Литература

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 545-557.

2. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 507-529.

3. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 597-609.

4. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Коби-лянська Л.І. та ін./ За ред. О.Я. Склярова. – К.: Здоров’я, 2002. – С. 275-280.

Занятие 2

Тема: Функции крови. Физико-химические свойства и химический состав крови. Буферные системы, механизм действия и роль в поддержании кислотно-щелочного состояния организма. Белки плазмы крови, их роль. Количественное определение общего белка в сыворотке крови.

Актуальность. Кровь - это жидкая ткань, состоящая из клеток (форменных элементов) и межклеточной жидкой среды - плазмы. Кровь выполняет транспортную, осморегуляторную, буферную, обезвреживающую, защитную, регуляторную, гомеостатическую и другие функции. Состав плазмы крови является зеркалом метаболизма - изменения концентрации метаболитов в клетках отображаются на их концентрации в крови; состав плазмы крови изменяется также при нарушении проницаемости клеточных мембран. В связи с этим, а также с доступностью проб крови для анализа, её исследование широко используется для диагностики заболеваний и контроля эффективности лечения. Количественное и качественное исследование белков плазмы, кроме специфической нозологической информации, даёт представление о состоянии белкового обмена в целом. Показатель концентрации водородных ионов в крови (рН) является одной из наиболее строгих химических констант организма. Он отражает состояние метаболических процессов, зависит от функционирования многих органов и систем. Нарушение кислотно-щелочного состояния крови наблюдается при многочисленных патологических процессах, заболеваниях и является причиной тяжёлых расстройств жизнедеятельности организма. Поэтому своевременная коррекция нарушений кислотно-щелочного состояния является необходимым компонентом терапевтических мероприятий.

Цель. Ознакомиться с функциями, физико-химическими свойствами крови; кислотно-щелочным состоянием и его основными показателями. Выучить буферные системы крови и механизм их действия; нарушение кислотно-щелочного состояния организма (ацидоз, алкалоз), его формы и виды. Сформировать представление о белковом составе плазмы крови, охарактеризовать белковые фракции и отдельные белки, их роль, нарушения и методы определения. Ознакомиться с методами количественного определения общего белка в сыворотке крови, отдельных фракций белков и их клинико-диагностическим значением.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ

1. Функции крови в жизнедеятельности организма.

2. Физико-химические свойства крови, сыворотки, лимфы: рН, осмотическое и онкотическое давление, относительная плотность, вязкость.

3. Кислотно-щелочное состояние крови, его регуляция. Основные показатели, отражающие его нарушение. Современные методы определения кислотно-щелочного состояния крови.

4. Буферные системы крови. Их роль в поддержании кислотно-щелочного состояния.

5. Ацидоз: виды, причины, механизмы развития.

6. Алкалоз: виды, причины, механизмы развития.

7. Белки крови: содержание, функции, изменения содержания при патологических состояниях.

8. Основные фракции белков плазмы крови. Методы исследования.

9. Альбумины, физико-химические свойства, роль.

10. Глобулины, физико-химические свойства, роль.

11. Иммуноглобулины крови, структура, функции.

12. Гипер-, гипо-, дис- и парапротеинемии, причины возникновения.

13. Белки острой фазы. Клинико-диагностическое значение определения.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1. Какое из перечисленных значений рН является нормальным для артериальной крови? А. 7,25-7,31. В. 7,40-7,55. С. 7,35-7,45. D. 6,59-7,0. Е. 4,8-5,7.

2. Какими механизмами обеспечивается постоянство рН крови?

А. Выведением СО2 лёгкими. В. Буферными системами. С. Секрецией ионов водорода почками.

D. Метаболизмом веществ. Е. Всеми перечисленными.

3. Какая причина развития метаболического ацидоза?

А. Увеличение продукции, снижение окисления и ресинтеза кетоновых тел.

В. Увеличение продукции, снижение окисления и ресинтеза лактата.

С. Потеря оснований.

D. Неэффективная секреция ионов водорода, задержка кислот.

Е. Всё перечисленное.

4. Какая причина развития метаболического алкалоза?

А. Некомпенсированные потери ионов водорода, «нелетучих» кислот. В. Потеря калия. С. Задержка оснований.

D. Введение оснований. Е. Всё перечисленное.

5. Значительные потери желудочного сока вследствие рвоты обуславливают развитие:

А. Дыхательного алкалоза. В. Метаболического алкалоза.

С. Дыхательного ацидоза. D. Метаболического ацидоза.

6. Значительные нарушения кровообращения вследствие шока обуславливают развитие:

А. Метаболического ацидоза. В. Дыхательного ацидоза.

С. Дыхательного алкалоза. D. Метаболического алкалоза.

7. Угнетение дыхательного центра головного мозга наркотическими препаратами приводит к:

А. Дыхательному ацидозу. В. Метаболическому ацидозу.	D. Дыхательному алкалозу. Е. Метаболическому алкалозу.
С. Гипергликемии.

8. Значение рН крови изменилось у больного сахарным диабетом до 7,3 ммоль/л. Компоненты какой буферной системы используются для диагностики нарушений кислотно-щелочного равновесия?

А. Фосфатной.	С. Оксигемоглобиновой.	Е. Белковой.
В. Бикарбонатной.	D. Гемоглобиновой.

9. У пациента наблюдается закупорка мокротой дыхательных путей. Какое нарушение кислотно-щелочного состояния можно определить в крови?

А. Респираторный ацидоз. В. Метаболический ацидоз.	D. Респираторный алкалоз. Е. Метаболический алкалоз.
С. Кислотно-щелочное состояние в норме.

10. Больному с тяжёлой травмой подключили аппарат искусственного дыхания. После повторных определений показателей кислотно-щелочного состояния выявили снижение в крови содержания диоксида углерода и повышение его выведения. Для какого нарушения кислотно-щелочного состояния характерны такие изменения?

А. Респираторного алкалоза.	С. Метаболического алкалоза.
В. Респираторного ацидоза.	D. Метаболического ацидоза.

11. Назовите буферную систему крови, которой принадлежит наибольшее значение в регуляции кислотно-щелочного гомеостаза?

А. Фосфатная. В. Система белков плазмы крови.

С. Гемоглобиновая. D. Бикарбонатная.

12. Какая буферная система крови выполняет важную роль в поддержании рН мочи?

А. Фосфатная. В. Гемоглобиновая. С. Гидрокарбонатная. D. Белковая.

13. Какие физико-химические свойства крови обеспечивают имеющиеся в ней электролиты?

А. Онкотическое давление. В. Активную реакцию крови.

С. СОЭ. D. Осмотическое давление.

Е. Вязкость крови.

14. При обследовании больного выявлена гипергликемия, глюкозурия, гиперкетонемия и кетонурия, полиурия. Какой тип кислотно-щелочного состояния наблюдается в данном случае?

А. Респираторный алкалоз. В. Метаболический ацидоз. С. Метаболический алкалоз.

D. Респираторный ацидоз. Е. Кислотно-щелочное состояние не нарушено.

15. Человек в состоянии покоя принуждает себя дышать часто и глубоко на протяжении 3-4 мин. Как это повлияет на кислотно-щелочное состояние организма?

А. Метаболический ацидоз. В. Метаболический алкалоз. С. Респираторный алкалоз.

D. Респираторный ацидоз. Е. Кислотно-щелочное состояние не изменится.

16. Какой белок плазмы крови связывает и транспортирует медь?

А. Трансферрин.	С. С-реактивный белок.	Е. Калликреин.
В. Брадикинин.	D. Церулоплазмин.

17. В плазме крови пациента содержание общего белка находится в пределах нормы. Какие из приведенных показателей (г/л) характеризуют физиологическую норму? А. 35-45. В. 50-60. С. 55-70. D. 65-85. Е. 85-95.

18. Какая фракция глобулинов крови обеспечивает гуморальный иммунитет, выполняя роль антител?

А. α1-Глобулины.	С. γ-Глобулины.	Е. α1-Макроглобулин.
В. β-Глобулины.	D. Криоглобулин.

19. У больного, который перенёс гепатит С и постоянно употреблял алкоголь, появились признаки цирроза печени с асцитом и отёками нижних конечностей. Какие изменения в составе крови сыграли основную роль в развитии отёков?

А. Гипоглобулинемия.	С. Гипокалиемия.	Е. Гипохолестеринемия.
В. Гипоальбуминемия.	D. Гипогликемия.

20. На каких физико-химических свойствах белков базируется метод определения электрофоретического спектра белков крови?

А. Вязкость. В. Наличие заряда.	D. Гидрофильность и способность к набуханию.
С. Неспособность к денатурации.	Е. Оптическая активность

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Количественное определение общего белка в сыворотке крови

биуретовым методом

Задание 1. Определить содержание общего белка в сыворотке крови.

Принцип. Белок реагирует в щелочной среде с раствором сульфата меди, который содержит калий-натрий тартрат, NaI и KI (биуретовый реагент), формируя фиолетово-голубой комплекс. Оптическая плотность этого комплекса пропорциональна концентрации белка в пробе.

Ход работы. В опытную пробу внести 25 мкл сыворотки крови (без гемолиза), 1 мл биуретового реагента, который содержит: 15 ммоль/л калий-натрий тартрата, 100 ммоль/л йодида натрия, 15 ммоль/л йодида калия и 5 ммоль/л сульфата меди. К стандартной пробе прибавить 25 мкл стандарта общего белка (70 г/л) и 1 мл биуретового реагента. В третью пробирку внести 1 мл биуретового реагента. Все пробирки хорошо перемешать и инкубировать на протяжении 15 мин при температуре 30-37°С. Оставить на 5 мин при комнатной температуре. Измерить оптическую плотность пробы и стандарта против биуретового реагента при 540 нм. Концентрацию общего белка (Х) в г/л рассчитать по формуле: Х=(Сст×Апр)/ Аст, где Сст - концентрация общего белка в стандартной пробе (г/л); Апр - оптическая плотность пробы; Аст - оптическая плотность стандартной пробы.

Клинико-диагностическое значение. Содержание общего белка в плазме крови взрослых людей составляет 65-85 г/л; в плазме крови за счет фибриногена белка содержится на 2-4 г/л больше, чем в сыворотке. У новорожденных количество белков плазмы крови составляет 50-60 г/л и на протяжении первого месяца немного снижается, а в три года достигает уровня взрослых людей. Увеличение или уменьшение содержания общего белка плазмы крови и отдельных фракций может быть обусловлено многими причинами. Эти изменения не являются специфическими, а отображают общий патологический процесс (воспаление, некроз, новообразование), динамику, тяжесть заболевания. С их помощью можно оценить эффективность лечения. Изменения содержания белка могут проявляться в виде гипер, гипо- и диспротеинемии. Гипопротеинемия наблюдается при недостаточном поступлении белков в организм; недостаточности переваривания и всасывания пищевых белков; нарушении синтеза белков в печени; заболеваниях почек с нефротическим синдромом. Гиперпротеинемия наблюдается при нарушении гемодинамики и сгущении крови, потери жидкости при дегидратациях (диарея, рвота, несахарный диабет), в первые дни тяжёлых ожогов, в послеоперационный период и др. Заслуживает внимания не только гипо- или гиперпротеинемия, а также такие изменения как диспротеинемия (соотношение альбуминов и глобулинов изменяется при постоянном содержании общего белка) и парапротеинемия (появление аномальных белков – С-реактивный белок, криоглобулин) при острых инфекционных заболеваниях, воспалительных процессах и др.