17.Стадии репродукции вирусов: сборка вирионов и выход их из клетки.

Синтез вирусных компонентов в клетке разобщён и может протекать в различных структурах ядра или цитоплазмы. После накопления определенного состава частиц вирус начинает собираться («одеваться»). Установлено, что при епродукции многих вирусов их компонентов синтезируется значительно больше, чем необходимо для формирования зрелых вирионов. Чтобы собралась вирусная частица, компоненты вируса должны узнавать друг друга и отличаться от клеточных.

В основе самосборки лежат два взаимодействия: специальное белок-нуклеиновое и белокбелковое. Белок-нуклеиновое взаимодействие заключается в том, что белок распознаёт небольшой участок на молекуле нуклеиновой кислоты и связывается с ним. Затем к этому белку присоединяются другие вирусные белки белок-белковое взаимодействие.

У простых вирусов сначала формируются провирионы (предшественники), которые после модификации белков превращаются в зрелые вирионы.

Сборка сложных вирусов осуществляется многоступенчато: сначала формируются нуклеокапсиды (сердцевины) и уже с ними контактирует белки суперкапсидных оболочек.

Сборка нуклеокапсидов, провирионов осуществляется на «вирусных фабриках». Образование суперкапсида происходит за счет захвата вирусом при почковании части оболочки клетки (ядерной или цитоплазматической). За исключением вируса оспы. У него суперкапсид не приобретается из клетки, а синтезируется вновь самим вирусом.

Выход вирусных частиц осуществляется двумя путями:

1. Почкование – захват вирусом части оболочки – оболочечные вирусы. Процесс освобождения вирусов из клеток может продолжаться очень долго, клетки живут, делятся и продуцируют новое вирусное потомство. Во время этого процесса вирион дозревает, приобретая суперкапсид.

2. Взрывной путь – клетки быстро погибают, а в окружающей среде накапливаются сотни и тысячи новых вирусных частиц безоболочечные вирусы.

Выпадение любого из указанных этапов приводит к нарушению нормального цикла и влечет за собой либо полное подавление размножения вирусов, либо появление неполноценного потомства. Что и используется для борьбы с вирусными заболеваниями (противовирусные препараты).

18.Культивирование вирусов в организме естественно восприимчивых и лабораторных животных.

Выбор экспериментальных животных определяется целью работы и видовой чувствительностью к изучаемому вирусу. Для заражения используют обезьян, кроликов, морских свинок, хомячков, белых крыс и мышей. Лабораторных животных заражают различными способами в зависимости от тропизма вируса к определенным тканям. Так, например, для культивирования нейротропных вирусов заражение производят преимущественно в мозг (вирусы бешенства, клещевого энцефалита и др.), культивирование респираторных вирусов осуществляется при интраназальном инфицировании животных (вирусы гриппа), дерматотропных (вирус оспы) путем накожного и внутрикожного заражения. Наиболее часто используются накожное, внутрикожное, внутримышечное, внутрибрюшинное и внутримозговое заражение. При первичном заражении животные могут не заболеть, поэтому через 5-7 дней внешне здоровых животных выводят из эксперимента, а из их органов готовят суспензии, которыми заражают следующие партии животных. Эти последовательные заражения называются «пассажами».

Индикацию, т.е. обнаружение факта репликации вируса, устанавливают на основании развития типичных признаков заболевания, патоморфологических изменений органов и тканей животных или положительной реакции гемагглютинации (РГА). РГА основана на способности некоторых вирусов вызывать агглютинацию (склеивание) эритроцитов различных видов животных, птиц и человека за счет поверхностного вирусного белка гемагглютинина. В настоящее время использование животных для культивирования вирусов ограничено, в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных научных целях.