Дифференциально-диагностические среды

Кровяной МПА применяют для выявления гемолитических свойств бактерий. Дефибринированную кровь (5-10 %) стерильно добавляют к расплавленному и ос- туженному МПА, легким вращением колбочки равномерно смешивают и разли- вают в стерильные чашки Петри.

Среды Гисса. В пептонную воду (состоящую из дистиллированной воды, 0,5

% NaCl и 1 % пептона) добавляют 0,5 % углевода (сахар или многоатомный спирт) и 0,5 % индикатора Андрэдэ (0,5 г кислого фуксина, 16 мл 4 % NaOH, 100 мл дистиллированной воды). Среды с углеводами разливают в пробирки с «газо- вичками» (поплавками), опущенными в пробирки вверх дном. Стерилизуют среды с углеводами текучим паром дробно. Среды Гисса могут быть жидкие и полужид- кие (без газовок), содержащие 0,25 % агара. При ферментации того или иного уг- левода микробом, растущим в данной среде, образуется кислота, под действием которой восстанавливается цвет краски индикатора. Среда приобретает красный

Рисунок 43 - Среды Гисса: а - жидкая среда с углеводами и индикатором Ан- дреде; б - полужидкая среда с индикатором ВР: 1 - микроорганизмы не фер- ментируют углевод; 2 - микроорганизмы ферментируют углевод с образова- нием кислоты; 3 - микроорганизмы ферментируют углевод с образованием кислоты и газа.

цвет. Образовавшиеся при ферментации углевода газообразные продукты скапли- ваются в поплавках (рисунок 43).

Среда Эндо. В расплавленный МПА вносят 0,5-1 % лактозы и 0,5 % насыщенного спиртового раствора ос- новного фуксина, обесцвеченного добавлением по кап- лям 10 сернокислого натрия. Среду кипятят и разлива- ют в чашки Петри. Бактерии, сбраживающие лактозу, на этой среде растут в виде красных колоний, а лакто- зонегативные образуют светло-розовые коло-

нии(рисунок 44).

Среда Левина. Содержит питательный МПА,

Рисунок 44 – Среда Эндо.

ды: питательный МПА, лактоза, соли желчных ки-

слот, кальцинированная сода, бриллиантовый зеле- ный, йод. Индикатор среды нейтральный красный. Цвет розово-желтый. Лактозоположительные бак- терии образуют ярко розовые, брусничного цвета колонии, лактозоотрицательные – бесцветные серо- желтые колонии, среда вокруг которых желтеет (рисунок 46).

Висмут-сульфит агар (среда Вильсон-Блера).

Среда для сальмонелл и выделения анаэробов из

Рисунок 45 - Среда Ле- вина.

Рисунок 46 - Среда Пло- скирева.

объектов внешней среды (Cl. perfringens). Непрозрачная среда молочно-мутного цвета с зеленоватым оттенком. Дифференцирующее

действие этой среды зависит от способности бакте- рий образовывать сероводород, который в химиче- ской реакции с сульфитом висмута дает висмут черного цвета. В результате образуются колонии черного цвета. Бактерии, не образующие сероводо- род, вырастают в виде мелких бесцветных или зе-

леновато-коричневых колоний (рисунок 47).

Применяют также среды с химическими веще-

Рисунок 47 - Среда Виль- сон-Блера.

ствами, которые изменяют окраску в результате окислительно-восстановительных (редуцирующих) процессов, обусловленных ферментами бактерий. Для этого го- товят молоко с метиленовой синькой. Свежее обезжиренное коровье молоко под-

щелачивают двууглекислым натром до слабощелочной реакции по лакмусовой бумажке, добавляют 1 % водный раствор метиленовой синьки до голубого окра- шивания. Стерилизуют текучим паром дробно.