34. Возбудитель сибирской язвы. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика Принципы лечения

Зоонозы– это заболевания, при которых источником инфекции являются различные животные, служащие единственным резервуаром возбудителя в природе

Одним из зоонов является сибирская язва

Особенности зоонозных инфекций:

1. Человек не является биологическим хозяином возбудителя зоонозов.

2. Отсутствует передача возбудителя от больного человека к здоровому (как правило).

3. Отсутствует передача возбудителя от человека к животному.

4. Возникновению заболевания у людей предшествуют эпизоонозы у животных.

Сибирская язва (углевик) – это острое инфекционное зоонозное заболевание, характеризующееся тяжелой интоксикацией, лихорадкой и протекающее в кожной, легочной и кишечной формах

Таксономия

· Семейство – Bacillaceae

· Род – Bacillus

· Вид – Bacillus anthracis

Морфология

· Очень крупные палочки с обрубленными концами размером 5-10×1-2 мкм;

· жгутики отсутствуют;

· в организме человека и животных, а также на питательных средах с кровью образуют макрокапсулу белковой природы;

· в присутствии О2 формируют центрально расположенные овальной формы споры;

· грамположительные;

· в мазках располагаются цепочками с утолщениями на концах (напоминают «бамбуковую трость»);

· обработка культур пенициллином приводит к разрушению клеточной стенки и образованию цепочек, состоящих из протопластов (в виде «жемчужного ожерелья»);

· споры окрашиваются по методу Ожешко в красный цвет; капсула выявляется по методу Бури-Гинса и Романовского-Гимзе

Культуральные свойства

· Факультативный анаэроб, оптимальная температура культивирования 35-370С, рН 7,2-7,6, хорошо растет на обычных питательных средах (МПА, МПБ). Через 17-24 часа образует R-форму колоний – серебристые крупные зернистые колонии, от краев отходят пучки нитей (в виде «головы Медузы» или «львиной гривы»)

· На бульоне растет в виде ватных хлопьев, не вызывая помутнения среды

· Дает характерный рост при посеве уколом в желатин – в виде «перевернутой елочки»

· На кровяном агаре гемолиза не дает

Биохимическая активность

· Ферментирует большинство сахаров (глюкозу, сахарозу, декстрин, трегалозу, фруктозу, крахмал) до кислоты без газа.

· Положительная реакция Фогес-Проскауэра (образует ацетилметилкарбинол при ферментации глюкозы с окрашиванием среды в красный цвет)

· Разжижает желатин, восстанавливает нитраты в нитриты, образует сероводород и аммиак, индол не образует, пептонизирует молоко

Антигенная структура

1. О-антиген – соматический, термостабильный липополисахарид клеточной стенки, группоспецефический (выявляется в реакции колцепреципитации по Асколи)

2. К-атиген – капсульный, полипептидный, видоспецифический

3. Протективный антиген – белковый токсин – обладает выраженными иммуногенными свойствами, т.к. к нему образуются антитела, обладающие защитными свойствами

Факторы патогенности

Токсины

Bacillus anthracis выделяет экзотоксин, имеющий сложную структуру – состоит из трех компонентов: протективного антигена, летального и отечного факторов.

· Протективный антиген – взаимодействует с мембранами клеток и опосредует проявление активности других компонентов

· Летальный фактор («мышиный токсин») – проявляет цитотоксический эффект и вызывает отек легких

· Отечный фактор – повышает концентрацию цАМФ, вызывая развитие отеков

Эти компоненты по отдельности токсическое действие не проявляют! Синтез экзотоксина контролируется плазмидой.

Ферменты – протеазы, обеспечивающие инвазию и приводящие к деструкции тканей. Структурные и химические компоненты клетки: капсула (участвует в адгезии и защищает от фагоцитов), споры (обеспечивают длительное сохранение во внешней среде)

Резистентность

Вегетативные формы малоустойчивы. Напротив, споры – очень устойчивы во внешней среде: при 1000С – более 1 часа, автоклавирование при 1210С – 15-20 минут, сухой жар при 1400С – 2-3 часа; дезинфицирующие средства (10% раствор формалина и 5% раствор карболовой кислоты) – 6-8 часов; в почве, в шкурах зараженных животных – сохраняются десятилетиями (30 и более лет).

Чувствительны к стрептомицину, левомицетину, тетрациклину и другим антибиотикам.

Эпидемиология.

Типичный зооноз.

Среди животных наиболее восприимчивы травоядные. Животные заражаются при заглатывании спор во время выпаса или при поедании загрязненных кормов.

Источник инфекции – больные животные (выделяют возбудителя сибирской язвы с мочой и испражнениями). Значительную эпидемиологическую опасность представляют скотомогильники, особенно если трупы животных, павших от сибирской язвы были зарыты без надлежащих предосторожностей

Пути передачи:

· Прямой контактный (при контакте с инфицированным материалом – уходе за больными животными, убое, разделке туш);

· Алиментарный (при употреблении в пищу мяса больных животных);

· Воздушно-капельный, воздушно-пылевой (при вдыхании спор возбудителя);

· Возможен трансмиссивный путь (через укусы кровососущих насекомых – слепней и мух). Инкубационный период – 2-3 суток

Патогенез и клинические особенности

В зависимости от места входных ворот выделяют:

· Кожная форма (чаще) – во входных воротах сначала больные отмечают усиливающийся кожный зуд, затем появляется красноватое пятно, быстро трансформирующееся в папулу медно-красного цвета, через несколько часов на месте папулы образуется везикула с серозно-геморрагическим содержимым, из-за сильного зуда больные часто срывают везикулу, либо она лопается сама, и на ее месте образуется черный увеличивающийся в размерах струп (напоминает уголек), струп окружен инфильтратом в виде багрового вала. Кожная форма сопровождается повышением температуры тела до 39-400С, длится примерно 5-6 дней, летальность не более 5%

· Легочная форма – протекает очень тяжело, развивается пневмония по типу отека легких, в большинстве случаев заканчивается летально (смерть наступает на 2-3 сутки вследствие сердечнососудистой недостаточности)

· Кишечная форма – проявляется повышением температуры до 39-400С, рвотой и диареей с кровью, заканчивается летально в 100% случаев

При всех формах возможно развитие диссеминированной инфекции.

Иммунитет

Постинфекционный иммунитет – гуморальный антимикробный и антитоксический напряженный (повторные заболевания возможны, но редко). Развивается ГЗТ

Специфическая профилактика

Проводится вакцинация по эпидпоказаниям, а также планово – группам риска (военным, животноводам) живой сибиреязвенной сухой вакциной СТИ (высушенная взвесь живых безкапульных Bacillus anthracis) или комбинированной вакциной (СТИ+протективный антиген)

Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка

Получена из крови кролика, гипериммунизированного культурой В. anthracis. Применяется для постановки реакции термопреципитации по Асколи

Сибиреязвенная живая вакцина СТИ

Высушенную взвесь живых спор В. anthracis авирулентного бескапсульного штамма. Применяется для профилактики сибирской язвы

Противосибиреязвенный иммуноглобулин

Гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови лошади, гипериммунизированной живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом В.anthracis, используется с профилактической и лечебной целью.

Неспецифическая профилактика (большая роль):

· Изоляция больных животных;

· Сжигание трупов погибших животных;

· Санитарный надзор за предприятиями, перерабатывающими животное сырье и т.д. Специфическое лечение – лошадиный противосибиреязвенный иммуноглобулин.

Для антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин

Микробиологическая диагностика:

Наиболее достоверным методом лабораторной диагностики сибирской язвы является выделение из исследуемого материала культуры возбудителя. Диагностическую ценность представляют также реакция термопреципитации по Асколи и кожно-аллергическая проба.

Бактериоскопическое исследование

Изучение окрашенных по Граму мазков из патологического материала позволяет обнаружить возбудителя, представляющего собой грам + крупную неподвижную стрептобациллу. В организме больных и на белковой питательной среде микроорганизмы образуют капсулу, в почве— споры.

Бактериологическое исследование.

Исследуемый материал засевают на чашки с питательным и кровяным агаром, а также в пробирку с питательным бульоном. Посевы инкубируют при 37С в течение 18ч. В бульоне В. anthracis растет в виде хлопьевидного осадка; на агаре вирулентные штаммы образуют колонии R-формы. Авирулентные или слабовирулентные бактерии образуют S-формы колоний.

В. anthracis обладает сахаролитическими свойствами, не гемолизирует эритроциты, медленно разжижает желатин.

Под действием пенициллина образует сферопласты, имеющие вид «жемчужин». Это явление используется для дифференциации В. anthracis от непатогенных бацилл.

Биопроба.

Исследуемый материал вводят подкожно морским свинкам и кроликам. Готовят мазки из крови и внутренних органов, делают посевы для выделения чистой культуры возбудителя.

Экспресс-диагностика проводится с помощью реакции термопреципитации по Асколи и иммунофлюоресцентного метода.

Реакцию Асколи ставят при необходимости диагностировать сибирскую язву у павших животных или у умерших людей. Образцы исследуемого материала измельчают и кипятят в пробирке с изотоническим раствором хлорида натрия в течение 10 мин, после чего фильтруют до полной прозрачности.

Метод иммунофлюоресценции позволяет выявить капсульные формы В. anthracis в экссудате. Мазки из экссудата через 5—18 ч после заражения животного обрабатывают капсульной сибиреязвенной антисывороткой, а затем флюоресцирующей антикроличьей сывороткой. В препаратах, содержащих капсульные бациллы, наблюдается желто-зеленое свечение возбудителя.

Кожно-аллергическая проба. Ставится на внутренней поверхности предплечья — внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через 24 ч появляются гиперемия и инфильтрат