Р
Количество аскорбиновой кислоты в мкмоль/сутки
асчет. По
результатом титрования рассчитывают
суточное выде-ление аскорбиновой
кислоты, учитывая, что 1 мл 0,001н раствора
йода соответствует 0,5 мкмолям аскорбиновой
кислоты. Расчет проводят
по формуле:
=
,
где а – количество 0,001н раствора йода (мл); 0,5 мкмоль аскорбиновой кислоты, что соответствует 1 мл 0,001н J2; 1 500 – суточный диурез (мл); 5 – объём мочи в пробе (мл). В норме в сутки с мочой выделяется 284–568 мкмоль аскорбиновой кислоты.
Задание 3. Определить содержание аскорбиновой кислоты в экстракте шиповника.
Принцип. Определение основано на окислительно-восстановитель-ной реакции между аскорбиновой кислотой и 2,6-дихлорфенолиндофе-нолом, который при восстановлении переходит в лейкоформу. Для определения аскорбиновой кислоты из исследуемого продукта готовят подкисленный водный экстракт, которым титруют 2,6-дихлорфенолиндо-фенол. Подкисление витаминного водного экстракта повышает специфичность метода.
Ход работы. 150 г шиповника заливают 5 000 мл воды и оставляют на несколько часов, затем фильтруют через марлю и полученным экстрактом заполняют микробюретку. В центрифужную пробирку отмеривают микропипеткой 0,05 мл 2,6-дихлорфенол-индофенола и титруют из бюретки по каплям экстрактом шиповника, постоянно встряхивая пробирки. От первой капли содержимое пробирки краснеет (это связано с индикаторными свойствами 2,6-дихлорфенол-индофенола), титрование продолжают до полного обесцвечивания раствора.
Расчет. Содержание витамина С (Х) в мг% рассчитывают по формуле:
Х
=
,
где 0,88 - титр 2,6-дихлорфенолиндофенола по аскорбиновой кислоте (мг); 0,05 - объем 2,6-дихлорфенолиндофенола в опыте (мл); А - объем экстракта, который пошел на титрование (мл); Б - общий объем экстракта (5000 мл); В - навеска шиповника (150 г).
Практическое значение. Качественные реакции на витамины основаны на цветных реакциях, характерных для той или иной химической группы, которая входит в их структуру. Проведение таких реакций позволяет выявить витамины в лекарственных препаратах, пищевых продуктах и лекарственных растениях. Принципы, которые положены в основу качественных реакций на витамины, используются и при разработке методов их количественного определения.
Литература
1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 400-411.
2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 483-494.
3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 124-150.
4. Вороніна Л.М. та ін. Біологічна хімія. – Харків: Основа, 2000. – С. 442-464.
5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 220-247.
6. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 125-132.
7. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Коби-лянська Л.І. та ін. / За ред. О.Я. Склярова.–К.:Здоров’я, 2002. – С. 219-235.
8. Лабораторні та семінарські заняття з біологічної хімії: Навч. посібник для студентів вищих навч. закл. / Л.М. Вороніна, В.Ф. Десенко, А.Л. Загайко та ін. – Х.: Вид-во НФаУ; Оригінал, 2004. – С. 242-273.