Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Метод. указ. МОДУЛЬ 2,3 РУССКИЙ.doc
Скачиваний:
9
Добавлен:
10.11.2019
Размер:
1.2 Mб
Скачать

4. Назовите фермент цикла Кребса, активность которого лимитирует скорость протекания всего процесса в целом:

А. Цитратсинтаза.

D. Сукцинил-КоА-тиокиназа.

В. Сукцинатдегидрогеназа.

Е. Малатдегидрогеназа.

С. Изоцитратдегидрогеназа.

5. Назовите фермент цикла Кребса, необходимый для синтеза ГТФ.

А. Цитратсинтаза.

D. Сукцинил-КоА-тиокиназа.

В. Сукцинатдегидрогеназа.

Е. Малатдегидрогеназа.

С. Изоцитратдегидрогеназа.

6. Назовите метаболит цикла Кребса, который является макроэргическим соединением.

А. Цитрат.

С. Изоцитрат.

Е. Фумарат.

В. Сукцинат.

D. Сукцинил-КоА.

7. Укажите энергоэффект цикла Кребса (в молях АТФ), который обеспечивается процессом окислительного фосфорилирования в расчете на 1 моль ацетил-КоА.

А. 8 АТФ.

В. 11 АТФ.

С. 12 АТФ.

D. 9 АТФ.

Е. 3 АТФ.

8. В реакции окислительного декарбоксилирования пирувата принимают участие все витамины, кроме:

А. В5.

В. В3.

С. В2.

D. В1.

Е. В7.

9. При тканевом дыхании происходит универсализация энергии путем образования АТФ. Сколько молекул АТФ образуется при преобразовании α -кетоглутарата в сукцинил-КоА?

А. 5.

В. 6.

С. 3.

D. 2.

Е. 12.

10. Общим промежуточным продуктом обмена белков, липидов и углеводов является:

А. Сукцинил-КоА.

С. Оксалоацетат.

Е. Цитрат.

В. Ацетил-КоА.

D. Лактат.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Активность сукцинатдегидрогеназы мышц и

ее конкурентное ингибирование малоновой кислотой

Задание. Изучить активность сукцинатдегидрогеназы мышц и её конкурентное ингибирование малоновой кислотой.

Принцип. О действии сукцинатдегидрогеназы (СДГ), катализирую-щей окисление янтарной кислоты (НООС-СН2-СН2-СООН) до фумаровой (НООС-СН=СН-СООН), судят по обесцвечиванию введенного в реакционную смесь акцептора водорода 2,6-дихлорфенолиндофенола, который, восстанавливаясь, переходит в лейкоформу. Обесцвечивание реакционной смеси не происходит в присутствии малоновой кислоты (НООС-СН2-СООН), которая является конкурентным ингибитором СДГ.

Ход работы. Для получения ферментного препарата 1-2 г свежих мышц измельчают ножницами и растирают в ступке с небольшим количеством воды (2-3 мл) на протяжении 1 мин, потом мышечную кашицу переносят на двойной слой марли в воронке, промывают 25 мл дистиллированной воды. Промытую кашицу отжимают, переносят в пробирку и суспендируют стеклянной палочкой с 4 мл воды. Полученную суспензию равномерно разливают в четыре пробирки. Первую пробирку кипятят на протяжении 1-2 мин для инактивации фермента, затем в пробирки приливают реактивы по схеме, приведенной в таблице:

№ пробирки

Сукцинат, мл

Вода, мл

Малонат, мл

2, 6-дихлорфенолиндофенол

1

1

0,5

-

2 капли

2

1

0,5

-

2 капли

3

1

1,5

-

2 капли

4

1

-

0,5

2 капли

Через 15 мин наблюдают исчезновение синего цвета во 2-й пробирке.

Практическое значение. В клинико-биохимических исследова-ниях используются методы определения окислительно-восстановитель-ных ферментов в биоптатах для оценки энергетического обмена при разных патологических состояниях, а также для токсикологии и фармакологии при изучении действия лекарственных препаратов и ядов, которые могут быть разобщителями или ингибиторами.