Лабораторная работа №19
«ПРИГОТОВЛЕНИЕ НАТИВНОГО И ОКРАШЕННОГО ПРЕПАРАТА ИЗ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ГРИБОВ».
Цель работы
- Изучение методов нахождения грибов из патологического материала методом микроскопирования.
. Задачи педагога:
- Ознакомить студентов с видами грибов, которые способны вызывать инфекционные заболевания, и объяснить проявления грибковых патологий у человека;
- Ознакомить студентов с техникой взятия патологического материала и методами диагностики этих инфекций, механизмами, анализом результатов и применением их на практике.
Результаты занятий
Студент должен знать:
- о микроскопических грибах, которые вызывают инфекционные заболевания у людей и виды грибковых патологий у человека;
- микробиологические методы диагностики, которые легко применить на практике, их механизм, анализ результатов и использование в своей деятельности;
Студент должен уметь:
- взять патологический материал у пациентов с грибковыми инфекциями
- приготовить мазки – нативный и окрашенный, проводить микроскопию;
- анализировать полученные результаты;
- применить на практике полученные результаты.
Лабораторная работа №1
1. Исследование нативногоматериалаиззараженного грибами участка – кожа, ногтевые пластины и волосы под микроскопом.
Цель лабораторной работы: научиться технике приготовления нативного мазка и окрашенного метиленовым синим или гемотоксин-эозином для изучения грибов
Необходимое оборудование и реактивы:Микроскоп,спиртовка, предметные стекла, подносы, петли, вата, бинты, стерильный скальпель буфер, 70Со спирт, метиленовый синий .
Последовательность выполнения:
№ |
Выполняемые действия
|
Не выполнил (балл) |
Выполнил (балл) |
1 |
Протирается с 70Со спиртом пораженная часть кожи. |
0 |
20 |
2 |
Под углом 35 - 40 градусов, с помощью скалбпеля беротся материал |
0 |
20 |
3 |
Полученный материал растворяется в 30%ном растворе едкого калия и нагревается до кипения |
0 |
20 |
4 |
Препарат прикрывается покровным стеклом (можно сверху капнуть метиленового синего) и просматривается под микроскопом в начале под малым увеличением, затем по большим без иммерсионного масла |
|
20 |
5 |
Длина мицелий 8-12 мкм, видны круглые клетки. Зарисовать в тетрадь |
0 |
20 |
Всего |
0 |
100 |
|
. Epidermophyton floccusum
Лабораторная работа №2 Приготовление окрашенного препарата по Грамуиз материала от больного с подозрением на кандидамикоз.
Цель лабораторной работы:научиться определять грибы в патологическом материале по Граму.
Необходимое оборудование: световой микроскоп, культура Candida на среде Сабуро, набор красок Грама, иммерсионное масло, предметное стекло, фильтровальная бумага, петля, спиртовка, пипетки, вода, физиологический раствор.
Последовательность исполнения:
№ |
Выполняемые действия
|
Не выполнил (балл) |
Выполнил (балл) |
1 |
Подготовка спиртовки, лоточка для окраски, петли к работе |
0 |
10 |
2 |
Протирается ватой и обезжиривается предметное стекло над пламенем спиртовки |
0 |
10 |
3 |
С помошю петли берется 1-2 мл физ.раствора и капается на предметное стекло |
0 |
10 |
4 |
С помощью петли берется материал из культуры Кандиды и смешивается в физ растворе |
|
10 |
5 |
Высушивается и фиксируется над спиртовкой |
|
10 |
6 |
На препаранакладывается бумага с генциан фиолетом и над ним капается 3-4 капли физ. раствора, красится в течение 1-2 минут |
|
10 |
7 |
Убирается бумага, не смывая наливается раствор Люголя. 1-2 капли в течении 1 минут. |
|
10 |
8 |
Препарат удерживается в течении 30-40 секунд под этиловым спиртом |
0 |
10 |
9 |
Промывается водой, краситься фуксином 2-3 минут |
|
10 |
10 |
Препарат промывается водой, высушивается и смотрится под иммерсионной системой микроскопа |
|
10 |
Всего |
0 |
100 |
|
Окрашенные методом Грамма(а), и читые културы Кандид(б) окрашено методом Романовский