22. Гельминтоларвоскопические методы диагностики (метод Бермана-Орлова, метод Вайда)

применяют для обнаружения личинок паразитических червей в фекалиях (диктиокаулез), молоке (стронгилоидоз, неоаскароз), выделениях из глаз (телязиоз), на коже (онхоцеркоз). Они дифференцируются по размеру, строению, форме.

Метод Бермана - Орлова. Для исследования фекалий используют аппарат, состоящий из средней воронки, резиновой трубки (10-15 см длиной), соединенной верхним концом с воронкой, зажима, укрепленного на нижнем конце резиновой трубки, металлического сита или куска марли и штатива (для одного или нескольких аппаратов). Смонтированный аппарат заполняют теплой водой (37-40°). 10- 15 г свежих фекалий кладут па сито или завертывают в марлю и осторожно опускают в воронку (предварительно шарики фекалий лучше разрушать). Фекалии от овец выдерживают в аппарате 2-4 ч; а от телят - не менее 6- 7 ч. Затем зажим на трубке ослабляют, а вытекающую жидкость собирают в пробирку и центрифугируют 2 - 3 мин. После этого верхний слой жидкости сливают быстрым опрокидыванием пробирки, а оставшуюся на дне жидкость переносят на большое предметное стекло (7X10 см) н исследуют под микроскопом.

Многие ветеринарные лаборатории считают, что применение зажимов на резиновую трубку в аппарате Бермана связано с неудобствами.

Поэтому нижние концы резиновых трубок непосредственно соединяют с маленькими или центрифужными пробирками. Перед исследованием осадка под микроскопом жидкость пе центрифугируют. Используют в качестве основного метода для диагностики диктиокаулеза и протостронгилидозов жвачных.

Метод Вайда. Несколько свеже выделенных шариков (4-5) овец или коз помещают в бактериологическую чашку или на часовое стекло и овлажняют их небольшим количеством теплой воды (37-40°). Через 15-30 мин фекалии удаляют, а оставшуюся жидкость исследуют под микроскопом на наличие живых личинок нематод. Эффективность данного метода значительно ниже в сравнении с методом Бермана - Орлова, поэтому его редко применяют для диагностики диктиокаулеза и не используют для распознавания протостропгилидозов мелких жвачных (большинство личинок последних нематод находится внутри фекальных шариков).

 

23. Специальные диагностические исследования (исследование кожи при онхоцеркозе крс и лошадей; реакция Кацони; серологические реакции).

- Пробу кожи (3 г) освобождают от волос, остатков мышц и жира, разрезают на кусочки, помещают в аппарат Берма на и заливают изотоническим раствором натрия хлорида. После 16-18-часового отстаивания при комнатной температуре жидкость из воронки сливают в пробирки, затем центрифугируют (или 2-3 ч отстаивают) и верхний слой жидкости отсасывают, а остаток жидкости со дна наносят на предметное стекло и микроскопируют. В поле зрения из пробы инвазированного животного можно выявить десятки подвижных микроонхоцерков (0,17- 0,2 мм длины). При компрессорном исследовании мошек инвазионных личинок этих нематод (0,4-0,5 мм длины) можно обнаружить под микроскопом. Посмертно онхоцеркоз диагностируют при обнаружении половозрелых онхоцерков в выйной и гастролиенальпой связках, а также при выявлении микроонхоцерков в парных кожах от скотак убитого на убойных пунктах и мясокомбинатах.

 - Иногда применяют серологические и аллергическую (проба Кацони) реакции. Положительная реакция Кацони характеризуется утолщением складки у овец от 2,5 см и больше, у крупного рогатого скота от 4,6 см и выше; сомнительная - 3,6- 4,5 см и отрицательная - 3,5 см и ниже. К недочету данной реакции относится возможность развития анафилаксического шока при повторном применении антигена.

- При серологическом исследовании определяют наличие антител к гельминтам (достоверность — около 60 %): при подозрении на эхинококкоз, цисти-церкоз, трихинеллез, токсокароз широко используют реакции непрямой гемагглютинации, агглютинации латекса, связывания комплемента, иммунофлюорес-ценции Не во всех случаях методы определения специфических антител обладают достаточной специфичностью и достоверностью. Антигенный состав гельминта зависит не только от вида, но и от стадии; проходя сложный цикл развития от яйца до взрослой особи, гельминты меняют антигенный состав. Кроме того, в иммунодиагностических реакциях используются соматические антитела, а в организме хозяина

антитела вырабатываются в основном на экскреты и секреты гельминта. Неспецифическая сенсибилизация организма, общность некоторых антигенов трематод, простейших и человека создают высокий удельный вес ложноположительных реакций в титрах ниже достоверно диагностических