39

2.2. Методы обследования

Обследование больных носило комплексный характер и включало: изучение анамнеза (семейный анамнез, с учетом его отягощенности, учет места жительства, поездки в области с другим климатом, сведения о выполнении календаря прививок и результатах реакции Манту, предшествующие субфебрилитету факторы: ОРВИ, травмы, оперативные вмешательства, укус клеща, контакт с животными), оценка жалоб ребенка и его родителей, клинический осмотр (наличие изменений со стороны кожных покровов и слизистых оболочек, состояние дыхательной, сердечно – сосудистой системы, органов желудочно – кишечного тракта, мочеполовой, эндокринной системы, неврологическая симптоматика), оценка вариантов температурной кривой, лабораторные исследования (общий анализ крови, мочи, биохимический анализ крови);

При наличии жалоб и изменений со стороны верхних и нижних дыхытельных путей проводились: R- графия органов грудной клеткипроведена у – 43 больных, R – графия придаточных пазух носа – у 7– детей.

Определялись маркеры хламидийной, микоплазменной, пневмоцистной инфекции. Кровь на антигены к респираторным вирусам ( адено -, РС-вирус, ГРИПП, парагрипп) - у – 82 детей. Исследование хлоридов пота -2 детям при подозрении на муковисцедоз.

При наличии изменений в зеве (тонзиллите, наложениях на миндалинах) выполнялось бактериологическое исследование на флору и чувствительность к антибиотикам у 47 детей.

Состояние сердечно - сосудистой системы оценивалось у – 89 детей. ЭКГ было выполнено – 69 детям, наряду с ЭХО - КГ39 пациентам, транскраниальное дуплексное сканирование сосудов головы и шеи выполнено у 12 детей, которые предъявляли жалобы на длительную головную боль, головокружения, обмороки, нарушение сна. Реоэнцефалограмма – у 8 пациентов.

Оценка особенностей состояния желудочнокишечного тракта проведена- 98 детям, с жалобами на боли в животе, диспептические явления. УЗИ органов брюшной полости выполнено – 98 пациентам, ФЭГДС17.Также прово-

40

дились бактериологические и иммунологические исследования: исследования кала на дисбиоз кишечника( 27),на энтеро- и аденовирус ( 14),при указании на пребывание в в сельской местности, лесных массивах, контакта с животными - кровь на определение специфических антител к боррелиям (7), бартонеллам ( 18),лямблиям ( 37), реакция Райта – Хеддельсона (бруцеллез) - ( 11), РПГА с иерсиниозным и псевдотуберкулезным (22), сальмонеллезным и дизентерийным диагностикумами (31), при сопутствующей эозинофилиии – определение специфических антител к антигенам токсокар и описторхиса (4).

Исследование мочевыводящей системы выполнено – 17 детям, с субфебрилитетом без видимого очага инфекции или, при рецидивирующих заболеванииях мочевых путей. Бакттериологическое исследование мочипроведено17 пациентам. Цистография -7 детям.

Для диагностики тиреотоксикоза у 6 пациентов с жалобами на похудание, жидкий стул, слабость, выпадение волос, периодический субфебрилитет до 37,10- 37,50С, было выполнено УЗИ щитовидной железы, исследование крови на гормоны щитовидной железы ТТГ, Т3, Т4.

При подозрении на ревматические заболевания у 46 пациентов осуществлялось обследование с определением СРБ, РФ, АНФ, Ig A, Ig M, Ig G, а также различного спектра антител (анти – ДНК – АТ и др.).

При исследовании крови на ВИЧ, HBs Ag, НСV у 37 детей – все маркеры были отрицательные.

.Больные были консультированы специалистами: фтизиатром, ревматологом, иммунологом, неврологом, кардиологом, паразитологом, гастроэнтерологом. За время катамнестического наблюдения 24 ребенка были госпитализированы повторно.У 16 пациентов было диагностировано ОРВИ, в том числе - у 12 детей с осложнениями( пневмония-у 3, обструктивный бронхит – у 4, лакунарная ангина-у 3, пататонзиллярный абсцесс-у 1, гнойный отит- у 1 ребенка, госпитализированного для проведения парацетеза). У 3 пациентов – острый гастроэнтерит неуточненной этиологии. Внезапная экзантема (3). Перекрут гидати-

41

ды яичка (1), фелиноз (1), диагностированный после укуса и оцарапывания кошки.

2.3. Критерии диагностики герпесвирусных инфекций

Выявление антигенов ГВ в клетках крови проводили непрямой реакцией иммунофлюоресценции (НРИФ), с помощью разработаных экспериментальных тест-систем для определения антигенов ВПГ I, II, ЭБВ, ЦМВ, ВПГ-6, используя высокотитражную сыворотку, в лаборатории эпидемиологии оппортунистических инфекций ФГБУ НИИЭМ им. Гамалеи, (заведующая лабораторией - профессор д.б.н. Н.В. Каражас).

Наличие свечения антигена в ядре и в цитоплазме клеток свидетельствовало о законченной репликации вируса, т. е об активном инфекционном процессе. Мы считали положительными результаты внутриклеточной флюоресценции при наличии не менее трех светящихся антигенсодержащих клеток в поле зрения.

Диагностически значимым образцом считается наличие более 3 светящихся клеток в лунке как при постановке НРИФ (рис. 2,3,4) .

Рисунок 2. Лейкоциты, пораженные ЦМВ

42

Рисунок 3. Лейкоциты, пораженные ВЭБ

Рисунок 4. Лейкоциты, пораженные ВГЧ 6 типа.

Определение серологических маркеров ГВ методом ИФА, осуществлялось в ФГБУ НИИЭМ им. Гамалеи, в лаборатории эпидемиологии оппортунистических инфекций (заведующая лабораторией — профессор д. б. н. Н. В Каражас) и включало в себя определение антител классов Ig M и Ig G к ВПГ I, II типов, антител классов IgM и IgG раннему (ЕА) антигену ЭБВ, антител класса Ig G к

ядерному антигену (anti VCA IgM, anti VCA IgG. аnti EBV NA IgG), антител классов IgM и IgG к ЦМВ (anti CMV IgM, anti CMV IgG), антител классов IgG

43

к ВГЧ-6 (anti HHV-6 IgG). Исследование проводилось с использованием тест - системы «Векто-стрип», (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск, № Гос.Рег. 42/055/2001).

Методом ПЦР определяли ДНК герпесвирусов в крови, слюне, моче. Объем проведенных исследований представлен в таблице 5.

По совокупности обнаруженных маркеров определяли форму герпесвирусной инфекции. Различали:

Активную первичную инфекцию, она развивается при первом контакте восприимчивого организма с возбудителем и может приобретать скрытое (бес-

44

симптомное), стертое, клинически манифестное (классическое) течение. У таких больных критериями диагностики были:

1.Идентификация ДНК вируса в крови, при помощи ПЦР, ПЦР (+);

2.Выявление вирус-специфических IgM;

3.Детекция антигенов герпесвирусов в лейкоцитах крови, НРИФ (+);

4.Обнаружение IgG в титрах, превышающих диагостические в 2–4 раза,

диагностический титр 1:1000– для ВПГ, ЭБВ, ЦМВ, для ВГЧ 6– 1:250. Реактивированную ГВИ, она является результатом возобновления полноценной репликациивирусной ДНК и интенсивной репродукции популяций дочерних вирионов после различного по продолжительности периода латентности или персистенции. У таких больных критериями диагностики были:

1.Наличие специфических антител класса IgG в титрах, превышающих диагностические в 4 и более раз

НРИФ (+).

2.ПЦР (+).

3.Возможно выявление специфических IgM

Латентную персистирующую инфекцию — при отсутствие специфических

IgM и наличии титра специфических IgG в сыворотке крови, в низких диагностических титрах.

Нет встречи с возбудителем — при отсутствии маркеров герпесвирусных инфекций.

Критерии диагностики герпетической инфекции представлены в таблице

6.