Количественное определение бупивакаина электрофорезом на бумаге

Прохоренко Т.И. (5 курс, фарм. ф-т), Смирнова А.В. (ассистент)

Кафедра фармацевтической и токсикологической химии ЯГМА

Научный руководитель – к.ф.н., доц. Фомин А.Н.

Для определения микроколичеств токсических веществ биологических субстратов наиболее целесообразно использование методов, позволяющих сочетать очистку, обнаружение и количественное определение искомых соединений.

Таким требованиям химико-токсикологической практики отвечает электрофорез на бумаге, характеризующийся доступностью в приборном отношении, простой техникой работы.

С целью изучения возможности количественного определения бупивакаина непосредственно в зонах на электрофореграммах (ЭФГ) на линию старта хроматографической бумаги марки «С» (15 х 27 см) микрошприцом наносили 1,0; 3,0; 5,0; 7,0; 9,0;11,0 мкг бупивакаина-стандарта и аликвоту исследуемого раствора, содержащую 6 мкг препарата в пробе. Расстояние между точками нанесения 2 см. Электролит – буферный раствор Бриттона-Робинсона, рН=2,3. Электрофорез проводили в приборе ПВЭФ-1 при напряжении 400 В, в течение 1 часа. Ставили 5 параллельных опытов. Высушенные ЭФГ проявляли реактивом Драгендорфа модифицированного по Мунье. Используя формулу эллипса, рассчитывали площади детектируемых зон. При этом установлена прямо пропорциональная зависимость площади зон от количества бупивакаина (стандарта) в диапазоне от 1,0 до 11,0 мкг в пробах. Калибровочный график носит выраженный линейный характер.

Результаты количественного определения исследуемого раствора бупивакаина по калибровочному графику представлены в таблице.

№ п/п	Количество бупивакаина, нанесенного на линию старта, мкг	Определено бупивакаина		Метрологические характеристики
		мкг	%
1	6,0	6,1	101,67	= 100,33
2	6,0	5,9	98,33	S = 1,83
3	6,0	5,9	98,33	V = 1,82%
4	6,0	6,1	101,67	S`x = 0,82
5	6,0	6,1	101,67	`±D= 100,33± 2,28; E =2,27%

Проведенные исследования позволили установить оптимальные условия количественного определения бупивакаина методом электрофореза на бумаге. Метод характеризуется экспрессностью, селективностью и может быть использован в химико-токсикологической практике.

Изучение условий экстрагирования цефобида из водных растворов

Смирнов М.Ю. (5 курс, фарм. ф-т)

Кафедра фармацевтической и токсикологической химии ЯГМА

Научный руководитель – к.ф.н., доц. Фомин А.Н.

Цефобид находит широкое применение в современной химиотерапевтической практике в хирургии и пульмонологии. Эффективность лечения антибиотиками группы цефалоспоринов во многом зависит от своевременной индивидуальной корректировки и оптимизации курса лечения. В решении данной задачи важное значение имеют результаты аналитических лабораторных исследований препарата в биологических средах организма.

С целью разработки оптимальных условий выделения цефобида из биологических жидкостей, были изучены условия экстрагирования его из водных растворов. На степень экстракции вещества оказывают влияние рН среды и природа экстрагента. В нашем исследовании рН среды устанавливали с помощью буферного раствора Бриттона – Робинсона в пределах 1,8 – 6,0. В качестве экстрагентов использовались органические растворители и их смеси. Реэкстрагирование цефобида проводилась буферным раствором Бриттона – Робинсона рН 9,0 разбавленным в 10 раз водой. Реэкстрагент анализировался на приборе «Капель-105» по разработанной нами ранее методике. Ввод пробы – давлением 30 мБар в течение 15 секунд, напряжение 20 кВ, длина волны детектирования пробы 230 нм, в качестве фонового электролита был использован буферный раствор Бриттона – Робинсона рН 9,0. Результаты исследования приведены в таблице:

рН среды	Цефобид 1000 мкг/мл (n=2)
	Хлороформ		Этилацетат		Эфир		Хлороформ – бутанол (3:1)
	Извлечено цефобида
	мкг	%	мкг	%	мкг	%	мкг	%
1,8	5,56	0,56	362,78	36,28	0,75	0,07	375,23	37,52
2,0	3,50	0,35	371,96	37,20	0,82	0,08	482,34	48,23
3,0	1,08	0,01	141,59	14,16	1,10	0,01	337,55	33,75
4,0	0,10	0,001	37,43	3,74	+		146,64	14,66
5,0	+		4,97	0,50	+		26,89	2,69
6,0	+		4,95	0,05	+		9,54	0,10

На основании проведенных исследований установлено, что наибольшее количество цефобида извлекается из водного раствора при рН 2,0 системой растворителей хлороформ – бутанол (3:1).