123. Микробиологическая диагностика эшерихиозов

Диагностика. Материал для исследования – кровь, моча, СМЖ, гнойное отделяемое и др. Проводят микроскопию мазков, окрашенных по Грамму, и выполняют посев на селективно-дифференцирующие среды. Биохимическую активность определяют на средах Гиса. Из изолированных колоний готовят и микроскопируют мазки, ставят оксидазный тест и пробную РА с поливалентных ОК-сыворотками. Последовательно используя весь набор ОК-антисывороток, определяют принадлежность живой культуры к ОК-группе. Затем определяют принадлежность к О-группе в РА с прогретой при 100С культурой и адсорбированными О-антисыворотками.

Биохимическая дифференциация имеет дополнительное значение. Идентификация диареегенных типов возможна при выявлении специфических маркеров (энтерогеморрагические кишечные палочки не ферментируют сорбит, а серовар О157: Н7 не проявляет бета - глюкуронидазной активности).

124. Бактериологическая диагностика эшерихиозов.

Диагностика. Материал для исследования – кровь, моча, СМЖ, гнойное отделяемое и др. Проводят микроскопию мазков, окрашенных по Грамму, и выполняют посев на селективно-дифференцирующие среды. Биохимическую активность определяют на средах Гиса. Из изолированных колоний готовят и микроскопируют мазки, ставят оксидазный тест и пробную РА с поливалентных ОК-сыворотками. Последовательно используя весь набор ОК-антисывороток, определяют принадлежность живой культуры к ОК-группе. Затем определяют принадлежность к О-группе в РА с прогретой при 100С культурой и адсорбированными О-антисыворотками.

Биохимическая дифференциация имеет дополнительное значение. Идентификация диареегенных типов возможна при выявлении специфических маркеров (энтерогеморрагические кишечные палочки не ферментируют сорбит, а серовар О157: Н7 не проявляет бета - глюкуронидазной активности).

125. Возбудитель брюшного тифа

Брюшной тиф как самостоятельную нозологическую единицу впервые попытался выделить русский врач А. Г. Пятницкий еще в 1804 г. Род получил название в честь Д. Сальмона, который в 1885 г описал микроб, выделенный из свиньи и известный в настоящее время под названием S. Choleraesuis. (S. Typhi, S. Paratyphi В, S. Paratyphi A) Род включает лишь один вид - Salmonella enterica (S. enteritidis) и семь подвидов – патогенен для теплокровных лишь - S. Cholerae-suis. Для удобства будет использоваться не совсем корректная таксономия, раасматривающая серовары как виды (например – S. Typhi вместо Salmonella enterica, подвид Cholerae-suis серовар Typhi)

Брюшной тиф представляет собой острую антропонозную системную инфекцию, характеризующуюся циклическим течением, поражением лимфатического аппарата тонкого кишечника, бактериемией, лихорадкой, сыпью и интоксикацией организма.

Возбудителем брюшного тифа является S. Typhi, впервые обнаруженный К. Эбертом в 1880 г. в срезах селезенки, лимфатических узлов и пейеровых бляшек людей, умерших от брюшного тифа

126. Биологическая характеристики возбудителя брюшного тифа

Морфологические и Культуральные свойства. Подвижные грамотрицательные палочки, размером 0,7x1,5x2—5 мкм. Капсулу не образуют. Хорошо растут на простых питательных и желчесодержащих средах. На плотных средах могут образовывать колонии в R- и S-формах, на жидких — S-диффузное помутнение, R-осадок. Колонии в S-форме средних размеров, гладкие, блестящие, полупрозрачные, с голубоватым оттенком, R-сухие шероховатые. Серовар S. Schottmuelleri (S. Paratyphi В) при росте на плотных средах образует слизистые валики (феномен валообразования), колонии S. Typhi, имеющие Vi-Аг, мутные. На средах Эндо колонии всех трех сальмонелл бесцветны или розоватые, на агаре Плоскерева – бесцветные и выглядят более плотными и мутными, на висмут-сульфитном агаре – черно-коричневые с металлическим блеском, среда под колонией окрашивается в черный цвет (парататиф А – коричнево-зеленоватые). Жидкими средами обогащения при посеве крови является желчный бульон, при посеве содержащих дополнительную флору материалов (фекалий, желчи, мочи) — селенитовый бульон (пептон+NaHSeO3-ингибитор контаминирующей флоры и т. д.). На лакгозосодержащих дифференциальных средах образуют бесцветные колонии, на висмут-сульфитном агаре — колонии черного цвета

127. Антигенная структура и культивирование возбудителя брюшного тифа

Антигенная структура и классификация.

Сальмонеллы обладают:

• - соматическим О-антигеном,

• -жгутиковым Н-антигеном.

• - К-антигеном (Некоторые сальмонеллы) – разновидность – Vi-Аг

В связи с тем, что по основным биохимическим свойствам представители рода Salmonella однотипны, дифференциация внутри рода проводится по антигенной структуре.

Имеется несколько классификаций сальмонелл. Наиболее старой является классификация по Кауфману—Уайту. В основе этой классификации лежит подразделение сальмонелл на:

• -серогруппы по общности строения О-антигена

• -внутри серогруппы — на серовары, в соответствии с различиями в строении Н-антигена.

О-антиген состоит из R-ядра и боковой S-цепи. К S-цепи присоединяются сахара, которые называют рецепторами и обозначают цифрами. Критерием для объединения в серогруппу является общность конечного сахара, который по химической природе является 3,6 -д идезоксигексозой.

Н-антиген является двухфазным. Это связано с тем, что его синтез кодируется двумя независимыми генами, работа одного из которых исключает работу другого. Поэтому в каждой клетке может быть синтезирован только один белок (фаза). Первая фаза обозначается буквами, она считается специфической, вторая фаза — цифрами, ее принято считать неспецифической.

В таблице Кауфмана—Уайта внутри серогруппы серовары расположены в алфавитном порядке. В прежних классификациях каждый серовар соответствовал виду, которых насчитывалось более 2500.