6. Микрофлора воды.

Отражает микробный пейзаж почвы. Микробная обсемененность открытых водоемов зависит от поступления ливневых, талых и сточных вод=могут передаваться возбудители холеры, брюшного тифа, дизентерии, лептоспироза, энтеровирусных ин-фекций.

Естественная среда обитания. Совокупность водных микроорганизмов - микробный планктон.

Типы водной среды: пресные поверхностные (воды рек, ручьёв, озёр, прудов и водохранилищ), подземные (почвенные, грунтовые, артезианские), атмосферные (дождь, снег) и солёные (морские и озёрные).

Сточные воды: хозяйственно-фекальные, промышленные, смешанные, талые и ливневые; микрофлора этих вод загрязняет природные воды. Характер микрофлоры водоёмов определяется особенностями конкретной водной среды.

Микрофлора водоёмов:

• Аутохтонная(собственно водные) микрофлора - постоянно живущих и размножающихся. Состав напоминает почву, с которой соприкасается. Специфически водная: Micrococcus candicans и M. roseus, Sarcina lutea, Bacterium aquatilis communis, Pseudomonas fluorescens, Proteus и Leptospira. Анаэробы : Bacillus cereus, B. mycoides, Chromobacterium violaceum, виды Clostridium.

• Аллохтонная микрофлора - случайно попавших и сохраняющихся короткое время.

Основной путь микробного загрязнения - попадание неочищенных отходов и сточных вод, при купании. Так попадают кишечной палочки (БГКП), энтерококк, стафилококк, нейссерии, пигментообразующие, спорообразующие бактерии, грибы и вирусы, простейшие, сальмонеллы и шигеллы.

Сапробность- характеристика степени загрязнённости водоёма по видовому составу и массе гидробионтов. 

По загрязнённости:

Полисапробные зоны (сильного загрязнения) = много легко разлагающихся органики и почти лишены кислорода. Микробный биоценоз обилен, ограничен анаэробными, грибами, актиномицетами.

Мезосапробные (умеренного) = доминирование окислительных и нитрификационных процессов. Нитрифицирующие, облигатно аэробные бактерии, Clostridium, Pseudomonas, Mycobacterium, Flavobacterium, Streptomyces, Candida и др.

Олигосапробные (зоны чистой воды) – окончился процесс самоочищения и минерализации, мало органики. Очищение идет за счет конкурентная активация аутохтонных сапрофитов

Микробиологические показатели оценки качества питьевой воды.

Показатели санитарного состояния воды.

1. ОБЩЕЕ МИКРОБНОЕ ЧИСЛО (ОМЧ)–  общее число микроорганизмов в 1 мл воды, способных обр. колонии на питательном агаре при t = 37^o C в течение 24 часов. не более 50

2. КОЛИ-ТИТР, КОЛИ-ИНДЕКС, ТИТР ЭНТЕРОКОККА и др. (оценивают количество санитарно-показательных микробов). E. coli, Str. faecalis (о свежем фекальном загрязнении); эшерихии

КОЛИ-ИНДЕКС – число жизнеспособных клеток E. coli в 1 л. p. Citrobacter, p. Enterobacter (о давнем).

КОЛИ-ТИТР – наименьший объём воды в мл, в котором определяется хоть одна жизнеспособная E. coli.

3) Выявление спор сульфитредуцирующих клостридий для оценки эффективности технологических процессов очистки воды, хлорирования.

4)определение колифагов титрационным методом в среде с Escherichia coli на питательном агаре

Методы определения.

Исследуют: водопроводную; дистиллированную; воду открытых водоемов, сточные, питьевую, с бассейнов.

Определение ОМЧ водопроводной воды: 

1) берут 100- 500 мл воды с соблюдением асептики

2)посев 10-кратных разведений в чашки Петри по 1 мл глубинным методом Коха на МПА (для бактерий) и на сусло-агар (для грибов); 

3)инкубируют при 37С, 24 час для бактерий и при 24С, 2-3 суток для грибов;

4)считают число колоний, умножают на степень разведения.

Определение коли-титра и коли-индекса для водопроводной воды и воды артезианских скважин. 

Двухфазный бродильный метод коли-титра.

Первый этап (1-ый день) – посев на среду Эйкмана (разведенная или нет глюкозопептонная среда – ГПС) с поплавками, инкубируют.

Концентрированную среду Эйкмана для анализа водопроводной.

Второй этап (2-ой день) – пересевы на среду Эндо и РДА (розолово-дифференциальный агар) из тех колб, где наблюдается рост. Признаки роста E. coli на среде Эйкмана - диффузное помутнение и образование газа.

Третий этап (3-ий день) – просматривают.  Признаки роста E. coli на РДА - пожелтение, вспенивание конденсационной жидкости и разрывы в РДА.Идентификация. Оксидазный тест на цитохромоксидазу. Если есть - бумажка синеет. E. coli - оксидазоотрицательная.

По количеству положительных проб по специальным таблицам определяют коли-титр и коли-индекс. 

Для определения коли-индекса воды - метод мембранных фильтров общих и термотолерантных колиформных бактерий. Фильтрации 3 объема по 100 мл через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальной среде с лактозой и идентификации.

Коли – индекс рассчитывают по количеству красных колоний на фильтре. Например, на фильтре выросли 3 окрашенные колонии, а воды было 300 мл. Следовательно, в 100 мл – 1 клетка E. coli, а в 1000 мл – 10 клеток, т.е. коли-индекс равен 10. Исходя из этого значения коли-индекса, рассчитываем коли-титр: 1000/10 = 100. Если коли-индекс равен 5, то коли-титр равен 1000/5=200. Бактерии семейства Enterobacteriacea и термотолерантные бактерии должны отсутствовать в 300 мл питьевой воды.

Микробиологические нормативы качества питьевой воды

Показатели	Единицы измерения	Нормативы
Термотолерантные коли- формные бактерии	Число бактерий в 100 мл	Отсутствие
Общие колиформные бак- терии	Число бактерий в 100 мл	Отсутствие
Общее микробное число	Число образующих колонии бактерий в 1 мл (КОЕ/мл)	Не более 50
Коли-фаги	Число бляшкообразуюших единиц (БОЕ) в 100 мл	Отсутствие
Споры сульфитредуциру- ющих клостридий	Число спор в 20 мл	Отсутствие
Цисты лямблий	Число цист в 50 л	Отсутствие