37. Особенности противовирусного иммунитета

Врождённый противовирусный иммунитет. Быстрая (часы) и неспецифическая относительно инфицирующего вируса реакция организма, направленная на его элиминацию. Обеспечивается координированными действиями гетерогенной популяции клеток миелоидного происхождения и натуральными киллерами (NK). Всегда реализуется как первичная (нет иммунологической памяти). Приобретённый (адаптивный) иммунитет. Развивается медленно (дни). Высокоспецифичен к антигенам инфицирующего вируса. Вторичный ответ на тот же антиген ускорен (благодаря иммунологической памяти). Эффекторы - антитела и цитотоксические Т-лимфоциты. Встроен в систему врождённого иммунитета: индуцируется антигенпредставляющими клетками (АПК) (определяющими клеточный или гуморальный тип ответа) и завершается элиминацией чужеродного материала и клеточного дебриса* механизмами врождённого иммунитета.

Дебрис - осадок, формируемый в результате центрифугирования суспензии гомогенизированной ткани и содержащий полуразрушенные клетки, волокна и т.п. Особенности противовирусного иммунитета:

1. Первыми реагируют на вирус система интерферонов и Т-киллерные клетки (а не макрофаги и система комплемента).

2. Вирусы оказывают слабое антигенное воздействие на В-лимфоциты, для их активирования, пролиферации и дифференцировки нужно участие Т-хелперов и представление ими процессивного вирусного антигена при участии молекул МНС 2, макрофагов и других АПК.

3. Вирусы вызывают заболевание только проникая в клетку, вирус “узнаёт” специфические рецепторы и прикрепляется к ним (белки-лоцманы), иногда они находятся в углублениях и являются антителонедоступными.

4. Интерфероны подавляют внутриклеточное размножение вирусов.

5. Противовирусное действие оказывают α-интерферон (препятствует адсорбции вирусов на клетке) и β-интерферон (подавляет размножение орто- и парамиксовирусов).

6. Цитотоксические Т-лимфоциты и другие киллерные клетки осуществляют обнаружение и уничтожение инфицированных клеток.

7. Синтез антител связан с системой фагоцитов, В- и Т-лимфоцитов и МНС.

8. Антитела взаимодействуют с вирусными рецепторами и не дают адсорбироваться вирусу на мембране клеток, таким образом нейтрализуется их активность.

38. Отличительные черты риккетсий. Методы культивирования. Риккетсиозы, общая характеристика.

Отличительные черты риккетсий:

1). На поверхности их клеточных стенок выявлено наличие капсулообразного слизистого покрова, а также микрокапсулы, которые содержат группоспецифичные антигены. В структуре стенокклеток этих бактерий обнаружены пептидогликаны, липополисахариды и белки, большая часть которых является видоспецифичными АГ.

2). В составе цитоплазматической мембраны таких бактерий выявлено наличие значительного количества ненасыщенных жирных кислот.

3). Для их клеточных стенокхарактерны осмотические свойства и транспортная система по типу АТФ-АДФ.

4). В составе их нуклеоида – кольцевая хромосома.

5). Метаболизм данных бактерий независим от метаболизма хозяина. Главным источником энергетических ресурсов внеклеточных риккетсий является вещество – глутамат.

6). Бактериальные клетки риккетсий обладают способностью к индукции своего фагоцитоза при помощи эукариотной клетки.

7). Риккетсии обладают фактором адгезии, что делает возможным их крепление и колонизацию в организме.

Методы культивирования:

Риккетсии– бактерии, которые, как и вирусы, являются облигатными внутриклеточными паразитами. Поэтому для их культивирования применяются: а) тканевые культуры; б) куриные эмбрионы; в) лабораторные животные.

А). Культивирование риккетсий проводят на переживающих тканях в жидкой среде Мейтлендов (раствор Тироде и сыворотка) при 37° С 10-14 дней или на Тироде-сывороточном агаре с добавлением на поверхность измельченной эпителиальной ткани при 37° С 6-10 дней.

Б). Широко используется культивирование в 8-12-дневном курином эмбрионе. Эмбрион заражают в полость желточного мешка или на хорион-аллантоисную оболочку. Зараженные яйца помещают в термостат при 37° С на 6-7 дней. Этот метод используется при изготовлении вакцин и диагностических препаратов из риккетсий.

В). Риккетсии культивируют в организме белых мышей, которых заражают интраназально. В легких мышей накапливается большое количество риккетсий.

Риккетсии выращивают по методу Вейгля и Мосинга. Для этого платяных вшей заражают взвесью риккетсий путем введения в кишку через анальное отверстие с помощью специальных капилляров. Пшеничнов и Райхер разработали метод культивирования риккетсий на личинках вшей, которых кормят дефибринированной кровью с риккетсиями через мембрану кожи трупа.

Риккетсиозы:

Возбудитель - рикетсии

Морфология.

Морфологически риккетсии являются мелкими (0,2-0,5×0,8-2 мкм) полиморфными микроорганизмами, могут иметь палочковидную, кокковидную и нитевидную формы. Неподвижны (за исключением R. conorii, R. sibirica), не образуют спор (С. burnetii могут образовывать споровидные формы, обеспечивающие устойчивость к высоким температурам и высушиванию), имеют микрокапсулу. Грамотрицательные микроорганизмы. Плохо красятся обычными анилиновыми красителями, и поэтому для их окраски используют метод Романовокого-Гимзе (при этом кокковидные формы риккетсий окрашиваются в розово-красный цвет, а палочковидные окрашиваются с голубоватым оттенком). Кроме того, для окраски микроорганизмов используется метод Маккиавелло в модификации П.Ф. Здродовского (риккетсии окрашиваются в ярко-розовый или красный цвет, протоплазма клеток – в голубой, а ядра – в синий). Также можно использовать серебрение по Морозову (в этом случае риккетсии выглядят тёмно-коричневыми на светлокоричневом фоне).

Жизненный цикл.

Выявлены 2 формы риккетсий:

1.Вегетативные – размножающиеся.

2.Покоящиеся – обеспечивающие сохранность во внешней среде.

Культуральные свойства.

По типу дыхания риккетсии – аэробы. Риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами. Вследствие дефекта в энергетическом метаболизме – неспособность синтезировать НАД, полностью зависимы от своего хозяина и подобно вирусам не могут размножаться на искусственных питательных средах. Поэтому их культивируют:

1.В желточном мешке 6-7 дневного куриного эмбриона (наиболее эффективен) – эмбрион погибает через 6–13 дней после заражения (в зависимости от дозы);

2.В организме лабораторных животных – к возбудителю сыпного тифа очень чувствительный морские свинки, которые обычно используются для первичного выделения риккетсий (у свинок через 1 неделю появляется лихорадка, у самцов – воспаление оболочек яичка, риккетсии выделяются из крови, селезёнки, почек, особенно их много в головном мозге);

3.В организме переносчиков (вши, клещи).

4.В культуре клеток (менее удачная среда) – в мышиных и куриных фибробластах, культуре клеток почек обезьян и др. (с образованием через 8 – 10 дней бляшек диаметром ~1 мм);

Биохимическая активность. Биохимически не активны. Обладают гемолитическими свойствами в отношении эритроцитов кролика и барана.

Антигенная структура.

1.Группоспецифические антигены риккетсии – поверхностный термостабильный ЛПС клеточной стенки, отделяется при обработке эфиром. 2.Видоспецифические антигены – например, у R. prowazekii выделяют более глубоко расположенный корпускулярный термолабильный белковополисахаридный комплекс, не растворяется в эфире.

3.Антигены ОХ2, 19, К – перекрестнореагирующие антигены с антигенами неподвижных штампов Proteus vulgaris (выявляются в реакции агглютинации Вейля-Феликса).

Факторы патогенности.

Токсины:

· У риккетсий, как и у всех грамотрицательный бактерий, имеется эндотоксин (ЛПС КС), который освобождается при разрушении.

· Токсическая термолабильная белковая субстанция, обнаруженная в капсулоподобном слое, обладает свойствами экзотоксина.

Структурные и химические компоненты клетки: факторы адгезии и инвазии (пили I типа), с помощью которых они вначале прикрепляются к клеткам, а затем внедряются в них и размножаются.

По этиологии, эпидемиологии, патогенезу и клинической картине выделяют 6 групп риккетсиозов:

I группа – сыпного тифа: - эпидемический сыпной тиф – R. prowazekii; - рецедивный сыпной тиф (болезнь Брилля) – R. prowazekii; - эндемический (крысиный, блошиный) сыпной тиф – R. typhi;

II группа – клещевых риккетсиозов: - пятнистая лихорадка Скалистых гор – R. rickettsii; - марсельская лихорадка – R. conorii; - северо-азиатский риккетсиоз – R. sibirica; - везикулярный риккетсиоз – R. acari;

III группа – параксизмальных риккетсиозов: - волынская (пятидневная лихорадка) – В. guintana;

IV группа – Ку-риккетсиозов (пневмо-риккетсиозов): - Ку-лихорадка – С. burnetii;

V группа – цуцугамуши: - лихорадка цуцугамуши – О. tsutsugamushi; VI группа – риккетсиозов Эрлихия: - моноцитарный эрлихиоз – E. chaffeensis.

По эпидемиологии можно выделить 2 группы риккетсиозов.

1. Эпидемические антропонозы (эпидемический сыпной тиф и волынская лихорадка). Источник инфекции – больной человек или носитель. Переносчик – платяная или головная вошь.

Пути передачи:

· трансмиссивный (контаминационный – при втирании фекалий);

· воздушно-пылевой – через ВДП при встряхивании одежды, белья.

2. Эндемические зоонозы с природной очаговостью (на территории РФ регистрируются эндемический сыпной тиф, лихорадка цуцугамуши, северо-азиатский клещевой риккетсиоз и лихорадка-Ку).

Источник и резервуар инфекции – мелкие млекопитающиеся (прежде всего грызуны, а также другие дикие и домашние животные), Переносчики – кровососущие членистоногие: иксодовые клещи, блохи. Пути передачи:

· трансмиссивный;

· воздушно-капельный и воздушно-пылевой;

· алиментарный (молоко, мясо);

· контактно-бытовой.

Эпидемический сыпной тиф (синонимы: вшивый, военный) – это острое инфекционное заболевание, вызываемое риккетсиями Провацека, характеризующееся циклическим течением с лихорадкой, тяжелой интоксикацией, преимущественным поражением сосудистой и нервной систем, розеолезно-папулезной сыпью.

Эпидемический сыпной тиф – антропонозное заболевание. Источник инфекции – больной сыпным тифом или болезнью Брилля.

Механизмы передачи инфекции:

· Трансмиссивный (путь – контаминационный: в момент укуса у вши происходит акт дефекации, и фекалии, содержащие возбудителя, попадают на кожу, при укусе вошь впрыскивает в кожу вещества, вызывающие зуд, расчёсывая место укуса, человек втирает фекалии в ранку от укуса или расчёсы кожи);

· Аэрогенный (путь – воздушно-пылевой: так как возбудитель сохраняется в сухих фекалиях вшей, однако данный путь имеет второстепенное значение).

Переносчики – платяные (чаще) и головные вши, которые инфицируются при кровососании больного. Риккетсии размножаются в эпителии пищеварительного тракта вши, а через 4-7 дней в зависимости от окружающей температуры появляются в фекалиях вши. Вошь заразна до момента своей гибели от риккетсиоза, то есть не более 2 недель. Поскольку риккетсии не обнаруживаются в слюнных железах, то заражение здорового человека не может происходить при укусе вошью. Вши очень чувствительны к температурному режиму и поэтому быстро покидают заболевших с высокой температурой тела и умерших, переползая на здоровых людей.

Риккетсиозы — большая группа трансмиссивных острых ли­хорадочных инфекционных заболеваний, которые вызываются своеобразными внутриклеточными паразитами — риккетсиями — и имеют ряд общих иммунологических, патогенетических, патоморфологических и клинических черт.

(Ха-я развитием генерализованного васкулита, интоксикации, поражением ЦНС, специфическими высыпаниями на коже).

Эпидемиология. Риккетсиозы встречаются во всех странах света. Два из них — эпидемический сыпной тиф и волынская ли­хорадка — эпидемические антропонозы. Они характеризуются тем, что источником инфекции является больной человек или носитель, а переносчиком — платяная или головная вошь, у кото­рой риккетсии вызывают смертельную инфекцию.

Остальные риккетсиозы — эндемические зоонозы с природ­ной очаговостью (эпизоотии). Резервуаром возбудителя являют­ся некоторые виды мелких млекопитающих, а переносчиком — кровососущие членистоногие (клещи, блохи). Риккетсии хорошо приспособились к организму клещей и паразитирование в них протекает бессимптомно с длительным носительством благодаря трансовариальной передаче инфекции. Зоонозными риккетсиозами человек заболевает лишь при вторжении в эндемические очаги соответствующей инфекции.

По характеру передачи все риккетсиозы являются трансмис­сивными болезнями. Лишь возбудитель Ку-лихорадки, хотя ино­гда и резервируется клещами, однако благодаря высокой устой­чивости в окружающей среде может передаваться еще контакт­ным, алиментарным и воздушно-капельным путем.

Этиология. Риккетсии представляют со­бой грамотрицательные бактерии, которые, приспособившись к внутриклеточному существованию, сохранили собственные фер­ментные системы, обеспечивающие автономный метаболизм этих микроорганизмов, но утратили способность противостоять неблагоприятным воздействиям окружающей среды. Поэтому, попадая в условия внеклеточного существования, риккетсии по­гибают.

Паразитируют они как на позвоночных, так и беспозвоночных животных. Риккетсии обладают тропизмом к клеткам эндотелия и серозных оболочек, в которых и происхо­дит их развитие и размножение.

Важнейшей особенностью жизнедеятельности риккетсии в организме является их способность продуцировать токсичные ве­щества белковой природы — эндотоксин, связанный с риккетсиозной мембраной- Эндотоксин действует на ткани, разобщая окислительное фосфорилирование.

Патогенез и клинико-морфологические проявления. Входными воротами является обычно кожа в месте укуса насекомого, куда вместе с фекалиями втирается инфекционный агент, далее распространяющийся ге­матогенным путем.

Патологический процесс при риккетсиозах человека обусло­влен тем, что риккетсий размножаются главным образом в эндотелии капилляров, что приводит к развитию гранулематозного васкулита, часто сопровождающегося тромбозом. Последний в сочетании с вазопаралитическим действием риккетсиозного эндотоксина вызывает значительные нарушения ЦНС и расстройства кровообращения.

Клинически все риккетсиозы человека являются остро проте­кающими заболеваниями с выраженной интоксикацией, часто тифозным состоянием, характерным симптомокомплексом пора­жения ЦНС и сердечно-сосудистой системы, наличием характер­ной экзантемы. При этом каж­дый риккетсиоз имеет свою достаточно типичную клиническую картину. При Ку-лихорадке возможно хроническое течение про­цесса. Эпидемический сыпной тиф, пятнистая лихорадка Скали­стых гор и лихорадка цуцугамуши являются тяжелыми заболева­ниями с высокой летальностью, которая до применения антибио­тиков достигала 50 %. После перенесенных риккетсиозов обыч­но остается стойкий иммунитет.

***Классификация риккетсии и риккетсиозов.

Риккетсии пред­ставлены 3 родами: Rickettsia, Coxiella и Rochalimaea. Наиболее многочисленным является род Rickettsia, представители которого вызывают три основные группы риккетсиозов.

1. Группа клещевых пятнистых лихорадок (наиболее древняя группа). Включает клещевой риккетсиоз (клещевой сыпной тиф Северной Азии), марселъскую лихорадку, везикулезный риккет­сиоз, лихорадку Скалистых гор и клещевой сыпной тиф Север­ного Клинсленда. Риккетсии, вызывающие эти болезни, характе­ризуются наличием общих антигенов. Для них характерны и при­знаки экологической общности — это природно-очаговые ин­фекции, резервуаром которых являются иксодовые (гамазовые) клещи, а также дикие и домашние животные.

2. Группа вшино-блошиного сыпного тифа.

Она включает 2 генетически и серологически близких, но экологически и эпи­демиологически различных заболевания:

а) антропоноз — эпидемический, или вшиный, сыпной тиф;

б) зооноз — эндемический, или крысиный (блошиный), сып­ной тиф.

3. Возбудители этой группы вызывают ряд заболеваний.

Цуцугамуши, или японскую речную лихорадку, вызывает R.tsutsugamushi. Ку-лихорадка (коксиеллез) — зооноз домашних и диких жи­вотных вызывает Coxiella.