1. Матеріали методичного забезпечення теми

1. Завдання для перевірки вихідного рівня знань, вмінь

1. Які існують групи коферментів

2. Відмінності коферментів від простетичних груп

3. Роль коферментів у каталізі

4. Кофермент на функція вітамінів

5. Структура найбільш поширених коферментів

6. Роль апоферментів у каталізі

7. Роль катіонів у каталізі

8. Хімізм реакцій, що каталізують амінотрансферази

1.2. Зміст лабораторної роботи

Лабораторна робота Дослідження ролі піридоксальфосфату у каталітичній активності амінотрансферази

Принцип методу. Під дією АлАТ внаслідок переамінування із аланіну утворюється піруват, який із 2,4-динітрофенілгідразоном у лужному середовищі дає забарвлений гідразон. Хід роботи. До 0,5 мл субстратно-буферної суміші додають 0,1 мл гомогената печінки і інкубують 30 хв при 37⁰С. Добавляють 0,5 мл розчину 2,4-динітрофенілгідразину і витримують 20 хв при кімнатній температурі. Добавляють5 мл 0,4 М NaOH і через 10 хв фотометрують при довжині хвилі 530 нм (зелений світлофільтр) у кюветі 10 мм.

Реактив	Контрольна проба	Дослідна проба
Субстратно-буферна суміш	0,5 мл	0,5 мл
Гомогенат печінки	0,1 мл	0,1 мл
Вода	0,1 мл	-
Розчин ПАЛФ	-	0,1 мл
2,4-динітрофенілгідразин	0,5 мл	0,5 мл
Розчин 0,4 М NaOH	5 мл	5 мл

Медико-біологічна оцінка отриманих результатів

У дослідній пробі виникає більш інтенсивне забарвлення, що свідчить про те, що:

а) піридоксальфосфат є коферментом аланінамінотрансферази;

б) у присутності піридоксальфосфату активність аланін амінотрансферази значно зростає, тобто кофермент відповідає за каталітичну активність складного ферменту

3. . Запитання для перевірки кінцевого рівня знань

1. Участь нікотинамідних коферментів у каталізі

2. Участь флавінових коферментів у каталізі

3. Участь піридоксалевих коферментів у каталізі

4. Коензим А. Принципи будови і участь у каталізі

5. Особливості будови коферментів оксидоредуктаз

6. Особливості будови коферментів трансфераз

1.4 Тестові завдання до теми (вибрати з тестових завдань до модульного контролю)

1.5 Теми для самостійної роботи студентів

1. Принципи коензимотерапії у клініці

Наступна тема № 5. Основні теорії біокаталізу. Кінетика каталізу. Методи якісного і кількісного визначення ферментів. 2 год

Тема № 5. Основні теорії біокаталізу. Кінетика каталізу. Методи якісного і кількісного визначення ферментів.

Лабораторна робота. Спостереження кінетики дії ліпази на жир молока.

Вплив жовчі на активність ліпази

Мета заняття:

Студент повинен знати:

• теорії і кінетику каталізу

• механізми утворення фермент-субстратного комплексу

• роль концентрації субстрату у визначенні активності ферменту

Студент повинен вміти:

- кількісно і якісно визначати активність ферментів у біологічних рідинах

- робити висновки про роль активаторів у каталізі

- оцінити дію ліпази на жир молока та вплив жовчі на активність ферменту.