34. Понятие об антигенных системах крови. Подробная характеристика антигенных систем ав0, резус-фактор.

Антигенная система крови – это совокупность её антигенов, контролируемых аллельными генами. Все антигены крови делятся на клеточные и плазменные. Основное значение в трансфузиологии имеют клеточные антигены. Последние могут быть эритроцитарными, лейкоцитарными, тромбоцитарными.

Количество антигенных систем крови очень велико (около 500). Наиболее значимыми являются система AB0 и система резус-фактора. Среди второстепенных систем, имеющих клиническое значение, можно отметить системы Келл, Даффи, Кидд, Лютеран, MNS, HLA.

Система АВ0 является основной серологической системой, определяющей совместимость или несовместимость переливаемой крови. Ее составляют два генетически детерминированных агглютиногена (антигена) ‒ А и В и два агглютинина (антитела) ‒α и β. Агглютиногены содержатся в строме эритроцитов, а агглютинины ‒ в плазме крови. Агглютинин α является антителом по отношению к агглютиногену А, а агглютинин β‒ по отношению к агглютиногену В. В эритроцитах и плазме крови одного человека не может быть одноименных агглютиногенов и агглютининов. При их встрече возникает реакция изогемагглютинации. Исходя из комбинации агглютининов и агглютиногенов, выделяют 4 группы крови по системе AB0:

0(I) – в плазме агглютинины α и β, в эритроцитах агглютиногенов нет

A(II) – в плазме агглютинин β, в эритроцитах агглютиноген А

B(III) – в плазме агглютинин α, в эритроцитах агглютиноген В

AB(IV) – в плазме агглютининов нет, в эритроцитах агглютиногены А и В

Система резус-фактора включает в себя 50 различных эритроцитарных антигенов, из которых учитывается только наиболее иммуногенный – антиген D. Если на мембране эритроцитов человека есть антиген D, он считается резус-положительным (85% населения), если нет – резус-отрицательным (15% населения). В организме человека в норме антитела к резус-фактору отсутствуют. Они появляются только в случае, если резус-отрицательный человек был сенсебилизирован, то есть получил контакт с антигеном D. Такая ситуация лежит в основе развития резус-конфликта

35. Определение групп крови по системе ав0 с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток (оснащение, техника, учёт результатов, типичные ошибки).

Определение группы крови с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Необходимое для данной процедуры оснащение включает в себя набор стандартных (то есть с известной групповой принадлежностью) сывороток, исследуемую кровь, эмалированный планшет, иглы, пипетки, стеклянные палочки. Реакцию проводят в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С.

В лунки планшета по горизонтали наносится по одной капле объёмом 0,1 мл сывороток I, II, III групп. Затем наносится ещё один горизонтальный ряд тех же групп, но используются сыворотки другой производственной серии. Таким образом исключаются ошибки, связанные с использованием бракованной сыворотки. Результаты реакции в обоих горизонтальных рядах должны быть идентичны. В каждую каплю сыворотки вносится по 0,01 мл исследуемой крови, производится осторожное перемешивание стеклянными палочками. Через 5 минут в каждую лунку добавляется по капле физиологического раствора и производится учёт результатов. При положительной реакции в лунке видны красные зернышки, состоящие из склеенных эритроцитов. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет.

О групповой принадлежности крови пациента судят по комбинации лунок, в которых произошла агглютинация.

0(I) – агглютинации нет нигде.

A(II) – агглютинация в лунках с сыворотками I и III групп.

B(III) – агглютинация в лунках с сыворотками I и II групп.

AB(IV) – агглютинация во всех лунках. В данном случае для окончательного вывода в седьмой лунке планшета ставится реакция между сывороткой IV группы и кровью пациента. Агглютинации быть не должно. Это контроль специфичности реакции, так подтверждается факт агглютинации именно из-за взаимодействия по системе АВ0, а не по какой-либо другой причине.

Ошибки при определении групповой принадлежности крови могут быть связаны с тремя группами причин.

Негодность реагентов. Стандартные сыворотки и эритроциты могут приходить в негодность в случае ненадлежащего хранения, либо изначально быть негодными для использования ввиду производственного брака. Для исключения подобных ошибок необходимо следить за соблюдением правил хранения реагентов, сроком их годности, внешним видом (прозрачность, наличие хлопьев), реакции ставить одновременно с препаратами двух разных производственных серий.

Технические ошибки. Наиболее распространённые из них следующие:

1. Плохая освещённость помещения, не позволяющая выявить агглютинацию.

2. Несоблюдение температурного режима. При температуре свыше 25°С реакции замедляются. При температуре ниже 15°С возможна холодовая панагглютинация – неспецифическая агглютинация во всех лунках.

3. Неправильное расположение сывороток и эритроцитов на планшете.

4. Использование одной и той же стеклянной палочки для перемешивания реагентов в разных лунках.

5. Нарушение соотношения между сывороткой и кровью (нужно 10:1).

6. Ранняя преждевременная оценка результатов реакции.

7. Недобавление в лунки капли физиологического раствора. Дело в том, что эритроциты в результате слипания могут образовать так называемые «монетные столбики», которые можно принять за зёрна агглютинации. При добавлении физиологического раствора они рассыпаются, а истинная агглютинация сохраняется.

Особенности исследуемой крови. Существуют заболевания, при которых агглютинабельность агглютининов может повышаться (инфекционные процессы) или снижаться (онкологические заболевания, болезни крови). Ошибки могут быть связаны с одновременным наличием в крови пациента эритроцитов с разной групповой принадлежностью. Такое явление называется кровяная химера.