4.3.4 Определение общего сахара

Для определения общего сахара проводят гидролиз сахарозы. В реакционную коническую колбу вместимостью 100-150 см³ отмеряют пипеткой 10 см³ приготовленной вытяжки объекта и 4 см³ 1М раствора хлороводородной кислоты. Колбу ставят на плитку, жидкость доводят до кипения и кипятят 1 мин, охлаждают до комнатной температуры, затем в колбу вносят 2 см³ 2М раствора гидроксида натрия (или калия) для нейтрализации кислоты и 25 см³ щелочного раствора гексацианоферрата (III) калия. Содержимое колбы доводят до кипения и кипятят 1 мин. После охлаждения заполняют полученным раствором кювету и определяют оптическую плотность. Так как при значении оптической плотности в интервале 0,3-0,6 получаются более точные результаты, то при других значениях оптической плотности анализ повторяют, изменив объем вводимой водной вытяжки объекта исследования, добавив такое количество воды, чтобы общий объем составлял 10 см³.

Содержание сахара (Х_рс) в процентах, выраженное в глюкозе, вычисляют по формуле:

Х_рс = , (4.11)

где М – количество глюкозы, найденное по градуировочному графику, мг; V– объем исследуемого раствора, приготовленного из навески. м³; V₁ – объем раствора, взятый для реакции с гексацианоферратрм калия, см³; m – масса навески объекта исследования, мг.

Для определения содержания общего сахара, выраженного в сахарозе, результат полученный по формуле, умножают на 0,95. Если калибровку проводят с использованием раствора гидролизованной сахарозы, результат сразу вычисляют в % сахарозы. Для расчета содержания сахарозы из данных анализа общего сахара, выраженного в глюкозе, вычитают результат анализа содержания восстанавливающих сахаров и разницу умножают на коэффициент 0,95.

4.4 Определение массовой доли редуцирующих сахаров йодометрическим методом

Метод основан на окислении альдегидной группы сахаров (глюкозы, лактозы) йодом в щелочной среде. Массовую долю сахарозы определяют по разности между количеством взятого и неизрасходованного йода, определяемого титрованием тиосульфата натрия.

СН₂ОН-(СНОН)₄-СНО + I₂+ 3NaOH = CH₂OH-(CHOH)₄-COONa +2H₂O + 2NaI

I₂ + 2 Na₂S₂O₃ = NaI + Na₂S₄O₆

Для протекания реакции необходимо чтобы йода было в 2-3 раза было больше, чем требуется для окисления глюкозы, щелочи должно быть в полтора раза больше по объему, чем раствора йода. Индикатором служит раствор крахма­ла. Определению предшествует холостой опыт, в котором устанав­ливается соотношение между раствором йода и тиосульфатом на­трия.

Реактивы: гидроксид натрия, растворы 0,1 н. и 1 н; 15 %-ого раствора железистосинеродистого калия, 30 %-ого раствора сульфата цинка сульфат меди; йод, 0,5 н. раствор соляной кислоты; тио­сульфат натрия, 0,1н. раствор, крахмал растворимый, 1%-ный раствор, сахароза, ч.д.а.

Материалы. оборудование: электрическая водяная баня; термометр ртутный стеклянный с пределом измерения 150 ^оС; мерные колбы вместимостью на 100 и 250 см³; фарфоровая ступка с пестиком; пипетка вместимостью 5,10, 50 см³, конические колбы вместимостью 100, 250 см³; мерный цилиндр вместимостью 10 см³.

Проведение анализа. Из подготовленной пробы в химический стакан вместимостью 25 -50 см взвешивают навеску массой около 5 г с точностью ±0,01 г, добавляют в него 10 см ³ воды и тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Полученную массу количественно переносят в коническую колбу на 250 см ³, остатки смывают со стенок стакана 30-40 см дистиллированной воды. В мерную колбу добавляют 3 см ³ 15 %-ого раствора железистосинеродистого калия К₄ [Ре+2(СН)₆] и 3 см³ 30 %-ого раствора сульфата цинка. Содержимое тщательно перемешивают и через 10-15 мин доводят до метки дистиллированной водой и фильтруют содержимое колбы в сухую колбу через бумажный фильтр. В коническую колбу на 200 см³ помещают 10 см³ полученного фильтрата, приливают по 25 см³ 0,1 н раствора йода и при перемешивании 35 см³ 0,1 н раствора NaOH. Колбу закрывают и помещают в темное место на 20 мин. Затем в колбу приливают и 10 см³ 0,5 н раствора соляной кислоты. Выделившийся йод титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия до появления светло-желтой окраски. Затем к раствору добавляют 1 см³ крахмала и продолжают титровать, до исчезновения синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт, в котором вместо водной вытяжки берут дистиллированную воду.

Массу глюкозы (Х₁) в процентах рассчитывают по формуле:

, ( 4.12)

где V₁ - объем 0,1 н раствора тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл; V₂- объем 0,1 н раствора тиосульфата, израсходованный на титрование в рабочем опыте, мл; 0,009 количество глюкозы, соответствующее 1 мл 0,1 н раствора йода; Р- фактор разведения .

Расхождения между параллельными определениями не должны . превышать 0,3 %.