21. Возбудители туберкулеза. Классификация. Особенности микобактериальной клетки. Распространенность.

1. Болезнь вызывается 3 видами микобактерий: Mycobacterium tuberculosis — человеческий вид, Mycobacterium bovis — бычий вид, Mycobacterium africanum — промежуточный вид. Таксономия: род Mycobacterium, семейство Mycobacteriaceae.

2. Морфология: выраженный полиморфизм. Они имеют форму длинных, тонких (М.tuberculosis) или коротких, толстых (M.bovis), прямых или слегка изогнутых палочек с гомогенной или зернистой цитоплазмой.

3. Окраска по Граму-положительны (прочно окрашены в синий цвет и имеют толстую клеточную стенку). По Цилю-Нильсену-микобактерии туберкулёза выявляются в виде тонких, слегка изогнутых палочек малиново-красного цвета, содержащих различное количество гранул, располагаются поодиночке, парами или в виде групп, нередко в виде римской цифры «V».

4. Имеют микрокапсулу, спор не образуют, неподвижны (нет жгутиков).

5. Возбудители туберкулеза характеризуются медленным ростом, требовательны к питательным средам. М.tuberculosis относятся к аэробам, глицеринзависимы. На жидких питательных средах дают рост в виде сухой пленки кремового цвета. При внутриклеточном развитии, а также при росте на жидких средах выявляется характерный корд-фактор, благодаря которому микобактерии растут в виде «жгутов». На плотных средах рост в виде кремового, сухого чешуйчатого налета с неровными краями (R-формы). По мере роста колонии приоб­ретают бородавчатый вид.

Под влиянием антибактериальных средств возбудители изменяют культуральные свойства, образуя гладкие колонии (S-формы). M.bovis —растут на средах медленнее, чем M.tuberculosis, пируватзависимы; на плотных питательных средах образуют мелкие шаровидные, серовато-белые колонии (S-формы).

6. Ферментная активность: Высокая каталазная и пероксидазная активность. М.tuberculosis в большом количестве синтезирует ниацин (никотиновая кислота), который накапливается в культуральной среде и определяется в пробе Конно.

7. Химический состав: Основными химическими компо­нентами микобактерии являются белки, углеводы и липиды. Липиды (фосфатиды, корд-фактор, туберкулостеариновая кислота) - обусловливают устойчивость к кислотам, спиртам и щелочам, препятствуют фагоцитозу, на­рушают проницаемость лизосом, вызывают развитие специфи­ческих гранулем, разрушают митохондрии клеток. Микобактерии индуцируют развитие реакции гиперчувствительности IV типа (туберкулин).

8. Ключевые различия: М.bovis от М. tuberculosis заключается в их высокой патогенности для кроликов и млекопитающих. При внутривенном заражении М.bovis в дозах 0,1 и 0,01 мг культуры кролики погибают от генерализованного туберкулеза через 3-6 недель. Заражение кроликов М. tuberculosis даже в дозе 0,1 мг не вызывает их гибели, у них развиваются местные, доброкачественные, непрогрессирующие очаги в легких. При внутривенном заражении животных М. avium они погибают через 1,5-2 недели от септикопиемии.

22. Возбудители хламидиозов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Принципы лечения

Хламидиозы – группа широко распространённых инфекционных болезней человека и животных, характеризующихся преимущественным поражением слизистых оболочек дыхательных путей, глаз и половых органов, склонностью к хроническому течению. Заболевания, вызываемые C. trachomatis u C. pneumoniae, — антропонозы. Орнитоз, возбудителем которого является С. psittaci, — зооантропонозная инфекция.

Таксономия. Порядок Chlamydiales, Семейство Chlamydiaceae, Род Chlamydia Chlamydophila ,Вид C. trachomatis C. psittaci C. pneumoniae и др.

Морфология. Хламидии - мелкие сферические организмы в диаметре 0,2-1,5 мкм, грамотрицательные. Клеточная стенка лишена пептидогликана. Споры не образуют, жгутики, капсулу не имеют. Внутриклеточно образуют микроколонии, окутанные капсулоподобным слоем – мантией, «хламидой» (от греч. сhlamydos – плащ). Размножаются бинарным делением. Могут образовывать L-формы и самопроизвольно возвращаться к исходным формам. Основной метод окраски – по Романовскому – Гимзе

Жизненный цикл хламидий включает образование трех форм:

1. Элементарные тельца (ЭТ) –зрелая форма, адаптированная к внеклеточному существованию, небольшие частицы размером 0,2-0,4 мкм, по Романовскому Гимзе окрашиваются в розовый цвет. ЭТ высокоинфекционны, ответственны за процесс прикрепления к клетке-мишени и проникновение в неё, устойчивы к неблагоприятным факторам внешней среды.

2. Ретикулярные тельца (РТ) (=инициальные тельца) – внутриклеточные репродуктивные формы размером 0,8-1,5 мкм, по Романовскому-Гимзе окрашиваются в голубоватый цвет. РТ мало инфекционны, являются формой обеспечения репродукции микроорганизма.

3. Созревание РТ в ЭТ происходит через переходные формы – промежуточные тельца.

Цикл развития:

1. Абсорбция элементарного тельца хламидий на чувствительной клетке хозяина.

2. Проникновение ЭТ в клетку путём эндоцитоза. Участки плазмолеммы с адсорбированными на них ЭТ инвагинируются в цитоплазму с образованием фагоцитарных вакуолей (этот этап занимает 7-10 часов).

3. Реорганизация элементарного тельца в РТ, способные к росту и делению (этот этап длится 6-8 часов).

4. Деление ретикулярного тельца. Эти внутриклеточные формы, представляющие собой микроколонии, называются хламидийными включениями – тельцами Гальберштедтера-Провацека. Во включении может содержаться от 100 до 500 РТ хламидий (длительность 18-24 часа).

5. Созревание РТ в ЭТ в течение 36-42 часов через переходные формы (промежуточные тельца).

6. Накопление ЭТ в эндосоме.

7. Выход ЭТ из клетки сопровождается гибелью клетки.

Продолжительность полного цикла составляет 48-72 часа.

Культуральные свойства. По типу дыхания хламидии – это аэробы. Хламидии являются облигатными внутриклеточными паразитами, поэтому не растут на питательных средах.

Для культивирования используют:

· клеточные культуры (McCoy, L-929, Hela, Hep-2 и др.);

· заражение в желточный мешок куриных эмбрионов;

· заражение лабораторных животных.

Биохимическая активность. Биохимически не активны.

Антигенная структура. Антигенный состав сложен, у микроорганизмов выделяют:

1. Родоспецифический антиген (общий для всех видов хламидий) – поверхностный ЛПС КС, термостабильный, препятствует фагоцитозу.

2. Видоспецифические антигены (различные для всех видов хламидий) – белок КС, термолабильный.

3. Типоспецифические антигены (различные для сероваров) – белки:

a) У вида C. trachomatis обнаружены 16 сероваров, условно, разделённые на 3 группы:

· возбудители трахомы (А, В, Ва, С);

· возбудители урогенитального хламидиоза (D, E, F, G, H, I, J, K);

· возбудитель венерической лимфогранулёмы (L1, L2, L2а, L3).

b) Вид C. psittaci насчитывает (8) 13 сероваров.

c) C. pneumoniae – 4 серовара (TWAR, AR, RF, CWL).

Факторы патогенности.

1. Токсины:

· Эндотоксин (ЛПС КС), освобождающийся после разрушения хламидий, вызывающий токсинемию;

· Экзотоксины, представленные термолабильными белковыми субстанциями.

2. С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец.

3. У некоторых хламидий обнаружен белок теплового шока, способный вызывать аутоиммунные реакции.

Резистентность. Вне организма человека (животного) малоустойчивы. При комнатной температуре хламидии погибают через 24-36 часов. Хламидии чувствительны к действию УФЛ, дезинфецирующим средствам, атибиотикам (тетрациклину, макролидам) и фторхинолонам. Устойчивы к низким температурам, высушиванию.

Урогенитальный хламидиоз – заболевание, передающееся половым путем , характеризующееся поражением мочеполового тракта.

Эпидемиология. Источник инфекции – больной острой или хронической формой инфекции. Механизм передачи:

· Контактный (пути – половой, контактно – бытовой);

· Вертикальный (заражение через плаценту или в родах).

Входные ворота – мочеполовые органы (хламидии обладают тропизмом к цилиндрическому эпителию).

Патогенез и клинические особенности.

Проникновение и размножение хламидий в клетках слизистой оболочки мочеполовых органов. В результате размножения возбудителя и его патогенного действия в тканях развивается патологический процесс: возникает отёк, гиперемия слизистых, нарушается целостность эпителиального слоя, возникают функциональные нарушения. У женщин поражаются уретра, матка, маточные трубы, яичники, у мужчин – уретра, предстательная железа. Осложнения – женское и мужское бесплодие. Вследствие урогенитальной хламидийной инфекции развивается болезнь Рейтера, для которой характерны 3 классическая триада признаков: уретрит, артрит крупных суставов, конъюктивит.

Иммунитет: клеточный, с сыворотке инфицированных – специфические антитела. После перенесенного заболевания - не формируется.

Диагностика: Материал для исследования – соскобы с эпителия уретры, цервикального канала.

1) Микроскопический метод: окрашивают по Романовскому-Гимзе и по Граму

2) Серологический : РИФ, ИФА – для выявления антигена хламидии в пораженных клетках. Обнаружение IgM против С. trachomatis при диагностике пневмонии новорожденных

3) Биологический метод - основан на заражении исследуемым материалом (соскобы эпителия из уретры, влагалища) культуры клеток

Лечение. антибиотики (азитромицин из группы макролидов), иммуномодуляторы, эубиотики. Профилактика. Только неспецифическая (лечение больных), соблюдение личной гигиены.

Эффективных средств специфической профилактики и лечения хламидиозов нет.

С. pneumoniae - возбудитель респираторного хламидиоза, вызывает острые и хронические бронхиты и пневмонии. Антропоноз. Заражение – воздушно-капельным путем. Попадают в легкие через верхние дыхательные пути. Вызывают воспаление.

Диагностика: постановка РСК для обнаружения специфических антител (серологический метод). При первичном заражении учитывают обнаружение IgM. Применяют также РИФ для обнаружения хламидийного антигена и ПЦР.

Лечение: Проводят с помощью антибиотиков (тетрациклины и макролиды).

Профилактика: Неспецифическая.