Добавил:
Студент ТМА 2-курс ЛечФак Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
лаб.работы 2019. Microsoft Word (3).docx
Скачиваний:
6
Добавлен:
13.04.2024
Размер:
5.98 Mб
Скачать

Тема лабораторной работы №11 «определение концентрации фермента лизоцима в слюне и фагоцитарной активности нейтрофилов в крови».

Цель занятия.

Знать методы опрелеления факторов неспецифической защиты организма и обучить их оценивать

Педагогические задачи

- объяснить значение факторов неспецифической защиты организма, обучить методам выявления факторов неспецифической защиты организма;

- взаимосвязь факторов неспецифической защиты организма с гуморальным и клеточным иммунитетом, фагоцитоз, лизоцим, значение системы комплемента и объяснить последовательность процесса и дать возможность поиска правильного применения полученных результатов.

Результаты учебного занятия

-студенти должен знать:

- факторы неспецифической защиты организма, гуморальные, клеточные, барьерные свойства слизистых оболочек, иметь сведения о факторах функциональной защиты организма;

- методы оценки факторов неспецифической, гуморальной, клеточной защиты организма, значение и механизмы;

Студент должен выполнить:

- современные методы определения количественных показателей факторов неспецифической гуморальной и клеточной защиты организма (лизоцим, фагоцитарная активность лейкоцитов);

Лабораторная работа: определение концентрации фермента лизоцима в слюне методом бумажных дисков.

Цель: усвоение методаопределения концентрации фермента лизоцима в составе слюны.

Необходимые предметы : в пробирке однодневная культура micrococcus lisоdenticus , стерильные фильтровальные бумажки (диски), МПА в чашках Петри , стерильный пинцет, стерильный физиологический раствор, дезинфицирующий раствор в эксикаторе

Ход выполняемой работы (шаги)

Выполняемые работы

Не выпол-нил (а) (балл)

Выполнил(а) (балл)

1

Готовится из фильтровальной бумаги диск и стерилизуется

0

10

2

Определяется чистота культурыМicrococcus lisоdenticus методом Грама

0

10

3

Готовится 1 млярд суспензия из культуры Мicrococcus lisоdenticus – в 2-3 мл стерильного физ.р-ра добавляют культуру Мicrococcus lisоdenticus и перемешивают между ладонями

0

10

4

Берут 1 мл приготовленной суспензии М.lizodeinticus и сравнивают со стандартом мутности

0

10

5

Лишнее выливают в дез.раствор

0

10

6

Делается посев суспензии на МПА в чашке Петри и оставляем в закрытом виде на 10 мин при комнатной температуре.

0

10

7

С помощью стерильного пинцета студенты кладут стерильные диски под язык, чтобы намочить слюной

0

10

8

Накладываются диски с помощью пинцета на посев в чашке Петри (в 1 чашку можно наложить 10 дисков)

0

10

9

После инкубирования в термостате 24 часа, измеряем зоны задержи роста культуры микроба и зафиксируем в тетради.

0

10

10

Показатель активности фермента лизоцима переводится в % от мг и результат записывается в тетрадь

0

10

всего

0

100

Лабораторная работа: Определение фагоцитарной активности лейкоцитов в крови.

Цель: получение информации офункциональной активности лейкоцитов

Необходимое оборудование: Микроскоп, термостат, суточная культура Micrococcus lisоdenticus в пробирке, стандарт мутности бактерий , 70º спирт, набор для краски по Граму. В чашке Петри стерильные диски фильтровальной бумаги, спиртовка, в чашке Петри МПА, стерильный пинцет, стерильный физиологический раствор, эксикатор.

Выполняемая работа (шаги)

Выполняемые работы

Не выпол-нил (а) (балл)

Выполнил(а) (балл)

1

В стерильную пробирку микропипеткой наливаем 0,05 мл 2% цитрата натрия и 0,1 мл сыворотки крови

0

10

2

В пробирку добавляем 0,05 мл 2-миллиардной убитой суспензии стафилококка

0

10

3

Отправляем пробирку в термостат на 30 минут при температуре 370С, затем вынимаем из термостата и хорошенько взбалтываем

0

10

4

Из суспензии готовим мазок, фиксируем и подсушиваем в растворе Никофорова

0

10

5

Мазок окрашиваем метиленовым синим (1% раствор, разведенный 1:4), держим 1 минуту смываем водой

0

10

6

Мазок высушиваем, капаем иммерсионное масло, микроскопируем в объектив 90-100, определяем 25 нейтрофиллов

0

10

7

Изучается активность найденных 25 нейтрофиллов определением числа нейтрофилов, фагоцитирующих стафилококки

0

15

8

Фагоцитарное число – показатель клеток нейтрофилов, фагоцитировавших стафилоккоков

0

15

9

Изучаются полученные результаты и записиваем в тетрадь

0

10

всего

0

100