Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Микра экз 2021.docx
Скачиваний:
16
Добавлен:
08.02.2024
Размер:
40.85 Mб
Скачать

3)По типу взаимодействия с микробной клеткой:

*бактерицидные – необратимо нарушают функции микробной клетки либо ее целостность, вызывая немедленную гибель микроорганизма, применяются при тяжелых инфекциях и у ослабленных больных,

*бактериостатические – обратимо блокируют репликацию или деление клетки, применяются при нетяжелых инфекциях у неослабленных больных.

В зависимости от объекта тип действия называют бактерио-/фунги-/протозоостатическим/цидным

4)По кислотоустойчивости антимикробные препараты классифицируются на:

*кислотоустойчивые – могут применяться перорально, например, феноксиметилпенициллин,

*кислотонеустойчивые – предназначены только для парентерального применения, например, бензилпенициллин.

Способы получения:

Источники:

-плесневые грибы (синтезируют природные бета-лактамы) и фузидиевую кислоту

-актиномицеты (особенно стрептомицеты) - ветвящиеся бактерии, синтезируют большое число природных антибиотиков (80%)

-типичные бактерии (бациллы, псевдомонады) - продуцируют бацитрацин, полимиксины

Основные способы получения:

-биологический синтез (для получения природных а/б). В условиях специализированных производств культивируют микробы-продуценты, которые выделяют а/б в процессе своей жиз-ти

-биосинтез с последующими химическими модификациями (при создании полусинтетических а/б). Сначала путём биосинтеза получают природный а/б, затем молекулы изменяют химической модификацией, присоединяют определенные радикалы, в результате чего улучшаются актимикробные и фармакологические свойства

-химический синтез (для получения чинетических аналогов природных а/б). Синтезированы химически.

5. Бактериологический метод диагностики. Требования к выращиванию бактерий в искусственных условиях.

Бактериологическое исследование — исследование, предназначенное для выделения бактерий и изучения их свойств с целью постановки микробиологического диагноза.

Бактериологический (культуральный) метод - совокупность методик искусственного культивирования микроорганизмов на питательных средах в целях их идентификации при установлении диагноза инфекционного заболевания или иного вызванного микробами процесса и определения ряда физиологических свойств культуры с другими целями, например, при выборе химиотерапевтического препарата.

Задачи:

· Первой задачей бактериологического метода является получение чистой культуры какого-либо вида (вара) из микробной ассоциации и предупреждение контаминации посторонней микрофлорой материала для исследования и микробной культуры на всех этапах исследования.

· Второй задачей - идентификация микробов выделенной чистой культуры, третья - определение дополнительных свойств, например, чувствительности к антибиотикам, вирулентности.

Этапы бактериологического метода:

1. Забор материала и его доставка в бактериологическую лабораторию;

2. Микроскопия исследуемого материала. Этот этап часто не выполняется, хотя, несмотря на меньшую чувствительность, предварительная микроскопия в ряде случаев дает ориентировочные сведения о возбудителе и позволяет выбрать необходимые для посева среды;

3. Обработка исследуемого материала физическими или химическими факторами в целях удаления или уменьшения посторонней микрофлоры. Эта мера применяется, при исследовании мокроты, выделении кислотоустойчивых и спорообразующих микробов;

4. Посев исследуемого материала на питательные среды для получения изолированных колоний;

5. Инкубация засеянных питательных сред. Сроки и температура инкубации зависят от предполагаемой видовой принадлежности культуры. Обычно посевы выдерживают в термостате при 37°С 1 -2 дня;

6. Исследование колоний. Для изучения выбирают однородные изолированные колонии, располагающиеся далеко от краев чашки и по штриху петли, окружают их чертой, нумеруют. Если исследование ведется ненаправленно, то на основании результатов визуального осмотра выбирают по 2 - 3 колонии всех имеющихся на чашке типов и делают с них мазки;

7. Пересев с выбранных колоний на среды накопления. Для этого с остатка колонии, в мазке культурой выявлены однородные по форме и окраске бактерии, петлей, стараясь не задеть соседние колонии, забирают часть культуры и засевают на скошенный в пробирке МПА или специальную среду штрихом;

8. Инкубация посевов в термостате до появления сплошного роста (обычно 1 -2 дня);

9. Определение чистоты выросшей на скошенных средах культуры путем макроскопического осмотра роста и микроскопии мазка из него;

10. Идентификация выделенной чистой культуры и в случае необходимости определение различных биологических свойств;

11. Заключение о видовой принадлежности выделенной культуры и ее свойствах. Заключение дается на официальном бланке со ссылкой на номер, под которым эта культура занесена в лабораторный журнал.

Требования к выращиванию бактерий в искусственных условиях.

Культивирование бактерий в системах in vitro осуществляется на питательных средах. Искусственные питательные среды должны отвечать определенным требованиям и содержать воду, так как все процессы жизнедеятельности бактерий протекают в воде.

• Для культивирования гетероорганотрофных бактерий в среде должен содержаться органический источник углерода и энергии. Эту функцию выполняют различные органические соединения: углеводы, аминокислоты, органические кислоты, липиды. Наибольшим энергетическим потенциалом обладает глюкоза, так как она непосредственно подвергается расщеплению с образованием АТФ и ингредиентов для биосинтетических путей.

• Для синтеза белков, нуклеотидов, АТФ, коферментов бактериям требуются источники азота, серы, фосфаты и другие минеральные вещества, в том числе микроэлементы. Источником азота может служить пептон; пептон продукт неполного гидролиза белков, состоящий из поли-, олиго- и дипептидов. Пептон также поставляет аминокислоты для построения бактериальных белков. кроме того, большинство бактерий способны использовать соли аммония в качестве источника азота. Серу и фосфор бактерии способны утилизировать в виде неорганических солей: сульфатов и фосфатов. Для нормального функционирования ферментов бактериям требуются ионы Са2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, которые добавляют в питательную среду в виде солей, чаще всего фосфатов.

• Решающее значение для роста многих микроорганизмов имеет рН среды. Поддерживание определенного рН имеет значение для предотвращения гибели микроорганизмов от ими же образованных продуктов обмена.

• Среда должна обладать определенным осмотическим давлением. Большинство бактерий способны расти на изотоничных средах, изотоничность которых достигается добавлением NaCl в концентрации 0,85%. Некоторые бактерии не способны расти на средах при концентрации соли в них ниже 1%. Такие бактерии называются галофильными. Так как устойчивость к осмотическому давлению определяется наличием у бактерий клеточной стенки, бактерии, лишенные клеточной стенки, микоплазмы L-формы, могут расти на питательных средах, содержащих гипертонический раствор, обычно сахарозы. При необходимости к питательной среде добавляют факторы роста, ингибиторы роста определенных бактерий, субстраты для действия ферментов, индикаторы.

• Питательные среды должны быть стерильными.

Соседние файлы в предмете Микробиология, иммунология, вирусология