Диагностика частной патологии методом пцр

В данном разделе  будут рассмотрены только некоторые виды патологии, при  которых  метод  ПЦР является  основой  диагностики  и критерием эффективности лечения, а также имеются доступные, стандартизованные, коммерческие тест-системы.

ВИЧ-инфекция

Этиологическим  фактором  ВИЧ-инфекции  являются вирусы HIV-1  и HIV-2 (от  англ. Human Immunodeficiency Viruses) из семейства Retroviridae. Патогенез ВИЧ-инфекции  заключен в инфицировании  вирусом клеток  с фенотипом  CD-4,  присущий  Т-лифоцитам  хелперам и некоторым другим клеткам организма человека.  Прямое цитопатическое воздействие, оказываемое  вирусом иммунодефицита на  указанные клетки,  в конечном итоге приводит  к летальному исходу за счет активации оппортунистических инфекций или развития опухолей. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции проводится в трёх направлениях:

1. серологическая  диагностика маркеров вируса методами  иммуноферментного анализа и иммуноблотинга, заключающаяся в определении  в сыворотки крови антигенов и антител  против ВИЧ.

2. определение вирусной НК (провирусной-ДНК  или РНК) методом ПЦР, как в крови, так и в  клетках крови.

3. исследование  иммунного статуса  (количественная оценка  CD-4 лимфоцитов), которая наиболее адекватно осуществляется методом  проточной цитофлюориметрии.

Особо необходимо отметить значение ПЦР в диагностике ВИЧ-инфекции у детей первого года жизни. Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции у детей этого возраста в принципе невозможна без применения ПЦР. Это обусловлено тем, что ребёнок, родившийся от ВИЧ-инфицированной  матери обязательно имеет  антитела к  вирусу  иммунодефицита. Различить материнские и собственные антитела к ВИЧ не представляется возможным. У неинфицированного ребёнка данные антитела элиминируются под  влиянием собственной иммунной системой  к возрасту 6-9  месяцев, хотя в отдельных случаях могут циркулировать до 18 месяцев жизни, но не более  этого срока.

Необходимо отметить, что обследование  методом ПЦР имеет смысл только при полном отказе от грудного вскармливания ребёнка ВИЧ-позитивной матерью с момента рождения, т.к. риск заражения довольно высок и составляет около 5%.

Таким образом, ПЦР позволяет проводить дифференциальную диагностику ВИЧ-статуса у детей раннего возраста. Так, если имеет место положительный результат ПЦР на НК вируса  иммунодефицита  в первые 48 часов жизни, то ВИЧ-инфицирование произошло in utero. Если  имеет место отрицательный результат ПЦР в первые 48 часов, но  становится положительным в возрасте 7 – 14 дней жизни, то инфицирование произошло in trapartum.

В настоящее время ПЦР позволяет осуществлять не только диагностику, но и мониторинг лечения ВИЧ-инфекции путем определения концентрации  РНК в плазме, а также выявления резистентных  к химиотерапии штаммов вируса иммунодефицита. Определение  “вирусной нагрузки” в плазме крови является наилучшим  прогностическим критерием  течения ВИЧ-инфекции и оценки эффективности антиретровирусной терапии.

Таким образом, в настоящее время метод  ПЦР является  основным лабораторным критерием диагностики, прогноза и оценки эффективности лечения  ВИЧ-инфекции.