21. Гельминтоовоскопические методы диагностики (метод нативного мазка, соскоб с перианальных складок, метод последовательных промываний, метод Фюллеборна, метод Дарлинга, метод Щербовича).

Гельминтоовоскопия охватывает большое количество исследовательских приемов, которые используют для обнаружения яиц паразитических червей.

Метод нативного мазка. В ветеринарной практике имеет ограниченное применение, вследствие низкой его эффективности. Яйца паразитических червей удается обнаружить только при высокой и средней интенсивности инвазии. На предметное стекло наносят каплю равных частей воды и глицерина и небольшой кусочек фекалий (с булавочную головку), тщательно перемешивают стеклянной или деревянной палочкой; после удаления твердых частиц на эту смесь кладут покровное стекло и исследуют под микроскопом. Глицерин просветляет препарат и препятствует быстрому высыханию его. Рекомендуют исследовать 5-10 препаратов (капель). Этот метод используют в качестве дополнительного к другим методам.

 

Методы концентрации яиц гельминтов разделяются на три группы, в зависимости от соотношения плотности яиц гельминтов и жидкости, в которой взвешены пробы фекалий животных.

 Метод последовательных промываний состоит в том, что 3 г свежих фекалий кладут в стаканчик (100 мл) и тщательно размешивают с водой, доводя объем до 50 мл. Полученную смесь фильтруют через металлическое или капроновое ситечко, отстаивают в течение 10 мин. Надосадочную жидкость осторожно сливают, оставляя в стакане 3—5 мл осадка и к нему добавляют опять 50— 70 мл воды, снова отстаивают и сливают надосадочную жидкость. Так повторяют несколько раз, пока надосадочная жидкость не станет прозрачной. Затем ее сливают, осадок выливают на предметное стекло (или чашку Петри) и микроскопируют.

Методы флотации. При методах флотации (всплывания) используют насыщенные растворы солей с более высокой плотностью (1,18-1,50), чем яйца паразитических червей. В лабораторной практике из флотационных жидкостей наиболее часто применяют насыщенный раствор натрия хлорида, или поваренной соли (плотность 1,18-1,2 при комнатной температуре). Для приготовления такого раствора в кастрюлю или ведро с кипящей водой постепенно всыпают при помешивании поваренную соль до образования на дне небольшого осадка (380-400 г на 1 л воды). Горячий раствор фильтруют через несколько слоев марли в бутыль и применяют после охлаждения (на дне бутыли должен образоваться кристаллический осадок).

 

При диагностике некоторых гельминтозов используют также насыщенные растворы технической (гранулированной) селитры, или аммония нитрата с плотностью 1,32 (1500 г на 1 л кипящей воды), натриевой селитры, или натрия нитрата с плотностью 1,38 (соотношение соли и горячей воды 1:1), английской соли, или магния сульфата с плотностью 1,26-1,28 (920 г на 1 л горячей воды), натрия тиосульфата, или гипосульфита натрия, плотность которого колеблется от 1,38 до 1,40 (1750 г на 1 л кипящей воды), а также нитрата свикца с плотностью 1,5 (650 г на 1 л горячей воды). В последнем растворе всплывают яйца всех паразитических червей, включая яйца трематод, но деформируется оболочка яиц фасциол и парамфистомид.

Метод Дарлинга состоит в том, что берут пробу свежих фекалий массой 5 г, смешивают в стакане с водой в соотношении 1 : 10, через ситечко процеживают в пробирку, центрифугируют 2 мин при скорости 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют в равных частях глицерин и насыщенный раствор хлористого натрия. Чистой стеклянной палочкой взвесь тщательно размешивают и повторно центрифугируют. При наличии в пробе фекалий яиц гельминтов они всплывают на поверхность жидкости в центрифужной пробирке. Проволочной петлей берут 3—6 капель с поверхности взвеси, наносят на предметное стекло и микроскопируют.

Метод И. А. Щербовича предполагает в качестве флотационного раствора применять насыщенный раствор сульфата магния. Пробу фекалий из 3—5 г помещают в стаканчик и размешивают в воде в соотношении 1:10, отстаивают 5 мин, сливают, оставляя 10 мл осадка. Взвесь фильтруют в пробирку, центрифугируют в течение 2 минут со скоростью 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор сульфата магния и повторно центрифугируют. После этого с поверхностного слоя жидкости в пробирке проволочной петлей снимают 3—6 капель, помещают на предметное стекло и микроскопируют. Диагностируют аскаридатозы, стронгилятозы, эймериозы и другие паразитозы.