179. Лабораторная диагностика коклюша

Микробиологическая диагностика.Исследуемый материал – мокрота, слизистое отделяемое носоглотки, задней стенки глотки, кровь.

1. 1.Бактериоскопический метод – РИФ, люминесцентная микроскопия, окраска по Граму.

2. 2.Бактериологический метод – выделение и идентификация возбудителя.

3. 3.Серодиагностика – РСК, РА, РПГА.

4. 4.Экспресс-диагностика – РИФ.

5. 5.Биохимическое и молекулярно-биологическое

180. Специфическая профилактика коклюша

Специфическая профилактика. Плановая вакцинация в соответствии с национальным календарем прививок проводится вакцинами АКДС, АКДС-М. Сроки вакцинации: 3 месяца; в 4,5 месяцев; в 6 месяцев; ревакцинация осуществляется в 1,5 года. Иммуноглобулин человеческий нормальный вводится в дозе 3 мл для экстренной профилактики детям, не болевшим коклюшем, после контакта с больными. Применяется 2-х кратно с интервалом 24 ч.. Существует еще ряд вакцин, применяющихся для профилактики – «Тетракок», «Бубо-Кок», «Тританрикс НВ», «Пентавак», «Гексавак», «Триацелювакс», «АКДС».

181. Бактериологический метод диагностики коклюша.

Бактериологический метод – выделение чистой культуры возбудителя и ее идентификация. Необходимо не только выделить из исследуемого материала дифтерийную палочку, но и определить ее токсигенность.

Определение токсигенности С. diphtheria:

• а) биологическая проба на животных – внутрикожное заражение морских свинок фильтратом культуры дифтерийных бактерий – вызывает некроз в месте введения. Минимальная смертельная доза (20-30 нг) убивает морскую свинку на 4-5 день;

• б) заражение куриных эмбрионов (наблюдается гибель под действием токсина);

• в) внесение в культуру клеток (выявление ЦПД);

• г) метод твердофазного ИФА с меченными пероксидазой антителами;

• д) использование ДНК-зонда для обнаружения tox-оперона в геноме;

• е) тест Илека и Оухтерлони (1948 г.) – основу составляет способность токсина и антитоксина диффундировать в агар и образовывать преципитаты (усы, стрелы) по ходу диффузии – метод двойной преципитации в геле, предварительный ответ может быть выдан через 48 часов, через 72 часа – заключение о наличии токсигенных коринебактерий, через 96 часов – окончательный ответ.

182. Микробиологическая характеристика возбудителей туберкулеза и лепры.

Для микроорганизма характерен полиморфизм и склонность к ветвлению.

1. палочковидная форма – 1-100 * 0,2-0,6 мкм;

2. нитевидная;

3. кокковидная;

4. зерна (не являются КУБ, окрашиваются по Граму);

5. фильтрующиеся формы;

6. L – формы.

Из зерен, фильтрующихся форм и L – форм могут восстанавливаться обычные формы. Жгутики отсутствуют, спор не образуют, имеют микрокапсулу (которая возможно состоит из кальцита). Кислото-спирто-щелочеустойчивы (46% составляют липиды в 3-х фракциях: фосфатидная, жировая и восковая); в составе липидов имеются кислотоустойчивые жирные кислоты: туберкулостеариновая, фтиоидная, миколовая и др. Структурный скелет клеточной стенки составляют два ковалентно связанных полимера – миколат арабиногалактазана и пептидогликан, к которому присоединены белки и полисахариды. Грамположительны, окрашиваются по методу Циля-Нильсена в красный цвет. Зернистые формы (Зерна Муха) и «осколки Шпленгера» окрашиваются в фиолетовый цвет. При окраске аурамином приобретают желтый цвет.

Микробиологическая диагностика. Исследуемый материал – мокрота, гной, моча, спиномозговая жидкость, промывные воды желудка, плевральная жидкость, кусочки органов.

1. Бактериоскопический метод – окраска по Цилю-Нильсену, Граму, люминесцентными красителями по Бою, фазово-контрастная микроскопия

2. Бактериологический метод – выделение, идентификация возбудителя, обнаруженик корд-фактора.

3. Обнаружение L-форм: