- •Описать принцип микроскопии с тёмнопольным микроскопом.
- •Описать принцип микроскопии с люминесцентным микроскопом.
- •Описать методику обнаружения бактериофага в исследуемом материале.
- •Описать методику титрования бактериофага.
- •Определить dlm бактерий (по результату опыта).
- •Описать принцип и метод окраски по Грамму.
- •Как простерилизовать физ. Раствор?
- •Биологический метод контроля стерилизации.
- •Дать характеристику колоний, выросших на чашке с мпа, и указать ход дальнейших действий для выделения чистой культуры.
- •16. Как исследуют бактериологические характеристики воздуха в аптечном учреждении: аппарат для посева, объем исследуемого воздуха, методика.
- •19. Исследование лекарственного средства, стерилизуемого в процессе производства. Произвести учет посева для определения антимикробного действия лекарственного средства и указать дальнейшие действия.
- •20. Произвести учет посева лс, стерилизуемого в процессе производства. Сделать вывод.
- •21. Опишите метод испытания дистиллированной воды и инъекц р-ров на пирогенность.
- •22. Исследование лекарственного средства, не стерилизуемого в процессе производства. Количественное определение бактерий и грибов: изобразите в виде схемы.
- •29. Определение активности антибиотика методом диффузии в агар. Опишите методику посева и учета результатов
- •30. Опишите методику постановки развернутой реакции агглютинации и оцените результат
- •31. Опишите методику постановки и оцените результат рск
- •32. Назовите правила противоэпидемического режима и техники безопасности в бактериологической лаборатории
- •37. Посев материала на чашку с мпа для выделения чистой культуры
- •3 День - проверка чистоты культуры, выросшей на скошенном агаре, путём микроскопии мазков, окрашенных по Граму. При однородности исслед бак выделение чистой культуры можно считать законченным.
16. Как исследуют бактериологические характеристики воздуха в аптечном учреждении: аппарат для посева, объем исследуемого воздуха, методика.
Санитарно-бактериологич исслед воздуха вкл опред микробного числа воздуха и санитарно-показат микроорг. Методы микробиологич исслед воздуха подразделяются на седиментационные и аспирационные. Наиболее простым явл седиментационный метод Коха: стерильные чашки Петри с плотной пит средой открывают в местах отбора проб воздуха и выдерживают в течение 5-30мин, после чего закрывают и термостатируют. По кол-ву выросших колоний подсчитывают микробное число правилом Омелянского в соответствии с кот считают, что на поверхн пит среды площадью 100 см2 в теч 5 мин оседает столько микроорг, сколько их содержится в 10 л воздуха. Каждая микробная кл дает начало 1ой колонии. Зная кол-во выросших колоний и время экспозиции, вычисляют количество микробов, содержащихся в 1 м3 (1000 л) воздуха Аспирационные методы исслед воздуха основаны на фильтрации или аспирации (просасывании) его через специальные фильтры, жидкости, порошки, адсорбирующие микрофлоры. Для опред общего содержания бак в 1 куб. м отбор производят на 2% пит агар, разлитый в чашки по 12 - 15 мл. Для опред золотистого стафилококка испол желточно - солевой агар, для опред плесневых и дрожжевых грибов - среду Сабуро.
Методика исследования воздуха. Доставленные чашки с посевами на пит агаре и желточно - солевом агаре инкубируют в термостате при 37 с. C в течение 24 ч, посевы на желточно - солевом агаре дополнительно выдерживают еще 24 часа при комнатной температуре.
Посевы на среде Сабуро инкубируют при т 22 - 28 с. C 4 сут. Для опред общей бактериал обсемененности через 48 час посевы просматривают, подсчитывают кол-во выросших колоний и производят пересчет на 1 куб. м.
Для опред колич-ного содержания золотистого стафилококка просматривают посевы на желточно - солевом агаре после 48-ми часов инкубации, колонии, подозрительные на стафилококк, подсчитывают и проводят идентификацию . После идентификации производят пересчет полученных результатов на 1 куб. м воздуха.
17. Произвести оценку пригодности дистиллированной воды, предназначенной для изготовления инъекц р-ров и глазных капель, по результатам посевов в МПА и в среде Эндо.
1. Пробы дистил воды отбирают в стерильные флаконы в кол-ве 15-20 мл. Инъекц р-ры (до стерилизации) отбирают во вр их приготовления, но не позднее 1,5 ч и доставляют в лаб в тех же флаконах, в кот они будут подвергнуты стерилизации. Глаз капли доставляют в аптечной упаковке.
2. Опред кол-ва мезофильных аэробных и факультативно анаэробных бак в 1 мл воды. Исслед воду вносят по 1 мл в 2 стерильные чашки Петри, затем заливают растопленным МПА. После застывания агара чашки выдерживают сут при 37С и ещё сут при комнат т. После этого подсчитывают число выросших колоний, как на поверхности, так и внутри пит среды. При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках.
3. Опред наличия БГКП в 1 мл проводится след обр. Исслед материал в кол-ве 1 мл засевают 9 мл разведенной среды Эйкмана. Посевы выращивают при 37С в течение сут, затем высевают на среду Эндо и после сут инкубирования чашек при 37С отбирают на чашках подозрительные колонии бак и опред их принадлежность к БГКП. 4. Колич-ное опред БГКП проводится след обр. 1 мл исслед материала наливают в стерильную чашку Петри и заливают растопленной средой Эндо. После застывания среды её инкубируют при 37С в течение сут и учитывают кол-во типичных колоний.
Предельно допустимые кол-ва микроорг в 1мл: дистил вода, испол сразу же после перегонки - не более 15, испол после стерилизации для изготовления асептическим способом глаз капель - не более 3, р-ры для инъекций до стерилизации не позднее 1,5 ч после изготовления - не более 30. Наличие кишечной палочки, золотистого стафилококка, синегнойной палочки и протея в данной группе исслед материалов недопустимо. Инъекц р-ры и глазные капли после стерилизации доставляются для исследования в аптечной упаковке. Материалы этой группы д б стерильными.
18. Произвести оценку результата исследования смывов с рук персонала аптечного учреждения по посевам на среде Эндо и солевом бульоне.
Санитарно-микробиологич исслед предметов обихода и рук. для анализа микробной загрязненности столов, оборудования, аптечной посуды, полотенец, халатов, рук персонала испол тампонный метол и метод смывов. В 1м случае готовят ват тампоны, стерилиз их, погружают в пробирки с 2 мл 0,1% пептонной воды или изотонич р-ра хлорида натрия, при этом тампон не должен касаться поверхн жидкости, смачивают тампон непосредственно перед взятием проб. Для отбора проб с плоских крупных поверхностей (столы) испол трафареты из проволоки или жести, кот предварит стерилизуют фламбированием; затем накладывают их на поверхность стола, производят смыв влажным тампоном (салфеткой) с поверхности 100 см2, ограниченной трафаретом, тампон помещают в пробирку, добавляют еще 8 мл жидкости и тщательно прополаскивают тампон (салфетку) с послед отжимом его. Общую микробную загрязненность опред, засевая 1 мл смыва в глубину расплавлен МПА в чашке Петри, как это описано для опред микробного числа воды. Посевы выращивают сут при 37°C, подсчитывают кол-во выросших колоний и опред общую микробную загрязненность данного объекта. Для выявл дрожжей и грибов делают посев на сусло-агар или агар Сабуро. Смывы с рук работников аптек получают, тщательно протирая ладони, межпальц и подногтевые пространства влажным стерильным тампоном. Т к в этих случаях практич значение имеет не столько опред общей микробной загрязненности, сколько выявление фекальной загрязненности рук, недопустимой при работе с лп, то в пробирку со смывом заливают 5 мл среды Қесслер или Булира (для накопления Е. coli) и помещают в термостат при т 43°C. На след день при наличии роста делают пересев на дифференциально-диаг среду эндо, в случае поялв типичных темно-красных колоний производят микроскопию и ставят оксидазную пробу. На основании результатов этих тестов делают вывод о наличии кишеч палочки. Для обнаруж золотистого стафилококка засевают смыв петлей штиховым методов на чашки петри с желточно-солевым агаром, оценку св-в золот стафилококка, выращенного на этой среде, ведут по схеме. После инкубации в термостате опред наличие стафилококков. Колич-ные опред их не проводятся. Наличие БГКП и стафилококков не допускается.