Метод Михина:
На фиксированный мазок наносят метиленовую синь на 5-7 минут и по- догревают до появления паров.
Краску смывают водой, высушивают мазок на воздухе и смотрят в свето- вой микроскоп под иммерсионной системой.
В результате бактериальная клетка окрашивается в синий, а сама капсула ста- новится бледно розовый цвет.
Метод Ольта:
На фиксированный мазок наносят свежий2 %раствор сафранина на 5 –7
минут.
Препарат промывают водой, высушивают на воздухе и просматривают в световой микроскоп под иммерсионной системой.
Бактериальная клетка окрашивается в кирпично-красный, капсула в желто- оранжевый цвет.
Жгутики
имеются только у подвижных
микроорганизмов. Они очень тонкие, т.к.
их величина за пределами разрешающей
способности светового микроскопа и они
плохо окрашивают, их редко красят. Обычно
исследуют на подвижность в живом
состоянии. На подвижность исследуют
микроорганизмы с опущенным конденсором
и затемненном полем зрения. Используют
метод висячей и раздав- ленной капли.
Рисунок 24 - Расположение жгутиков у бактерий.
Жгутики делят на монотрихи – один жгутик на одном конце клетки, лофот- рихи – несколько жгутиков на одном конце клетки, амфитрихи – жгутики на обо- их полюсах клетки и перитрихи – большое количество жгутиков по всей поверх- ности клетки (рисунок 24).
Метод раздавленной капли. На центр предметного стекла наносят каплю ис- следуемого материала и накрывают покровным стеклом так, чтобы не появились пузырьки воздуха. Проводят исследование подвижности микроорганизмов под
микроскопом.
Недостатком данного метода является
быстрое высыхание препара- та, поэтому
при длительном исследовании
рекомендуется смазывать края покровного стекла вазелином(рисунок 25).
Метод висячей капли. Используют спе- циальные толстые предметные стекла с лун- кой в центре. Края лунки смазывают вазели- ном и на центр покровного стекла помещают каплю исследуемого материала. Предметное стекло накладывают на покровное так, чтобы капля находилась в центре лунки. Затем его осторожно переворачивают, и капля свисает в центре герметически закрытой лунки (так капля защищена от высыхания). Недостатком
метода являются оптические дефекты из-за толщины стекла и наличия лунки.
Контрольные вопросы:
Рисунок 25 - Метод раздавлен- ной капли для определения под- вижности микробов.
Как окрашиваются споры методом Виртца.
Как делятся бактерии по расположению спор.
Как окрашиваются споры методом Пешкова.
Как окрашиваются капсулы методом Ольта.
Что такое капсулы бактерий.
Как окрашиваются капсулы методом Михина.
Морфология подвижных микробов.
Определение подвижности методами «раздавленной» и «висячей» капли.
Тема 1.4. Изучение морфологии грибов и актиномицетов.
Цель занятия: изучить морфологию грибов и актиномицетов, ознакомиться со строением грибов и их подразделением на низшие и высшие. Иметь понятие о способах размножения грибов, изучить видоизменения мицелия. Ознакомиться со
строением актиномицетов. Знать, что сближает актиномицеты с бактериями, а что с грибами.
Содержание:
Морфология грибов.
Морфология актиномицетов.
Грибы (Fungi) - бесхлорофильные низшие эукариотические организмы. Их используют в хлебопечении, пивоварении, приготовлении кондитерских изделий. Они обогащают почву гумусом, разлагая остатки растений, улучшают питание растений. Грибы используют как продуценты антибиотиков. Также они коррози- руют металл, разрушают пластик, картины, книги, приводят к порче продуктов питания и кормов, вызывают микозы и микотоксикозы животных, птиц и челове- ка.
Вегетативное
тело грибов - это грибница (мицелий),
состоящий из ветвящих- ся нитей (гифы).
По строению мицелия грибы делят на
низшие и высшие.
У низших грибов (фикомице- ты) мицелий (несептированный) представлен одной разветвленной гигантской клеткой с многочис- ленными ядрами без перегородок (септ).
У высших грибов в гифах ми- целия есть перегородки (септы), разделяющие их на отдельные од- ноядерные или многоядерные клетки, т.е. мицелий высших гри- бов септированный.
При бесполом размножении на концах некоторых гиф формируют-
Рисунок 26 - Образование спорангиев ми- целиальных грибов.
ся споры, которые называются конидиями, а гифы, несущие их, - конидиеносца- ми. У других грибов споры образуются внутри особых клеток, развивающихся на
Рисунок 27- Плодовые тела микроскопических грибов.
концах гиф. Эти клетки называются спорангиями, а гифы, несущие их, - споран- гиеносцами. Созревшие конидии осыпаются, а спорангии лопаются, и из них вы- сыпаются споры, которые в благоприятных условиях прорастают (рисунок 26).
При половом размножении сначала происходит слияние двух близлежащих клеток. Затем процесс размножения протекает у различных видов грибов по- разному. У одних образуется клетка, называемая зиготой, которая затем прораста- ет в новый мицелий; у других грибов образуется плодовое тело, внутри которого развиваются сумки - аски - со спорами. Попадая в благоприятные условия, споры созревают, сумка разрывается, и споры, прорастая, образуют новый мицелий.
Споры грибов очень устойчивы к внешним воздействиям, они могут в течение не- скольких лет сохранять жизнеспособность (рисунок 27).
У некоторых грибов существуют следующие видоизменения мицелия:
- тяжи, состоящие из параллельно идущих, сплетенных, присоединяющихся анастомозами грибов, не отличающихся друг от друга;
- ризоиды - корешкообразные выросты на мицелии гриба необходимые для прикрепления к субстрату и потребления из него питательных веществ;
- ризоморфыс темноокрашенным плотным наружным слоем гифов, нередко
имеющие внутри гифы более крупного диаметра с частично или полностью рас-
творенными перегородками между клетками, которые выполняют роль проводя- щих элементов, способствуют распространению гриба по субстрату, снабжению его питательными веществами;
-склероции-удлиненные,округлые уплотнения мицелия,могут сохранять свою жизнеспособность длительное время, а при прорастании дают мицелий;
- псевдопаренхима, или плектенхима, - это ложная ткань, из которой состоят плодовые тела, склероции. Эта ткань формируется путем более или менее плотно- го сплетения гифов.
Клетка гриба имеет оболочку, протоплазму, ядро и ряд включений. В отличие от бактерий она содержит истинное ядро, а от низших грибов (архимицетов) ее отличает наличие клеточной стенки, в состав которой входит целлюлоза и (или) хитин.
Молодые клетки яйцевидной формы, удлиненные в виде трубочки, зрелые - цилиндрические, при старении клетки могут иметь грушевидную, булавовидную, веретенообразную или амебовидную форму. Оболочка стенки гриба состоит из двух слоев - наружного (хитинового) и внутреннего, образованного из целлюлозы; пространство между ними заполнено полисахаридами.
Непосредственно к целлюлозной части стенки прилегает двухконтурная ци- топлазматическая мембрана, с которой находится в тесном контакте эндоплазма- тический ретикулум, часто гранулярный, составляющий основную часть цито- плазмы. В цитоплазме расположены одно или несколько ядер округлой, овальной или неправильной формы, окруженных собственной оболочкой с порами, и яд- рышко, содержащее в составе хромосом ДНК. В клетках могут накапливаться раз- личные продукты метаболизма грибов - антибиотики, ферменты, витамины, ток- сины и др.