2. Бактериологические методы (основные) имеют главное диагностическое значение. Применение эффективных элективных и дифференциально-диагностических питательных сред для данной группы микроорганизмов позволяет выделить и идентифицировать чистые культуры микроорганизмов, определить их родовую и видовую принадлежность, факторы патогенности, фаготипирование, чувствительность к антибиотикам и химиопрепаратам.

3. Серологические методы основаны на обнаружении специфических антител в сыворотке крови больного и динамики их нарастания в процессе заболевания, а в ряде случаев направлены на выявление антигенов. Имеет вспомогательное значение, т.к. его применение ограничивается выраженной мозаичностью антигенной структуры многих условно- патогенных микроорганизмов, наличием к ним антител у здоровых людей и слабая выраженность иммунного ответа.

4. Биологические методы (биопробы) заключаются в заражении лабораторных животных исследуемым материалом с целью выделения чистых культур микроорганизмов и определения их вирулентности. Используется редко из-за неспецифической клинической картины, вызываемой условно-патогенными микроорганизмами у лабораторных животных.

5. Аллергологические методы применяются для выявления гиперчувствительности организма человека к аллергенам микробного происхождения.

6. В последнее время молекулярно-биологический метод.

Необходимо отметить, что микробиологические исследования и особенно интерпретация полученных данных существенно отличаются от исследований при инфекциях, вызванных истинно-патогенными микроорганизмами. Классический постулат моноэтиологичной нфекции, сформулированный Кохом (триада Генле-Коха), не применим к оппортунистическим инфекциям.

Оценка результатов:

Обнаружение и подтверждение роли условно-патогенных микроорганизмов в развитии заболевания имеет решающее значение.

Критерии оценки роли условно-патогенных микроорганизмов в патологии:

• Выделение микроорганизмов из органов и тканей, которые в норме у здоровых людей являются стерильными;

• Обнаружение в исследуемом материале условно-патогенных микроорганизмов в больших количествах (например, 10⁵-10⁷ КОЕ мл/г для бактерий, для грибов и простейших – 10³-10⁴ КОЕ мл/г);

Количественный критерий – это количество колониеобразующих клеток или единиц (КОЕ) выделяемого вида микроорганизма в 1г или 1 мл исследуемого материала (10²-10³ – малая, 10⁴-10⁵ – средняя, 10⁵-10⁷ – высокая степень обсемененности).

• Повторное, многократное выделение одной и той же культуры из аналогичного материала от больного;

• Обнаружение идентичных условно-патогенных микроорганизмов в разных образцах материала (например, при пищевых токсикоинфекциях – в промывных водах желудка, рвотных массах, испражнениях, пищевых продуктах);

• Нарастание титра антител в 4 и более раз в парных сыворотках крови больного в отношении условно-патогенного микроорганизма, который предполагается как возбудитель данного патологического процесса. Иногда рекомендуется использовать в качестве антигенов аутоштаммы микроорганизмов, выделенных от больных;

• В случае госпитальной инфекции – выделение идентичных культур от группы больных;

• Совпадение данных лабораторного определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам с эффективностью антимикробной терапии в клинических условиях: улучшение состояния больного и уменьшение количества и элиминации соответствующих микроорганизмов.

Основное значение в установлении этиологии заболевания имеют два первых критерия, остальные – только дополнительное.

Оформление результатов лабораторных микробиологических исследований проводится на специальных бланках, которые передаются лечащему врачу в клинику.

Правила оформления результатов лабораторного исследования:

• В ответах указываются патогенные виды микроорганизмов, а также условно- патогенные микроорганизмы с наличием КОЕ в 1 г или 1 мл исследуемого материала. Сообщаются данные лабораторного определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (антибиотикограмма).

• При обнаружении микробных ассоциаций – перечисляются все микроорганизмы, указываются доминирующие виды и количественные микробиологические показатели.

• В соответствии с правилами международной номенклатуры в ответах приводятся видовые названия микроорганизмов. Например: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и т. д. Иногда идентификация проводиться и до штамма, тогда указывается штамм.

Пример: Бактериальный вагиноз – это дисбиоз/дисбактериоз влагалища (40-65% – в кожно-венерологическом диспансере, 15-45% – в гинекологических отделениях, 20% – в центрах планирования семьи – нет возможности зачатия, т.к. кислая рН снижает подвижность сперматозоидов, 10-26% – в родильных домах – невынашивание беременности, 3-4% - у здоровых женщин).

Диагноз ставиться по 4 признакам:

• сероватые выделения;

• рыбий запах;

• рН 4,5 и < (лакмусовая бумажка);

• микроскопия – наличие «ключевых клеток» – эпителиальные клетки с адсорбированными на них грамвариабильными бактериями (кокки, палочки).

Таким образом, одним из важнейших условий успешного проведения микробиологического анализа и правильной интерпретации полученных результатов является взаимопонимание врача-клинициста и врача-микробиолога.

Клиницист должен обладать определенными знаниями по микробиологии, позволяющими ему корректно поставить задачу перед лабораторией, правильно собрать материал для исследования, своевременно его транспортировать в лабораторию, уметь прочитать результаты анализа.

Микробиолог со своей стороны должен адекватно провести исследование и правильно сформулировать ответ: необходимо заключение по проведенному исследованию, а не только констатация фактов

Учитывая гетерогенность и изменчивость популяций условно-патогенных микроорганизмов, необходимо помнить:

• в процессе микробиологической диагностики исследовать большое число культур одного вида;

• при выборе химиотерапевтических средств ориентироваться на варианты и штаммы возбудителя, обладающие наиболее высоким уровнем резистентности к антибиотикам и антисептикам;

• в динамике болезни наблюдать за количественными и качественными изменениями в составе популяций возбудителя и проводить соответствующую коррекцию схемы лечения;

• предупреждать суперинфекции как путем изоляции больных, так и резкого снижения массивности микробной контаминации объектов больничной среды.

Принципы профилактики и лечения оппортунистических инфекций.

Лечение оппортунистических инфекций представляет собой сложную задачу и должно проводиться комплексно.

Причины неэффективности традиционной химиотерапии оппортунистических инфекций:

• Среди возбудителей преобладают несущие плазмиды множественной антибиотикоустойчивости (подбор эффективного антибиотика занимает длительное время, в течение которого возможна генерализация процесса);

• Часто смешанная инфекция или в процессе лечения может произойти смена одного возбудителя другим, имеющим отличный спектр антибиотикочувствительности;

• Недостаточная активность факторов неспецифической защиты;

• Слабый иммунный ответ организма больного на антигены возбудителя;

• Применение антибиотика (особенно бактерицидного) приводит к разрушению большого числа микробных клеток одновременно и к массивному выделению в кровь эндотоксина, что может привести к развитию эндотоксического шока.

Поэтому главным принципом лечения является комплексное применение препаратов микробицидного действия бактериологического происхождения и иммуностимулирующей терапии (например, бронхомунал, который содержит лизаты бактерий и т. д.).

Профилактические мероприятия должны включать соблюдение санитарно- гигиенического режима в антропогенной системе больничных учреждений:

• анализ заболеваемости ВБИ в ЛПУ;

• выявление и санация бактерионосителей;

• снижение инвазивных методов исследования и лечения;

• определение чувствительности госпитальных штаммов к антибиотикам;

• применение эффективных и надежных методов микробной деконтаминации (дезинфекция, стерилизация);

• предсезонная профилактика заболеваний;

• санитарно-просветительская работа.

Необходимо отметить, что специфические препараты для профилактики и лечения разработаны не для всех оппортунистических инфекций и существенной роли не играют.

Выводы:

1. Инфекции, вызванные условно-патогенными микроорганизмами, являются серьезной медико-социальной проблемой.

2. Условно-патогенные микроорганизмы, в основном, вызывают внутрибольничные инфекции.

3. Клиническая микробиология – новая самостоятельная, перспективная и стремительно развивающаяся медицинская дисциплина.