- •1.Основные компоненты химического состава бактериальной клетки, их функции.
- •2. Питание бактерий. Особенности питания бактерий
- •3. Механизмы питания бактерий.
- •4. Типы питания микробов.
- •5. Общие требования к искусственным питательным средам.
- •6. Классификация питательных сред по происхождению, по консистенции, по составу и назначению.
- •7. Простые питательные среды, их приготовление и стерилизация.
- •8. Специальные питательные среды, их примеры. Элективные питательные среды, их примеры.
- •9. Дифференциально-диагностические среды, их примеры.
- •10. Типы биологического окисления микробов. Аэробный тип биологического окисления, признаки, присущие ему.
- •12. Брожение. Учёный, открывший микробную природу брожения. Виды брожения.
- •13. Классификация микробов по типу биологического окисления. Примеры.
- •15. Рост и размножение бактерий, скорость и фазы размножения бактерий.
- •16. Методы культивирования и характер роста аэробов и анаэробов.
- •17. Выделение чистой культуры бактерий.
- •18. Пигменты микробов. Продукция микробами ароматических веществ, тепловой и световой энергии.
- •19. Ферменты микробов, их классификация.
- •22. Классификация микробов в зависимости от температуры, при которой они могут размножаться.
- •23. Понятие о стерилизации, дезинфекции, асептике, антисептике.
- •24. Стерилизация сухим жаром
- •25. Стерилизация паром под давлением.
- •26. Дробные методы стерилизации
- •27. Методы частичного обеспложивания.
- •28. Методы контроля стерилизации.
- •29. Дезинфицирующие вещества, механизм их действия. Консерванты.
- •30. Экология микробов. Микрофлора воды, воздуха, почвы. Роль микробов в круговороте веществ в природе.
- •10) Санитарно-показательные микроорганизмы. Какие патогенные микроорганизмы могут длительно сохраняться в почве?
- •31. Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах. Санитарнопоказательные микроорганизмы для почвы, воды, воздуха.
- •32. Микробиологические исследования в аптечных учреждениях: объекты, отбор проб, методы исследования. Какие показатели определяются?
- •33. Источники и пути загрязнения микробами лекарственного растительного сырья. Правила хранения.
- •5. Правила хранения лекарственного сырья. Чем опасно микробное обсеменение лекарств?
- •34. Исследование лекарственных средств, стерилизуемых в процессе производства. Ход исследования, оценка результатов.
- •35. Предварительное определение антимикробной активности лекарственных средств: как проводится, оценка результатов
- •36. Исследования лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства: ход исследования. Определение общего количества бактерий и грибов.
- •38. Антибиотики и химиотерапевтические препараты
- •3. Что такое химиотерапевтический индекс, напишите его формулу, каким он должен быть?
- •9. Классификация антибиотиков по происхождению, химическому составу, по спектру действия.
- •10. Механизм действия антибиотиков: мишени (точки приложения антибиотиков различных групп).
- •39. Побочные явления при антибиотикотерапии.
- •40. Лекарственная устойчивость микробов
- •41. Бактериофагия.
- •4. Как обнаружить действие бактериофага на бактерии в жидкой и на плотной питательной среде? Как будет выглядеть положительный результат?
- •5. Что такое титр бактериофага? Как его определяют и обозначают?
- •6. Что такое умеренный бактериофаг. Опишите взаимодействие умеренного бактериофага с бактериальной клеткой.
- •42. Генетика микроорганизмов. Особенности структуры генома прокариотов.
- •43. Внехромосомные факторы наследственности.
- •44. Формы изменчивости микроорганизмов.
- •45. Применение генетических методов в диагностике инфекционных заболеваний.
- •47. Геномная инженерия: методы, достижения.
- •48. Значение изменчивости микроорганизмов для практической медицины.
36. Исследования лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства: ход исследования. Определение общего количества бактерий и грибов.
В отношении лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства, проводится испытание на микробиологическую чистоту. Это испытание включает в себя количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, а также выявление определённых видов микроорганизмов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах. Испытание проводят в асептических условиях. Лекарственные средства, обладающие антимикробным действием, и консерванты, входящие в состав некоторых лекарственных средств, могут подавлять рост отдельных видов микроорганизмов при проведении испытаний. Во избежание неправильной оценки результатов испытания определяют действие лекарственного средства в отношении тест-микробов. Для испытания антимикробного действия лекарственного средства, не стерилизуемого в процессе производства, применяют тест-микробы: B.subtilis, B.cereus, E.coli, S.aureus, Salmonella abony, Candida albicans, Aspergillus. Предварительно готовят разведения лекарственного средства: 1:10, 1:50, 1:100, 1:500, 1:1000. В пробирки с питательными средами вносят по 1 мл каждого разведения, в контрольные пробирки – по 1 мл стерильной дистиллированной воды. Затем во все пробирки вносят по 0,1 мл микробной взвеси тест-штамма. При обнаружении антимикробного действия лекарственного средства устраняют его и после этого производят посев на микробиологическую чистоту. При отсутствии антимикробного действия производят прямой посев. Количественное определение бактерий и грибов проводят двухслойным агаровым методом в чашках Петри.
37. Выявление и идентификация микробов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах: ход исследования, оценка результатов.
Выявление и идентификация видов микроорганизмов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах: бактерий семейства Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus
Выявление и идентификация бактерий семейства Enterobacteriaceae. Образец испытуемого лекарственного препарата в количестве 10 мл вносят в 100 мл лактозного бульона, перемешивают и инкубируют при 30-35ºС в течение 2-5 часов. Затем из этой смеси 10 мл переносят в 100 мл среды обогащения. Оставшуюся смесь в лактозном бульоне оставляют в холодильнике. Посев в среде обогащения инкубируют при 30-35ºС в течение 18-24 часов. При отсутствии роста считают, что в препарате не содержатся бактерии семейства Enterobacteriaceae. При наличии роста исследование продолжают. Определяют следующие показатели: а) наличие видов Salmonella; б) наличие Escherichia coli; в) количество энтеробактерий (кроме Salmonella и Escherichia coli). Испытание на виды Salmonella проводят путём высевания из среды обогащения на чашки с висмут-сульфит агаром. На этой среде Salmonella образуют чёрные колонии с металлическим блеском, при этом участок среды под колонией прокрашивается в чёрный цвет. Подозрительные колонии микроскопируют, отсевают на среду Олькеницкого и ставят тест на цитохромоксидазу. Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом цитохромоксидазой, не ферментирующие сахарозу и лактозу и выделяющие сероводород, считают, что лекарственное средство контаминировано (заражено) бактериями рода Salmonella.
Испытание на Escherichia coli проводят путём высева из среды обогащения на чашку со средой Эндо. Подозрительные колонии красного цвета микроскопируют и при наличии грамотрицательных палочек делают пересев в пробирке с цитратным агаром Симмонса, на котором определяют утилизацию цитрата натрия по изменению цвета среды с зелёного на синий. Наличие индола определяют путём посева в питательный бульон. Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом цитохромоксидазой, не утилизирующие цитрат натрия и образующие индол, считают, что лекарственное средство контаминировано Escherichia coli.
Количественное определение энтеробактерий (кроме Salmonella и Escherichia coli). Смесь в лактозном бульоне (из холодильника) в объёме 10 мл, 1 и 0,1 мл (что соответствует 1,0 и 0,1 г и 0,01 г препарата) засевают в среду обогащения, инкубируют при 30-35ºС в течение 18-24 ч. В случае роста делают пересев на чашку со средой Эндо и по появлению типичных колоний грамотрицательных бактерий устанавливают наличие энтеробактерий в определённом объёме препарата.
Выявление и идентификация Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus. Образец в количестве 10 мл вносят в 100 мл среды обогащения, перемешивают и инкубируют при 30-35ºС в течение 24-48 часов. При наличии роста пересевают на чашку со средой для выявления пиоцианина и на чашку среды с маннитом. После инкубации в термостате отбирают подозрительные колонии. Идентифицируют Pseudomonas aeruginosa по морфологии (грамотрицательные неспорообразующие палочки), по специфическому запаху и сине-зелёному пигменту, наличию фермента цитохромоксидазы. Staphylococcus aureus идентифицируют по морфологии (грамположительные кокки), по сбраживанию маннита в анаэробных условиях, по реакции плазмокоагуляции.