ступает агглютинация диагностикума; при титрах ниже диагно­стических агглютинация происходит через 2—3 мин.

Аллергические пробы для ранней диагностики туляремии. Выпускаются два вида тулярина: для внутрикожной пробы и для накожной. Проба высоко­чувствительна и дает положительные результаты у больных, на­чиная с 3—5-го дня болезни, но также и у переболевших и вак­цинированных – анамнестическая реакция.

Лечение

Применяют АБ аминогликозиды, макролиды и фторхинолоны. При затяжном тячении проводят комбинированную АБ-терапию и вакцинотерапию с применением убитой лечебной вакцины (курс 6-10 инъекций)

Профилактика

Специфическая профилактика - применяют живую туляремийную вакцину (из штамма №15). Иммунитет длительный (5-6 лет), проверяется с помощью пробы с тулярином.

Неспецифическая профилактика – направлена на борьбу с грызунами.

37.Возбудитель холеры. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика

I. Морфология

1. Vibrio cholera

2. Прямые или изогнутые, короткие, в мазках располагаются параллельно “cтаи рыб”

3. Грам-

4. Нет капсулы, спор, монотрих – очень подвижны!

II. Физиология

1. Прототрофы, галофиты, растут на среде с щелочной реакцией, 0,5% NaCl

2. Аэробы или факультативные аэробы

3. К питательным средам не требовательны

4. На твёрдых средах – небольшие прозрачные S-колонии и неровные мутные R-колонии

5. В жидких средах – голубоватая пленка на повер-ти (говорит о том, что они аэробы)

6. Ферментируют углеводы до к-ты (1-я группа Хейберга из 6: САХ+, МАН+ АРАБ-), образуют индол, восстанавливают нитраты (оксидазы). Не образуют H2S.

7. Инвазия - Фибринолизин, гиалуронидаза

8. Эндотоксин – ЛПС КС, вызывает образование вибриоцидных антител

Экзотоксин – холероген, повышает АЦ, цАМФ, нарушает водно-солевой обмен, состоит из субъединиц:

А1 – сам токсин

А2 – связывает А1 и В

В – проникновение в энтероцит, взаимодействие с рецептором

9. Антигены:

H-антиген: жгутиковый белок флагеллин, термолабильный, общий у всех возбудителей холеры

О-Антиген – термолабильный, полисахаридная часть ЛПС, возбудители холеры относятся к серогруппам О1 и О139.

К-Антиген (капсульный) – только у V.cholerae Bengal.

10. Во внешней среде устойчива (в воде)

III. Эпидемиология

1. Источник инфекции: больной, реконвалесценты (выздоравливающие), здоровые бактерионосители, загрязненная вода

2. Механизм передачи: фекально-оральный, путь – вода!!!, контактно-бытовой, пища

IV. Диагностика

Лабораторная диагностика – бактериологический метод (материал – рвота, испражнение, сточные воды)

1 этап – параллельно посев на щелочной агар(12-24ч), среду TCBS –элективная среда! (18-24ч), 0,5-1мл 1% пептонной воды (среда накопления). 37 градусов.

Компоненты TCBS – пептон и дрожжевой экстракт – источники азота и витаминов В, Oxgall – бычья желчь, желчные соли подавляют рост Грам+, тиосульфат натрия – источник серы и индикатор на H2S (вместе с цитратом Fe), бром тимоловый синий – индикатор pH, ферментация сахарозы – желтые колонии.

2 этап (6-8ч) Отбор подозрительных колоний с щелочного агара (ЩА), среды TCBS и высев на ЩА и среду TCBS. Микроскопия. Постановка ПЦР, иммобилизационный тест

3-й этап (12-14ч) Пересев из 2-ой среды накопления на плотные элективные питательные среды (TCBS)

4-й этап (18-24ч). Отбор типичных колоний. Тест на оксидазу, РА с холерными сыворотками 0-1, 0-139, РИФ, диагностические бактериофаги, пересев на щелочной агар

Бактериоскопический метод – висячая или раздавленная капля (на подвижность)

Серодиагностика.

АТ появляются на 5-7-ой день

РА (вспомогательный характер)

РПГА с диагностикумом эритроцитарным или полимерным холерным антигенным О1 или О139.

V. Современные методы диагностики

ИФА

ПЦР

VI. Вакцинопрофилактика

Все вакцины используются только по эпидемическим показаниям, действуют 6 месяцев.

Холерная О-вакцина – антимикробный иммунитет (профилактика носительства)

Холероген-анатоксин – антитоксический иммунитет (профилактика тяжелого течения заболевания)

Вакцина холерная бивалентная химическая (Россия) – таблетки, смесь из холерогена-анатоксина и О-антигенов

Моновалентная убитая вакцина (комм. название “Durokal”) – целые клетки V. cholerae.

Убитая бивалентная корпускулярная вакцина пероральная (О1 и О139)

VII. Серопрофилактика - нет

VIII. Вакцинотерапия - нет

IX. Особенности

Холера – острое инфекционное заболевание, характеризующееся поражением тонкой кишки, нарушением водно-солевого обмена, интоксикацией, в тяжелых случаях – обильный понос с быстрой потерей жидкости (рисовый отвар), солей, как итог – обезвоживание и смерть.

Патогенез