- •3 Раздела
- •История кафедры микробиологии и вирусологии.
- •Медицинская микробиология, ее задачи, связь с клиническими дис- циплинами.
- •Основные задачи:
- •Обязанности микробиолога:
- •Обязанности клинициста:
- •3. Структура бактериологической лаборатории.
- •Требования к осуществлению контроля биологической безопасности в бактериологических лабораториях
- •Основные методы лабораторной диагностики инфекционных заболе ваний.
- •Молекулярно-биологические:
- •Систематика и номенклатура микробов. Домены:
- •Основные формы:
- •Строение бактериальной клетки
- •Оболочечные структуры:
- •Цитоплазма, ее составные.
- •Поверхностные структуры: жгутики, пили.
- •Спорообразование у бактерий.
- •Стадии спорообразования:
- •Споры устойчивы за счет:
- •Тема 2 Влияние физических факторов на микроорганизмы.
- •Химические вещества:
- •Окраска структурных элементов микробной клетки
- •4.Для накопления чистой культуры
- •Способы создания условий:
- •Методы выделения чистых культур: Основанные на принципах механического разделения
- •Дыхание бактерий
- •Фазы развития бактериальной популяции в жидкой питательной среде.
- •Питание бактерий
- •Колонии:
- •4. Микроскопический метод проверки чистоты выделенной культуры :
- •1. Выявление сахаролитической активности
- •В составе микробиоты человека:
- •После рождения процесс колонизации толстого кишечника:
- •Положительная роль нормальной микрофлоры для организма
- •Эубиоз и дисбиоз.
- •Санитарная микробиология
- •Микрофлора воздуха. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.
- •Микрофлора воды.
- •Микробиологические показатели доброкачественности пищевых продуктов
Стадии спорообразования:
Подготовительная. В цитоплазме обр. уплотненный уч., без свободной воды,=«спорогенной зоной». В ней нуклеоид.
Стадия предспоры. Вокруг зоны – оболочка из двойной ЦПМ.
Между двумя ЦПМ – кортекс из пептидогликана.
Стадия созревания. С внешней стороны наружной ЦПМ образуется обо- лочка споры с пов. сод. солей кальция. Вегетативная часть клетки лизируется, освобождая спору.
Споры устойчивы за счет:
низкого содержания воды в связанном состоянии;
наличия многослойной оболочки с пов. содержанием солей кальция.
Споры обнаруживают окраской по методу Ожешко (спора в ярко-красный цвет, вегетативная часть– в синий), или фазово-контрастной микроскопии.
Спорообразующие бактерии:
Bacillus anthracis Clostridium perfringens Clostridium tetani Clostridium botulinum
Тема 2 Влияние физических факторов на микроорганизмы.
Стерилизация –уничтожение вегетативных и споровых форм внутри или на пов. предметов. Методы
Физические.
-в пламени, прокаливание при поверхностной стерилизации негорючих и теплоустойчивых предметов перед использованием
-кипячением, не уничтожает споры.
-сухим паром, используют герметичные: стерилизационные коробки (биксы), двойную мягкую упаковку из бязи, пергамент, влагопрочную бумагу (крафт-бумага), полиэтилен высокой плотности.
-паром под давлением в автоклаве под давлением (посуда, физиологический раствор, дист. вода, питательные среды без белков и углеводов, приборы, из резины) в течение 20-30 минут при 120-1210С (1 атм). Любые растворы, содержащие белки и углеводы, стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм. (1150С) в течение 20-30 минут
Любой инфицированный микроорганизмами (заразный) материал стерилизуют при давлении в 1,5 атм. (1270С) – 1 час, или при давлении 2,0 атм. (1320С) – 30 минут.
-текучим паром в аппарате Коха или в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Текучим паром материалы, которые разлагаются или портятся при температуре выше 1000С – питательные среды с углеводами, витаминами, растворы углеводов и т. п. Дробным методом – при температуре не выше 1000С по 20-30 минут в течение 3-х дней. Споры сохраняют жизнеспособность и прорастают в течение суток при комнатной температуре. Последующее прогревание = гибель клеток из спор в промежутках.
-пастеризация– однократное нагревание до 50-650С (в течение 15-30 минут), 70-800С (в течение 5-10 минут). Для уничтожения бесспоровых форм в пищевых продуктах (молоко, соки, вино, пиво)
-тиндализация-метод дробной стерилизации, прогревание при 56-580С в течение часа 5-6 дней подряд.
-фильтрование-механический метод. Мембранная фильтрация для стерилизации масел, мазей и растворов, неустойчивых к нагреванию, – растворы для внутривенных инъекций, диагностические препараты, растворы витаминов и антибиотиков, среды для культур тканей и т.д.
-облучение УФ-лучами-малая проникающ. способность, длительно воздействие для стерилизации воздуха, открытых поверхностей в помещениях.
- сухим жаром в сухожаровом шкафу.
Режимы стерилизации:температура 1500С – 2 часа; 1600С -1700C – 45 минут-1час;1800C – 30 минут;2000C – 10-15 минут.
-Ионизирующее для стерилизации в промышленных условиях медицинских изделий из термолабильных материалов для получения стерильных одноразовых пластмассовых изделий, хирургических перевязочных и шовных материалов.
Химические методы:
- стерилизации газами в лечебно-профилактических учреждениях для обеззараживания того, что нельзя другими способами (оптические приборы, кардиостимуляторы, аппараты искусственного кровообращения, эндоскопы, изделия из полимеров, стекла).
Формальдегид, окись пропилена, озон, надуксусная кислота и метилбромид, окись этилена.
-стерилизация растворами при обработке больших поверхностей или медицинских приборов, которые не могут другими методами.
Биологическая стерилизация = применение антибиотиков
Большинство изделий медицинского назначения из металла, стекла, пластмасс, резины проходят предстерилизационную обработку:
- замачивание в моющем растворе 15 минут; при температуре раствора не менее 18°С.
- мойка в моющем растворе в ручном режиме 1 минуты;
- ополаскивание под проточной водой 3-10 минут;
- сушка горячим воздухом в сушильном шкафу.
Контроль качества предстерилизационной путем амидопириновой пробы. Остаточные кол-ва щелочных компонентов моющего средства фенолфталеиновой пробы.
Простерилизованные изделия хранят не более 3-х суток.
Препараты для стерилизации: кислоты или щелочи, перекиси (6% перекиси водорода), спирты (этиловый, изопропиловый), альдегиды (формальдегид, глутаровый альдегид), галогены (хлор, хлорамин, иодофоры – вескодин), четвертичные аммониевые основания, фенольные соединения (фенол, крезол), 20% Бианол, 20% Колд-Спор, комбинированные препараты («Дезэффект», «Аламинал», «Септодор», «Виркон»), совмещающие дезинфекцию и предстерилизационную обработку.
Физический метод контроля = термометры и манометры.
Химический метод .
Химические тесты – это запаянная стеклянная трубка, заполненная смесью химических соединений с органическими красителями, изменяющие цвет при го определенной температуре в разных контрольных точках паровых и воздушных стерилизаторов. Термохимические индикаторы = полоски бумаги.
Биологический метод на основании гибели спор тест-культур. Биотест – дозированное количество тест-культуры на носителе. Для контроля парового стерилизатора споры Bacillus stearothermophilus ВКМ В-718, а воздушного– споры Bacillus licheniformis. После тесты на питательную среду.
После стерилизации в пробирки с биотестами вносят 0,5 мл цветной питательной среды,. Далее инкубируют. После учет изменения цвета питательной среды. Работа удовлетворительна, если цвет не изменился.
6. Асептика. Антисептика. Химические вещества.
Асептика – система мероприятий, предупреждающих попадание путем сохранения стерильности перевязочного материала, перчаток, инструментов, материала для обработки ран, дезинфекцию рук, операционного поля, аппаратуры.
Антисептика – комплекс лечебно-профилактических мероприятий на уничтожение или подавление размножения на коже, слизистых, ране.
Методы: механический (удаление некротизированных тканей); физический (дренирование ран); биологический (интраоперационное введение антибиотиков); химический (антисептиков).