учебники микра / Lektsii_Shvidenko

61

б) ингибиторы вирусных ферментов. К ним относятся синтетические пептиды, которые, внедряясь в активный центр фермента, подавляют его активность. К этой группе препаратов относится ингибитор вирусной нейраминидазы вирусов грипп –

ОСЕЛТАМИВИР.

Для диагностики вирусных инфекций в настоящее время используют следующие методы (рассмотрим на практике).

К сожалению вирусы не способны размножаться как бактерии на искусственной питательной среде. Даже если эта среда содержит весь необходимый для жизни набор питательных веществ . В этом, радикальное отличие вирусов от бактерий. Как же их выделить ?

1.В организме восприимчивого животного. Вирусу нужна полноценная живая клетка и лишь только в ней вирус может размножаться, используя уже готовый обмен веществ клетки. Экспериментальные животные позволили в свое время выделить и изучить вирусы бешенства, оспы, герпеса, полиомиелита и многих возбудителей энцефалитов. Однако, возможности этого метода оказались ограниченными. Не все вирусы оказались способными культивироваться в организме животных, так организм животного обладает собственной иммунной системой, которая тормозит развитие вируса. Поэтому, параллельно с этой системой, велись поиски других моделей для культивирования.

2.Культивирование в курином эмбрионе. В 1931г. американские ученые М.

развивался зародыш , туда вводили материал, содержащий вирусы. В курином эмбрионе многие вирусы прекрасно размножаются и могут накапливаться в

окружающей зародыш хорион-аллантоисной жидкости в больших количествах.

Яичная скорлупа делала внутреннее содержимое яйца вполне герметичным и препятствовала проникновению извне чужеродных вирусов и бактерий. В курином эмбрионе вирусы могли спокойно размножаться. Не все вирусы развиваются в

куриных эмбрионах. В курином эмбрионе были выделены и изучены все известные вирусы гриппа.

3.В культуре ткани. Наиболее быстрое развитие вирусологии началось в 1948г. когда Эндрюс, известный американский вирусолог-исследователь, а в последствии лауреат Нобелевской премии, разработал метод так называемых

однослойных тканевых культур.

Культуры тканей могут быть переживающими ( в которых лишь временно

удаляется сохранить жизнеспособность клетки) и перевивающимися ( в

62

которых клетки не только сохраняют свою жизнеспособность, но и активно делятся, пролифирируют).

С помощью метода тканевых культур за последние годы удалось подробно изучить, как живут и размножаются многие известные вирусы.

Типы пермиссивных клеток. Вирусы размножаются (репродуцируются) только в живых клетках. По чувствительности к вирусу клетки делят на

пермиссивные (поддерживающие инфекцию) и непермиссивные (не поддерживающие инфекцию). Существует еще и промежуточная категория – полупермиссивные клетки. Такие клетки способны заражаться вирусом и поддерживать персистентную инфекцию, не производя зрелых вирионов.

Классификация вирусов

Современная классификация вирусов является универсальной и включает вирусы, поражающие человека и животных. Классификация и таксономия вирусов постоянно совершенствуется по мере получения новых данных. Направляющим и координирующим центром, ведущим работу в этой области, является Интернациональный комитет по таксономии вирусов. Различают следующие категории: порядок, семейство, подсемейство, род, вид. Виды вирусов имеют дальнейшее подразделение на подтипы, сероварианты, штаммы.

В зависимости от типа НК вирусы подразделяются на ДНК-геномные и РНК-

геномные .

Медленные инфекции

Различают две группы медленных инфекций, отличающихся по этиологии. 1.группа – возбудители обычные (канонические) вирусы (вирус кори, краснухи, цитомегаловирус и т.д.).

2 группа – возбудители инфекционные белки, называемые прионами.

1.Медленные вирусные инфекции, вызываемые обычными вирусами могут развиваться после перенесенных вирусных инфекций, таких как корь, краснуха, клещевой энцефалит, цитомегаловирусная инфекция, ВИЧ-инфекция. Развитию этой группы инфекций способствует длительное персистирование вирусов в организме, особенно в клетках нейроглии. Например, через несколько лет после перенесенной кори у детей и подростков может развиваться подострый

склерозирующий панэнцефалит. 2.Прионные медленные инфекции -

64

накопившихся в пищевом продукте, поскольку особенностью возбудителей является способность продуцировать экзотоксины и эндотоксины (в результате разрушения микробных клеток) не только в организме человека, но и в пищевых продуктах. Клинически они характеризуются симптомами гастроэнтерита с достаточно длительным (8-12 часов) инкубационным периодом (необходим для вторичного развития бактерий в желудочно-кишечном тракте) и нарушением водносолевого обмена (выраженный диарейный синдром).

Среди возбудителей пищевых токсикоинфекций помимо наиболее известных патогенных бактерий – сальмонелл (Salmonella), довольночасто встречаются условно-патогенные микроорганизмы – другие энтеробактерии (рода Escherichia, Proteus, Citrobacter,Enterobacter, Klebsiella),а также представители родов Bacillus, Clostridium, Aeromonas. Необходимо иметь в виду, что при выделении в качестве этиологического фактора ПТИ условно-патогенных возбудителей проведение количественного анализа является обязательным.

Пищевые токсикозы вызываются экзотоксином микроорганизмов, который образовался и накопился при размножении возбудителя в пищевых продуктах, при этом самих бактерий в них может уже и не быть. Клинически они характеризуются более коротким (3-4-часа) инкубационным периодом и более выраженным болевым синдромом (боли имеют спастический характер), диарейный синдром менее выражен. Возбудителями пищевых токсикозов являются штаммы S.aureus, продуцирующие экзотоксин – энтеротоксин, и C.botulinum, хотя вызываемое им заболевание описывается как самостоятельная нозологическая форма

– ботулизм, относящийся к сапронозным (зоонозным) инфекциям.

4. Экзогенные и эндогенные кишечные инфекции.

Необходимо запомнить 1111

С клиникой ОКИ протекает дисбактериоз кишечника. Надо иметь в виду. Что при подозрении на это явление необходимо проводить дифференциальную диагностику. Если подтверждается дисбактериоз, то нельзя лечить антибиотиками. Они усугубляют его течение. А ОКИ надо !!!!

- фекально-оральным или контагиозным путем распространения. -первичной локализацией возбудителя в кишечнике.

-все кишечные инфекции имеют сходные клинические формы (гастроэнтероколит), но специфика их проявления напрямую связана со свойствами возбудителя.

65

Семейство Enterobacteriaceae

В составе семейства насчитывают более 30 родов и более 100 видов. Основные свойства этого семейства.

1.единство морфологии – это короткие, не образующие спор палочки с закругленными концами, подвижные или неподвижные не образующие или образующие капсулы, Гр(-).

2.Ферментирующие глюкозу с образованием КГ или только кислоты.

3.Как правило, у них отсутствуют или слабо выражены протеолитические свойства.

4.Факультативные анаэробы или аэробы.

5.Оксидазоотрицательные.

6.Каталазоположительные.

7.Хорошо растут на обычных питательных средах, образуя однотипные колонии. Но, запомните, для выделения кишечных бактерий из патологического материала или внешней среды простые питательные среды не используются, используются ДДС.

8.Место обитания кишечный тракт .

9.путь передачи – фекально-оральный. Иногда воздушно -капельный. 10.Восстанавливают нитраты в нитриты.

11.Хемоорганотрофы.

12.Утилизируют углеводы по ферментативному типу 9определяется по ОФ тесту –окисление- ферментация.)

13.Все они генетически связаны друг с другом. О чем свидетельствует молярный индекс % ГЦ (гуанин-цитазиновый индекс – 39 – 51% ).

14.Все они легко обмениваются генетической информацией (трансдукция, трансформация, коньюгация, слияние протопластов).

15.Все виды имеют соматический О-АГ .

-некоторые имеют жгутиковый антиген(большинство)

-для большинства характерен капсульный АГ( локализован в капсуле снаружи от клеточной стенки).

-есть фимбрии – то есть естьF антиген;

-имеетсяобщийантиген EAC enteric antigens common/

Эти антигены используют для идентификации видов. Идентификацию серологических типов проводят специфической антисывороткой для трех антигенов О, К, Н –EcoliO111 , К 55, Н3.

Мы уже говорили о том, что среди представителей этого семейства есть

-сапрофиты,

-условнопатогенные ,(которые входят в состав нормальной микрофлоры толстого кишечника.

66

- патогенные.

ЗАПОМНИТЕ!

-при снижении защитных свойств организма и под влиянием других факторов, они способны вызывать инфекционные болезни.

Среди патогенных бактерий этого семейства выделяют три рода – при попадании возбудителей в организм извне они вызывают инфекционный процесс-шигеллы, сальмонеллы, патогенные серогруппы эшерихий.

Классификация внутри этого семейства основана в первую очередь на биохимических свойствахэто 30 тестов, на основании которых внутри семейства проводят дифференциацию на роды и виды и роды: шигелла.Сальмонеллы, клебсиеллы, протей, иерсиния, эшерихия, энтеробактер, эрвиния, гафния, серация, эдвардсиела.

Широко распространена внутривидовая дифференциация – это необходимо для эпидемиологов – можно установить источник распространения и путь распространения.-

-ферментовары(биохим. призн.), серогруппы и серовары (по АГ); фаговары – по чувствительности к типичным фагам; колициновары, колициногены.

Патогенность кишечных бактерий Считают, что она является результатоминтегративного воздействия на микро и макро организм.

ВСПОМНИМ

1.адгезия – этот этап взаимодействия является обязательным для возникновения любого инфекционного процесса. Он протекает одинаково у всех кишечных бактерий.

Складывается из неспецифической адгезиибактерии прикрепляются к защитному слою слизи и проходят сквозь него и специфической адгезии – которая обуславливается взаимодействием лиганда бактерий с соответствующими R рецепторами эпителиальных клеток кишечника. Наиболее часто в качестве лигандов – ворсинки или фимбрии.

Так как эпителиальные клетки на протяжении кишечника различаются друг от друга, то различные виды бактерий и адсорбируются на определенных клетках – тропность.

2.колонизация – заселение, эта стадия развита у разных бактерий по – разному.

3.инвазия – проникновение.

4.продукция экзо и энтеротоксинов.

ИТОГ - последние три этапа выражены по разному у разных кишечных бактерий, что и проявляется в патогенезе и клинике.

РОД ЭШЕРИХИЯ

Основной представитель рода ЭШЕРИХИЯ - кишечная палочка – был впервые обнаружен в 1885г. Т .Эшерихом в честь которого этот род бактерий и получил свое название.

Заболевания вызванные Э. Коли делятся на 2 группы^ -эндогенные колиинфекции -экзогенные колиинфекции ( эшерихиозы).

67

1 гр. – входят в состав нормальной микрофлоры толстого кишечника, при снижении иммунологической реактивности происходит транслокация Э. Коли из кишечника в лимфокровеносноерусло -ГВЗ эндогенной этиологии – парентеральные эшерихиозы.

2гр.- патогенные или диареегенные кишечные палочки, вызывают экзогенную коли – инфекциюэнтеральныеэшерихиозы- т.е. острые кишечные инфекции.

Факторы патогенности диареегенных Э. коли:

1.Факторы адгезии и колонизации. Они необходимы для прикрепления к

клеткам ткани и их локализации. Эти факторы обеспечивают колонизацию зоны первичного инфицирования. Эпителиальные клетки на протяжении ЖКТ отличаются, а разные энтеробактерии обладают тропизмом к различным эпителиальным клеткам. Например, -шигеллы прикрепляются к рецепторам мембран колоноцитов, - сальмонеллы

-к рецепторам энтероцитов.

Упатогенных Э.коли обнаружены 3 типа факторов адгезии, которые кодируются плазмидными генами-

-colonizaitionfactor– они имеют фимбриальную структуру;

-белки наружней мембраны;

-adgesion Henle -фимбриальные структуры.

2. Факторы инвазии. С их помощью энтероинвазивныеэшерихии проникают в эпителиальные клетки кишечника, размножаются в них и вызывают их разрушение.

3.Токсины и токсические продукты

1.Энтеротоксины. Различают две группы энтеротоксинов: LT – токсин, стимулирующий аденилатциклазу;

STтоксин, стимулирующий гуанилатциклазу.

Молекула LT состоит из 2 фрагментов А и В. Фрагмент В состоит из 5 субъединиц, он выполняет функции- -соединяется с рецептором клетки;

-формирует внутримембранный канал.

Фрагменты А состоит из 2 пептидных цепей

–А1 активирует аденилатциклазу, которая гидролизует АТФ, что приводит к накоплению циклического АМФ, который вызывает цитотонический эффект, ведущий к нарушению водно-солевого обмена.

А2 – выполняет связующую роль между В и А фрагментами.

2. Токсины, нарушающие цитоскелет клетки:

-цитолетальный дилятирующий токсин – (CLDT) – вызывает увеличение клетки,

фрагментацию ядра и гибель клетки в течение 96 – 120ч;

- цитотоксиннекротизирующий фактор –(CNF) – провоцирует репликацию ДНК без деления, что приводит к образованию нежизнеспособных гигантских многоядерных клеток;

3.Токсины, Шига и шигоподобные токсины вызывают гибель клетки

4.Влияющие на гладкую мускулатру, посредством освобождения нейромедиаторов –

трансмиттеров.

5.Эндотоксин-липополисахарид – определяют антигенную специфичность бактерий.

68

4.Эндотоксины – липополисахариды. Они определяют антигенную специфичность бактерий и являются причиной эндотоксикоза.

У Э.коли обнаружены плазмиды различных категорий –colR и др.

В зависимости от наличия тех или иных факторов патогенности диареевидные Э. коли разделены на группы -энтеротоксигенные -энтероинвазивные -энтеропатогенные -энтерогеморрагические -энтероаггрегативные -диффузно прикрепляющиеся.

ЭНТЕРОПАТОГЕННЫЕ – вызывают колиэнтериты у детей до года –0 26, 055,0111. Поражают тонкий кишечник. Для заболевания характерны водянистая диарея, контактно

– бытовой, реже пищевой путь передачи.

ЭНТЕРОИНВАЗИВНЫЕ – 0124, 0144 – обладают тропизмом к эпителиальным клеткам наружной части подвздошной и толстой кишки и вызывают заболевания протекающие по дизентериеподобному типу Патогенность связана со способностью внедряться в эпителиальные клетки слизистой оболочки кишечника и размножаться внутри них, вызывая их разрушение. Эти свойства кодируются хромосомными и плазмидными генами. Плазмида кодирует синтез белков наружней мембраны, которые и определяют инвазию Они сходны с белками дизентерии.

ЭНТЕРОТОКСИГЕННЫЕ.

01, 015, 0148 - поражают тонкий кишечник и вызывают заболевания, по клинической картине сходное с легкой формой холеры (холероподобные гастроэнтериты). Факторы патогенности - пили или фимбриальные факторы, облегчающие адгезию к эпителию и способствующие колонизации, а также определяющие способность к токсинообразованию. (термолабильные и термостабильные токсины). Эффект действия термолабильного токсина аналогичен действию токсина холерного вибриона. В слаборазвитых странах – это возбудители гастроэнтеритов у детей.

ЭНТЕРОГЕМОРРАГИЧЕСКИЕ – 0157. Патогенность связана с наличием фактора адгезии фимбриального типа. Фактор кодируется плазмидой. Их тогсигенность обусловлена способностью синтезировать шигоподобные токсины, разрушающие клетки эндотелия делких кровеносных сосудов. Образование сгустков крови и образование фибрина вызывает нарушения кровотока, что приводит к ишемии и некрозу в клеточной стенке. Наблюдается уремечиский гемолитический синдром, часто с летальным исходом. Болеют взрослые и дети. Симптомы гемоколита .

ЭНТЕРОАГГРЕГАТИВНЫ, ДИФФУЗНОПРЕКРЕПЛЯЮЩИЕСЯ.

69

Эндогенные колиинфекциипарантеральные колиэнтериты.

Вызываются условно-патогенными Э. Коли, которые составляют до 80% аэробной

микрофлоры толстого кишечника.

При снижении иммунологической реактивности Э. Коли покидают место своего обычного обитания и гематогенно или лимфогенно распространяются по организму вызывая гнойново-спалительные процессы, токсикосептические процессы самой различной локализации.

Инфекции мочевыводящих путей – полиморфная группа поражений (бессимптомная бактериурия, циститы, острый пиелонефрит). Вызывают уропатогенныеэшерихии, обычные обитатели микрофлоры кишечника. Бактерии проникают в уретрумочевой пузырьприкрепляются к поверхности переходного эпителия – активно размножаются. Основные возбудители – бактерии серогруппы

01, 02, 04, 06, 07, 018, 075.

Бактериемия

Внастоящее время Э.коли составляют одну из основных причин бактериемий

удетей и взрослых. Основные возбудители бактериемий бактерии серогруппы 06, 04, 02, 016, 018, 07, 01. Часто поражения обусловлены недостаточным функционированием защитных факторов и снижением лактоферрина и трансферрина в сыворотке. Риск развития поражений возрастает при сопутствующей патологии.

Менингит (MENEC)

Э. Коли частый возбудитель менингитов у новорожденных. В большинстве случает менингит развиваются у новорожденных. Серогруппы 07, 018, 01, 06. Имеют капсульный антиген схожий с АГ Neisseriameningitidis.

Респираторные инфекции – наиболее частые поражения регистрируются часто у новорожденных. Эпидемиология поражений зависит биологических свойств возбудителя – изоляты, содержащие К АГ – вызывают пневмонии, и т.д.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Материалом для исследования при -энтеральныхэшерихиозах являются фекалии,

-при парентеральных – гнойное отделяемое, при септических формах – кровь( в зависимости от локализации возбудителя.

Основным методом лабораторной диагностики эшерихиозов является бактериологическое исследование. Возможно использование методов иммуноиндикации и генной диагностики.

Специфическая профилактика не разработана.

Терапия этиотропная – антибиотики, колипротейный фаг.

Микробиология дизентерии

Возбудителями дизентерии является большая группа бактерий, объединенных в род Shigella. В настоящее время в составе этого рода насчитывается более 40 серотипов. Все они короткие, неподвижные гр(-) палочки, неспособны образовывать

70

спор и капсул, хорошо растут на обычных питательных средах (ферментация лактозы и маннита. Разные виды имеют разные б/х и антигенные св-ва.

По О-антигенам все виды шигелл, Sh. Sonne, которая однородна в антигенном отношении разделены на серовары:

S. dysenteriae – 12 сероваров S. flexneri – 6 сероваров

S. hoydii – 18 сероваров.

Антигенный комплекс шигелл включает 2 термостабильных АГ(типовые и групповые) и термолабильные. Термолабильный антиген включает К – антиген.

Определение антигенной структуры проводят для окончательной идентификации бактерий.

Факторы патогенности – одно из важнейших биологических свойств, обуславливающих их патогенность – способность внедриться в эпителиальные клетки, размножаться в них и вызывать их гибель.

Основные факторы патогенности шигелл можно разбить на 3 группы:

1.факторы, определяющие взаимодействие с эпителием слизистой оболочки;9факторы адгезии и колонизации).

2.факторы, обеспечивающие устойчивость к гуморальным и клеточным механизмам защиты макроорганизма и способность шигелл размножаться в его клетках;

3.способность продуцировать токсины и токсичные продукты, которые обуславливают собственно патологический процесс.

Дизентерия – это инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией организма, поносом и своеобразным поражением слизистой оболочки толстого кишечника. Это одно из наиболее часто встречающихся остро кишечных заболеваний в мире. Заболевание известно еще с глубокой древности, впервые этот термин ввел Гиппократ. В начале XIX в. была установлена протозойная природа некоторых дизентерий, которые в народе называли «кровавым поносом».

Начало изучения шигеллеров положили Шантемасс и Видаль (1888), позднее А.В. Григорьев выделил возбудитель в чистом виде, а более глубоко его изучил Шиг (1888), Краузе (1900). Исследования Флекснера (1900), Зонне (1915), Штуцера и Шмитца (1917), Сакса (1943), Бойда (1932-1942) и других авторов позволили выявить некоторые виды шигелл. Все они были названы по фамилиям авторов.

Особенности эпидемиологии Источником инфицирования является только человек – это антропонозая

инфекция. Способ заражения - фекально-оральный. Путь передачи: водный – преобладает у шигелл Флекснера; пищевой – через продукты,преобладает у шигелл Зонне; контактно-бытовой – особенно для S. dysenteriae ( До 30-х годов на долю S. dysenteriae 1 приходилось до 30%-40% всех заболеваний дизентерией, а затем этот