- •1. Аллергические пробы in vivo и in vitro, их сущность, применение.
- •2. Анатоксины. Получение, применение. Антитоксический иммунитет
- •3. Антибактериальные препараты. Классификация. Механизмы антибактериального действия. Механизмы возникновения и распространения устойчивости.
- •Классификация, которую Козлова указала у себя в презентации:
- •3)По типу взаимодействия с микробной клеткой:
- •4)По кислотоустойчивости антимикробные препараты классифицируются на:
- •5. Бактериологический метод диагностики. Требования к выращиванию бактерий в искусственных условиях.
- •6. Бактериоскопический метод диагностики, его задачи и возможности. Методы микроскопии и их применение.
- •7. Бактериофаги. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Лизогения.
- •8. Бактериофаги. Получение, титрование. Практическое применение в диагностике, профилактике и лечение
- •9. Вакцины Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия
- •10. Внутривидовое типирование бактерий. Методы. Использование в практике
- •11. Врожденный иммунитет. Фагоцитоз. Показатели фагоцитоза
- •14 Грибы. Строение клетки. Классификация грибов по морфологии таллома.
- •15. Действие физических и химических факторов на микроорганизмы. Использование в практике.
- •16. Дисбиозы. Препараты для восстановления микробиоты
- •17 Иммунодиагностика (серодиагностика) инфекционных заболеваний. Принципы и диагностические критерии.
- •18. Иммунопрофилактика, иммунотерапия. Осложнения: анафилактический шок, сывороточная болезнь. Их предупреждение
- •19. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Принципы методов, используемые реагенты и оборудование, применение.
- •20. История микробиологии. Этапы развития. Современные задачи.
- •21. Культивирование бактерий in vitro. Требования к условиям культивирования. Питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам
- •Условия культивирования бактерий:
- •Требования к питательным средам:
- •Классификация
- •Примеры сред
- •22. Методы культивирования вирусов. Вирусологический метод, основные этапы.
- •23. Методы микроскопического исследования (световая, люминесцентная, темнопольная, фазово-контрастная, электронная микроскопия)
- •24. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Мпк (мик) и мбк. Критерии определения бактериальных изолятов как чувствительные, устойчивые, умеренно чувствительные
- •Достоинства метода
- •Недостатки метода
- •28. Механизмы формирования и распространения устойчивости к антибактериальным препаратам бактерий – возбудителей инфекционных болезней
- •29. Микробиота желудочно-кишечного тракта человека
- •30. Микробиота урогенитального тракта человека
- •31. Моноклональные антитела. Получение. Использование
- •32. Морфология микроорганизмов. Морфологические группы бактерий
- •33. Нагрузочные серологические реакции. Реакции непрямой гемагглютинации. Компоненты. Применение
- •34. Наследственность и изменчивость у бактерий. Механизмы обеспечения и передачи дочерним клеткам генетической информации. Механизмы изменчивости
- •35. Органеллы бактериальной клетки. Функциональное назначение органелл
- •Особенности клеточной стенки грамположительных бактерий
- •Особенности клеточной стенки грамотрицательных бактерий
- •5. Жгутики
- •36. Особенности биологии вирусов. Принципы классификации вирусов
- •37. Особенности противовирусного иммунитета
- •38. Отличительные черты риккетсий. Методы культивирования. Риккетсиозы, общая характеристика.
- •39. Патогенность и вирулентность бактерий. Факторы вирулентности. Генетические основы распространения факторов вирулентности среди бактерий.
- •40. Понятие о морфологических свойствах микроорганизмов. Морфологические группы бактерий.
- •41.Понятие об инфекции. 3 участника инфекционного процесса. 3 звена эпидемической цепи
- •3 Участника инфекционного процесса:
- •3 Звена эпидемической цепи:
- •42. Предмет и задачи медицинской микробиологии и иммунологии. Вклад российских ученых в развитии микробиологии и иммунологии.
- •43. Предмет и современные задачи санитарной микробиологии. Санитарно-показательные микроорганизмы. Их значение для оценки безопасности объектов окружающей среды и продуктов питания
- •44. Принципы классификации инфекционных заболеваний.
- •45. Противогрибковые препараты.
- •46. Различия в строении микроорганизмов прокариот и эукариот
- •47. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.
- •48. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, типы, компоненты, применение для индикации антигенов и иммунодиагностики
- •49. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки, применение
- •51.Роль врожденного и приобретенного иммунитета в развитии инфекции
- •52. Рост и размножение бактерий в искусственных условиях. Фазы размножения
- •53. Спирохеты. Характеристика. Особенности строения. Роль в патологии человека
- •54. Стерилизация, способы, аппаратура
- •Физические:
- •Химические:
- •Механические:
- •55. Строение бактериального генома. Хромосомные и внехромосомные элементы. Подвижные элементы. Умеренные бактериофаги и их роль в изменчивости генома
- •56. Структура и функции клеточной стенки бактерий. Особенности строения клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий.
- •57. Тинкториальные свойства бактерий. Цели и методы окраски
- •Источник: Mikrobiologia_Zverev, khoroshie_lektsii_po_mikre
- •58. Типы и механизмы питания бактерий. Классификация бактерий по используемым источникам углерода и энергии. Прототрофы и ауксотрофы
- •59. Токсины бактерий, их природа и свойства. Получение и применение экзо- и эндотоксинов.
- •60. Транспорт веществ в бактериальную клетку. Экскреция высокомолекулярных соединений из бактериальной клетки
- •Секреция продуктов жизнедеятельности бактериальной клеткой
- •61. Ферменты бактерий. Роль ферментов в патогенности бактерий Идентификация бактерий по ферментативной активности
- •62. Чистые культуры микроорганизмов. Принципы и методы выделения
- •63. Энергетический метаболизм у бактерий. Типы энергетического метаболизма. Типы дыхания.
- •64. Этапы взаимодействия вирусов с чувствительными клетками и факторы, способные их нарушить. Формы вирусной инфекции.
- •1. Аденовирусная инфекция. Характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика.
- •4. Вирусы герпеса. Классификация, значение в патологии человека. Профилактика
- •5. Вирусы экхо и Коксаки, вызываемые ими заболевания. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций.
- •Коксаки Coxsackievirus
- •Экхо есно (Enteric Cytopathic Human Orphan)
- •7. Возбудители анаэробной газовой инфекции. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая и неспецифическая профилактика. Принципы лечения
- •Характеристика возбудителей
- •C. Septicum (палочка Гона-Сакса)
- •Эпидемиология
- •Патогенез
- •Клиника
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Профилактика
- •Лечение
- •8. Возбудители бруцеллеза. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения
- •9.Возбудители брюшного тифа и паратифов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения
- •10. Возбудители возвратных тифов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения
- •11. Возбудители гнойно-септических инфекций. Принципы лабораторной диагностики.
- •Возбудители гси
- •Принципы лабораторной диагностики гси, вызванных аэробными и факультативно-анаэробными бактериями
- •Лабораторная диагностика анаэробных инфекций
- •Аэробные грамположительные кокки
- •12.Возбудители гриппа. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •Характеристика
- •Вирус гриппа а
- •1.Геном.
- •2.Морфология
- •5.Методы культивирования.
- •6.Резистентность
- •Лабороторная диагностика.
- •Специфическая профилактика
- •Вирус гриппа в
- •Вирус гриппа с
- •13. Возбудители кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика
- •14. Возбудители коклюша и паракоклюша. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика
- •15. Возбудители микобактериозов. Морфология, особенности строения микобактериальной клетки). Распространенность. Лабораторная диагностика
- •16. Возбудители микозов кожи и ее придатков
- •Дерматофиты
- •Возбудители разноцветного лишая и других поверхностных микозов
- •17. Возбудители орви. Общая характеристика. Принципы диагностики, профилактики и лечения.
- •18. Возбудители пищевых токсикоинфекций. Лабораторная диагностик.
- •19. Возбудители сальмонеллезных гастроэнтеритов. Характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения
- •20. Возбудители пищевых токсикоинфекций. Лабораторная диагностика.
- •21. Возбудители туберкулеза. Классификация. Особенности микобактериальной клетки. Распространенность.
- •22. Возбудители хламидиозов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Принципы лечения
- •23. Возбудители шигеллезов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и принципы лечения
- •24. Возбудители эшерихиозов. Характеристика. Лабораторная диагностика эшерихиозов
- •25. Возбудитель бешенства. Характеристика. Патогенез. Специфическая профилактика.
- •26. Возбудитель ботулизма. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.
- •Источник: лекции 21 года и Коваленко
- •28. Возбудитель кампилобактериоза. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения.
- •29. Возбудитель клещевого энцефалита. Характеристика
- •30. Возбудитель кори. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика
- •Профилактика. Для профилактики кори используют вакцины:
- •31. Возбудитель краснухи. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.
- •32. Возбудитель Ку-лихорадки. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения
- •33. Возбудитель паротита. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.
- •34. Возбудитель сибирской язвы. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика Принципы лечения
- •35. Возбудитель сифилиса. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения.
- •38. Возбудитель чумы. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика Принципы лечения
- •39. Гонококки. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения
- •40. Классификация микозов по локализации инфекционного процесса
- •41. Криптококкоз. Возбудители. Лабораторная диагностика криптококкоза
- •43. Микологический метод диагностики микозов. Методы идентификации дрожжей и нитчатых грибов.
- •44. Микоплазмы. Биологические свойства, особенности строения. Роль в патологии человека. Принципы диагностики и лечения
- •Возбудители урогенитальных микоплазмозов и уреаплазмоза.
- •45. Микоплазмы. Биологические свойства, особенности строения. Роль в патологии человека. Принципы диагностики и лечения.
- •46. Общая характеристика рода Candida. Методы и критерии диагностики.
- •Основные свойства грибов рода Candida:
- •Лабораторная диагностика
- •47. Патогенные и условно-патогенные грибы. Классификация грибов по группам патогенности.
- •49 Стафилококки.Характеристика. Лабораторнаядиагностика стафилококковых инфекций. Стафилококковое носительство
- •50. Стрептококки. Характеристика. Лабораторная диагностика стрептококковых инфекций.
- •1. Назовите возбудителя гриппа.
- •2. Таксономическое положение возбудителя.
- •3. Какова морфология возбудителя?
- •4. Эпидемиология гриппа (источник инфекции, механизм, пути передачи инфекции).
- •5. Каковы основные звенья патогенеза гриппа?
- •Задача 2
- •Задача 3.
- •1. Назовите возбудителя коклюша.
- •2. Назовите факторы вирулентности возбудителя коклюша.
- •3. Эпидемиология коклюша (источник инфекции, механизм, пути передачи инфекции).
- •4. Какие периоды болезни выделяют и какие методы диагностики будут эффективны в каждом? Периоды болезни.
- •5. Профилактика коклюша
- •Задача 4.
- •Задача 5.
- •1. Назовите возбудителя сифилиса. К какой морфологической группе относится возбудитель сифилиса?
- •2. Как называется первичный аффект при сифилисе и место его локализации.
- •3. Опишите морфологические, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя сифилиса.
- •4. Эпидемиология сифилиса: источник инфекции, механизм и пути передачи инфекции.
- •Задача 6.
- •Задача 7.
- •1. Кто из обследованных сотрудников хирургического отделения является носителем патогенного стафилококка?
- •2. По каким признакам проводится идентификация s.Aureus?
- •3. С какой целью проводилось фаготипирование s.Aureus?
- •4. Кто из обследованных лиц мог быть источником послеоперационных осложнений у больных?
- •5. Какие меры необходимо срочно принять для прекращения распространения данной внутрибольничной инфекции?
- •Задача 8.
- •Задача 9.
- •1. Какой микроорганизм чаще всего вызывает данное заболевание?
- •3. Основной метод диагностики гси? Какой материал может использоваться для исследования?
- •4. Какие препараты помимо антибиотиков можно применять для специфической терапии?
- •5. Какие другие заболевания еще может вызывать данный возбудитель: специфические и неспецифические?
- •Задача 10.
- •Задача 11.
- •Задача 12.
- •1. Назовите возбудителя названного заболевания, его таксономическое положение, морфологические и тинкториальные свойства.
- •2. Эпидемиология менингита: источник инфекции, входные ворота, механизм, факторы и пути передачи инфекции.
- •3. Какие формы инфекции существуют и их эпидемиологическое значение?
- •4. Какой материал нужно взять для микробиологического исследования? Основные методы микробиологического исследования?
- •5. Проводится ли специфическая профилактика названного заболевания?
- •Задача 13.
- •1. Назовите род и вид основного возбудителя туберкулеза у человека.
- •2. Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя туберкулеза.
- •3. В чем особенность строения клеточной стенки возбудителя туберкулеза, и какую они играют роль в диагностических приемах?
- •4. Какой метод окраски применяется для выделения возбудителя туберкулеза?
- •5. Профилактика туберкулеза.
- •Задача 14
- •Задача 15.
- •Задача 16
- •Задача 17.
- •1. К какой группе микробов относится возбудитель краснухи?
- •2. К чему приводит заражение женщин в первые 4 месяца беременности?
- •3. Эпидемиология краснухи (источник инфекции, механизм, пути передачи инфекции).
- •4. Методы лабораторной диагностики краснухи и характер исследуемого материала.
- •5. Специфическая профилактика краснухи.
- •Задача 18.
- •Задача 19
- •1. Назовите возбудителя и инфекционного паротита.
- •2. Какое лабораторное исследование было назначено?
- •3. Эпидемиология данного заболевания (источник инфекции, механизм, пути передачи инфекции).
- •4. Какие осложнения данного заболевания?
- •5. Какова профилактика данного заболевания?
- •Задача 20.
- •1. Какое/ие инфекционное заболевание можно предположить в данном случае?
- •2. С чем необходимо дифференцировать заболевание?
- •3. Какие дополнительные исследования следует провести для уточнения этиологического диагноза?
- •4. Нужно ли в данном случае назначить антифунгальные препараты?
- •5. Нужна ли изоляция больного для предотвращения распространения инфекции?
- •Задача 22. (эту задачу я еще уточню у преподавателя)
- •5. Каковы принципы лечения инфекции?
- •Задача 23.
- •Задача 24.
- •Задача 25.
- •1. Назовите возбудителя/лей газовой гангрены
- •2. Особенности биологии возбудителя.
- •3. Какова причина возникновения подобного осложнения?
- •4. Какие факторы способствуют развитию газовой гангрены?
- •5. Какой материал необходимо взять на исследование и какие лабораторные методы могут применяться для диагностики данного заболевания?
- •Задача 26.
- •1. Как называется группа микроорганизмов, в норме населяющих тело человека?
- •2. При каких условиях микроорганизмы данной группы могут вызывать заболевания у человека?
- •3. Какой главный критерий диагностики при выделении данных микроорганизмов?
- •4. Какова роль микроорганизмов этой группы в возникновении внутрибольничных инфекций?
- •5. Какими особенностями обладают госпитальные штаммы микроорганизмов?
- •Задача 27
- •Задача 28.
- •1. Назовите возбудителя скарлатины?
- •2. Факторы вирулентности данного микроорганизма, чем он отличается от представителей того же вида?
- •3. Каковы основные осложнения нелеченой скарлатины?
- •4. Каковы принципы лечения скарлатины?
- •5. Назовите основные методы диагностики скарлатины.
- •Задача 29.
- •Задача 30.
- •1. Что содержится в препарате?
- •2. Как получен препарат?
- •3. Показания к применению и способ применения.
- •4. Механизм противовирусного действия препарата.
- •5. Клинический эффект от применения препарата.
- •Задача 31.
- •Задача 32.
- •1. Что содержится в препарате?
- •2. Как получают нистатин?
- •3. Показания и способ применения
- •4. Механизм действия
- •5.Клинический эффект применения нистатина
- •Задача 33.
- •1. К какой группе относится препарат флуконазол?
- •2. Как получают флуконазол?
- •3. Механизм действия флуконазола на клетки грибов.
- •4. Показания и способы применения препарата
- •5. Клинический эффект от применения препарата.
- •Задача 34.
- •1. Что содержит препарат?
- •2. Как получен биопрепарат?
- •3. Что означает адсорбированный?
- •4. Для чего используется данный препарат?
- •Задача 35.
- •Задача 36.
- •Задача 37.
- •1. Для чего он используется препарат? Что он содержит?
- •2. Как получен биопрепарат?
- •3. Механизм действия препарата.
- •4. Дайте характеристику иммунитета при введении данного препарата.
- •5. Схема введения вакцины?
- •Задача 38.
- •5. О чем говорит отрицательный, положительный и гиперергический результат пробы?
- •Задача 39.
- •Задача 40.
- •Задача 41
- •Задача 42.
- •Действующее вещество:
- •5. Объясните достигаемый эффект после введения препарата.
- •Задача 43
- •Задача 44
- •1. К какой группе относится данный препарат?
- •2. Что содержит препарат?
- •3. Каков механизм действия препарата?
- •4. Как применяют препарат?
- •5. Укажите противопоказания к применению препарата
- •2. При нарушении функции почек
- •Задача 45.
- •5. Опишите достигаемый эффект после введения препарата.
- •Задача 48.
- •Задача 49.
- •Задача 50.
- •Задача 51.
- •Задача 52
- •Задача 53.
- •1. К какой группе относится данный препарат?
- •2. Что содержит данный препарат?
- •3. Как получен данный препарат?
- •4. Какова причина, по Вашему мнению, состояния больного?
- •5. В чем состоит профилактика последствий подобных травм?
- •Задача 54.
- •Задача 55.
- •1. Какой препарат следует назначить для коррекции данного дисбиотического состояния? к какой группе он относится?
- •2. Что содержит данный препарат?
- •3. Как получен и как применяется данный препарат?
- •4. Объясните предполагаемый механизм действия препарата.
- •5. Какие еще группы препаратов могут применяться при коррекции дисбиозов?
- •Задача 56.
- •Задача 57.
- •1. К какой группе относится данный биопрепарат?
- •2. Что содержит данный биопрепарат?
- •3. Как получен данный препарат?
- •4. Кому рекомендуют вакцинацию «Пневмо – 23»?
- •5. Дайте характеристику иммунитета, возникающего после введения данной вакцины.
- •Задача 58.
- •1. К какой группе относится данный препарат?
- •2. Что содержит данный препарат?
- •3. Как получен препарат?
- •4. Каковы показания для вакцинации, схема вакцинации?
- •Задача 59.
- •Задача 60.
- •Задача 61.
- •Задача 62.
- •1. К какой группе относится данный биопрепарат?
- •2. Что содержит биопрепарат?
- •3. Как получен биопрепарат?
- •4. Для чего применяется препарат?
- •5. Схема использования и учета результата
- •Задача 63
- •1)К какой группе относится препарат «интести-бактериофаг»?
- •2)Что содержит препарат«интести-бактериофаг»?
- •3)Как получен«интести-бактериофаг»?
- •4)Для чего используется «интести-бактериофаг»?
- •5)Возможный способ введения препарата?
- •Задача 64.
- •Задача 65.
- •Задача 66
- •Задача 67.
- •1. Какой (какие) возбудитель(и) при данной патологии Вы предполагаете?
- •2. Факторы вирулентности возбудителя?
- •3. Какой материал, помимо мокроты, можно взять для исследования?
- •Задача 68.
- •Задача 69
- •1. Какой (какие) возбудитель(и) при данной патологии Вы предполагаете?
- •2. Факторы вирулентности возбудителя.
- •3. Особенности подготовки мокроты для микроскопии.
- •4. Какие лабораторные методы исследования должны применяться в этом случае?
- •5. Профилактика данной инфекции
- •Задача 70.
- •1. Какой возбудитель, кроме мбт, при данной патологии Вы предполагаете?
- •2. Факторы вирулентности возбудителя.
- •3. Особенности подготовки мокроты для микроскопии.
- •4. Какие лабораторные методы исследования должны применяться в этом случае?
- •5. Профилактика данной инфекции
- •Задача 71.
- •Задача 72.
- •Задача 73.
- •4. Какие лабораторные методы исследования должны применяться в этом случае?
- •5. Профилактика туберкулеза
- •Задача 74.
- •Задача 75.
- •Задача 76.
- •1. Какие методы лабораторного исследования следует применить для подтверждения диагноза?
- •2. Каковы меры профилактики заболевания у контактных с ним детей?
- •3. Каковы особенности эпидемиологии гепатита а?
- •4. Существует ли специфическая профилактика гепатита а?
- •5. Какой еще гепатит может передаваться таким же механизмом?
- •Задача 77
- •Задача 78
- •1. Какой возбудитель при данной патологии Вы предполагаете?
- •2. Какой диагностический материал может быть исследован в этом случае?
- •3. Факторы вирулентности данного возбудителя.
- •4. Методы лабораторной диагностики.
- •5. Какие осложнения, кроме гломерулонефрита, может вызвать данный возбудитель?
33. Нагрузочные серологические реакции. Реакции непрямой гемагглютинации. Компоненты. Применение
Нагрузочные реакции иммунитета – реакции, в которых антиген нагружается на какой-либо носитель. В качестве носителя антигена используются эритроциты (РНГА), частицы латекса (латексная агглютинация), убитые микробные клетки (коагглютинация), частицы активированного угля (угольная конгламерация).
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.
Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Адсорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома. Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микроорганизмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества. Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.
Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.
Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфичностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токсинов в исследуемом патологическом материале.
Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные антительные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфических антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии нагруженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности. Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отрицательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — характерный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неровными краями.
Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов).
Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия хлорида. Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка.
РА используют для: 1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях; 2) определения возбудителя, выделенного от больного; 3) определения групп крови с использованием моноклональных антител против алло-антигенов эритроцитов.
Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.
Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами.
Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увеличивающимися разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка. Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии.
Реакцию коагглютинации применяют для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный диагностикум). Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.
Механизм. Основан на том, что находящийся на поверхности золотистого стафилококка белок А селективно реагирует с Fc-фрагментом IgGl, G2, G4, оставляя свободными антидетерминанты Ат, которые, взаимодействуя с гомологичным Аг, вызывают агглютинацию стафилококков. Для постановки КОА применяют коммерческие стафилококковые реагенты, содержащиеся в ампулах или высушенные в лунках полистироловых пластин или предметных стекол. К реагенту добавляют 0,01- 0,1 мл исследуемой культуры или растворимого Аг, инкубируют при комнатной температуре 10-30 мин (в условиях постановки реакции на стекле) или 18 -20 ч (в условиях постановки реакции в капиллярах). Учет проводят так же, как при обычной РА. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.