50. Реакция агглютинации, механизм реакции и ингредиенты, способы по-становки и практическое применение.

Для идентификации видов,сероваров бактерий с помощью диагностическихэ агглютин.сывороток.

Реакция агглютинации - склеивание бактерий под влиянием спе­цифических антител. Роль АГ =корпускулярная частица.Реакция протекает в две фазы. В первой фазе происходит специфическое присоединение антител к поверхности клет­ки, во второй - образование хлопьев в присутствии электролита (хло­рида натрия). Видимая реакция происходит в том случае, если антите­ла имеют два активных центра, к каждому их них присоединяется анти­ген, и в результате образуется "решетка".

Методы постановки реакции агглютинации:

1) развернутая реакция агглютинации ставится в пробирках с пос­ледовательными разведениями сыворотки=колличественная реакция(титпр АТ)

2) реакция агглютинации на предметном стекле в капле сыворотки, разведенной 1:5 - 1:10; наступает в течение нескольких минут.(качественная реакция специфичны ли АГ?)

Для определения антигенной структуры микробов, выделенных из организма пациента, используют агглютинирующую сыворотку, полу­ченную из крови животного (кролика, барана), иммунизированного этими микробами. Титром диагностической агглютинирующей сыво­ротки называется наибольшее ее разведение, которое вызывает агг­лютинацию.

Если агглютинирующая сыворотка содержит антитела против Н-антигена, то подвижные бактерии склеиваются своими жгутиками, об­разуются рыхлые хлопья. Это крупнохлопчатая агглютинация, нас­тупающая быстро - в течение двух часов.

Сыворотка, содержащая О-агглютинины, вызывает мелкозернис­тую агглютинацию в течение 18-24 часов.

Агглютинирующие сыворотки, полученные путем иммунизации жи­вотных микробами, могут содержать антитела против родственных микробов, то есть являются поливалентными. Для повышения специ­фичности сывороток из них удаляют групповые антитела методом ад­сорбции по Кастелляни, с помощью групповых антигенов. Получен­ные сыворотки называют адсорбированными. Оставляя антитела толь­ко к одному антигену, получают монорецепторные сыворотки. С таки­ми сыворотками ставят реакцию агглютинации на стекле, которая в этом случае является окончательной, а не ориентировочной.

Для обнаружения антител в сыворотке крови пациента в качестве известного антигена используют убитые культуры микробов, так на­зываемые диагностикумы. При постановке серологического диагно­за учитывают диагностический титр сыворотки - для большинства заболеваний 1:100 или 1:200.

Агглютинация на стекле,нам нужно,ставится одним разведением,стекло на 2 квадрата. 1- капля изотонического раствора хлорида натрия,2-капля сыворотки :чистая культура+агглютинирующая сыворотка(иммунизацией кролика),вырабатываются АГ:адсорбируемые(монорецепторные=1АГ и поливалентные=несколько АГ) и неадсорбируемые и физ раствор (контроль) хлопья =специфичность АТ и АГ. после перемешивания ,стекло можно погреть .

Кроме специфической агглютинации мб спонтанная(без иммунной сыворотки),дают r-формы,не дающие гомогенности с изотоническим раствором,осаждаются в виде агрегатов.