Другиеиндикаторныеферментыплазмы:
глутаматдегидрогеназа.ФерменткатализируетобратимуюреакциюпревращенияL-глутаминовой кислотывα-кетоглутаровую.Фермент содержится прежде всего в печени, почках исердечной мышце. Малые количества фермента имеются также в скелетной мускулатуре, мозгу,лейкоцитах.
Привирусномгепатитеактивностьглутаматдегидрогеназыповышаетсявкровивпервыесуткижелтушногопериода.Степеньеѐповышениязависитоттяжестивирусногогепатита,особенновысокиепоказателиотмечают приразвитиипечѐночной недостаточности.
Высокуюактивностьглутаматдегидрогеназыотмечаютубольныхпервичнымиметастатическимракомпечени.
Резкийподъѐмактивностиглутаматдегидрогеназынаблюдаютприостройзакупоркеобщегожѐлчногопротока. Алкогольная интоксикация также сопровождается значительным увеличением активностиглутаматдегидрогеназывкрови.
Лактатдегидрогеназа-1.присутствует в большой концентрации в мышце сердца (тетрамер НННН), а также вэритроцитах и корковом веществе почек; Повышение активности ЛДГ-1 в течение первых трѐх суток послепоявления болей позволяет с большой вероятностью диагностировать инфаркт миокарда или исключить этотдиагноз.
КреатинкиназаМВ–этовнутриклеточныйфермент,которыйявляетсяспецифичнымичувствительныминдикаторомповреждениямиокарда.
Значениеопределенияизоферментногоспектравдиагностике
ПрослеживаетсязакономерностьвотношенииактивностиизоферментовЛДГ:активность ЛДГ2>ЛДГ1>ЛДГ3>ЛДГ4>ЛДГ5. Повреждение того или иного органа изменяетизоферментный спектр сыворотки крови, причѐм эти изменения обусловлены спецификойизоферментногосоставаповреждѐнного органа.
ИсследованиеактивностиизоферментовКФКвсывороткекровиимеетважноедиагностическоезначение.Изоферментыкреатинкиназыособоважноисследоватьприостроминфарктемиокарда,таккакМВ-формавзначительномколичествесодержитсяпрактически только в сердечной мышце. Повышение активности МВ-формы в сывороткекровисвидетельствуетопораженииименносердечноймышцы.
9.Использованиеферментативныхтестоввдиагностике.Принципидиагностическое значение определения активности холинэстераз.
Специфические ингибиторы холинэстераз (обратимого и
Необратимого действия). Ингибиторы, как лекарственныепрепараты.
ФЕРМЕНТАТИВНЫЕМЕТОДЫАНАЛИЗА,основанынаиспользованиихим.р-цийсучастиемферментов.Осодержанииопределяемогокомпонентасудятлибопокол-вуконечного продукта ферментативной р-ции, либо, чаще, по начальной скорости процесса,положенноговосновуметодикиопределения.Длянаблюдениязаскоростьюферментативной
р-цииприменяютобычноинструментальныеметоды,чащедругих-люминесцентные,
спектрофотометрич.,электрохимические.Достоинстваферментативныхметодованализа:высокая чувствительность, обусловленная активностью ферментов, природой индикаторныхр-ций(спомощьюк-рыхопределяютв-во)испособамидетекциианалит.сигнала;высокая
селективность и мягкие условия проведения анализа.
Дляизученияактивностихолинэстеразыиспользуютразличныеспособы:
А. Биологические, заключающиеся в обработкеисследуемой сывороткой ацетилхолина,после чего им воздействуют на мышцу животного и по степени реакции мышцы судят околичествеацетилхолина,разрушенногоацетилхолинэстеразойиобактивностифермента.
Б.Химические:
i
Поколичествууксуснойкислоты,образованнойврезультатеферментативнойреакции:
манометрическиучитываютобъемуглекислогогаза,выделившегосяизкарбонатногобуферапод влияниемкислоты;
фиксируютсдвигpHрастворапоизменениюегоокраскивприсутствиииндикаторов
измеряютколичествощелочи,пошедшейнатитрованиеуксуснойкислоты.
Спектрофотометрическоеопределениеизмененияабсорбциисветапригидролизесубстратов,например,бензоилхолинасмаксимумомпоглощения240нм.
Определение ферментативной активносlти: а) по количеству расщепленногоацетилхолина хлорида.Под действием холинэстеразы происходит гидролизацетилхолинаиподкислениесредывыделяющейсяуксуснойкислотой.СдвигpHустанавливаетсяспомощьюиндикаторафеноловогокрасного.