819

По результатам исследования видно, что фация сыворотки крови кроликов под номерами 2 и 7 представлена аморфными телами и единичными кристаллами (ИС=1), (К=1); под номерами 1, 3, 5, 6 помимо ранее указанных, присутствуют дендритные компоненты (ИС=2), (К=2 у 3,5,6; К=1 у 1); под номером 4 на большей части присутствовали дендритные структуры и одиночные кристаллы (ИС=3), (К=3). У кроликов под номерами 1 и 2 были едва заметные при микроскопии элементы текстуры (Т=1). Текстура фации кроликов номер 4,5,6 хорошо различима при микроскопии (Т=2), кролика номер 3 хорошо визуализируется даже без использования микроскопа (Т=3). Все элементы фации кроликов номер 1,5,6 имеют начальные признаки разрушения, но деструктивные изменения текстуры не наблюдаются (СДФ=1), а у остальных кроликов визуализируются признаки разрушения, изменения структуры (СДФ=2). Краевая зона у кролика №1 выраженная в сочетании с наличием «разломов» (Кз=4); соотношение «ширина краевой зоны и радиуса фации» у кроликов № 2,3,4 превышает 1 к 3 (Кз=3); у фации кроликов № 5,6 при микроскопии по всему периметру микропрепарата отмечается наличие выраженной краевой зоны (Кз=2). Большинство элементов фации кроликов 1,2,3 структурированы, ориентация элементов подчиняется определенной закономерности почти по всему полю зрения (R=4); число сгруппированных в ячейки структур от 75 до 100% от общего количества, очень четко выражена дробность, зернистость картины, присутствуют разломы картины так же и у 7 кролика (С=5). Все элементы фаций кролика №7 четко структурированы; деление на краевую, промежуточную и центральную зоны четко просматриваются (R=5). Элементы фации кроликов № 4,5,6 в значительном числе структурированы, внутри этих зон просматривается правильно расположение и равномерность расстояний между отдельными образованиями (R=3). Так же у них в фации число сгруппированных в ячейки структур от 75 до 100% от общего количества, очень четко выражена дробность, зернистость картины (С=4). При малом увеличении микроскопа, в фации кроликов № 1,2,6, выделение зон неотчетливое, незначительные признаки зонализации (Z=1). А в фациях кроликов 3,4,5 наличие зон четко определяется при малом увеличение микроскопа (Z=2). Индекс хаотичности у кроликов № 1 и 5 был равен 0,1; кроликов 3 и 4 - 0,2; кролика №3 – 0,18, №6 – 0,125. Показатели индекса хаотичности, краевой зоны, текстуры и выраженности зон кристаллизации в фации кролика №7 определить не удалось из-за гемолиза сыворотки крови [2, 3].

На основе проделанных нами опытов, можно утверждать, что:

1.кристаллография в ветеринарии малоизучена;

2.методика биокристаллографии требует усовершенствований;

3. кристаллограмма здорового кролика отличается от кристаллограммы кролика №2 на два показателя; кроликов №№ 3, 5, 6 на шесть показателей и кролика №4 на все девять показателей, что коррелирует с результатами биохимического анализа сыворотки крови и исследованиями фекалий.

Литература

1.Бузоверя М.Э., Шишпор И.В., Шатохина С.Н. с соавт. Морфометрический анализ фаций сыворотки крови // Клиническая лабораторная диагностика. - 2003. - №9. - С. 22-23.

2.Мартусевич А.К. Дегидратационная структуризация биологических жидкостей в норме

ипри паразитозах: дисс. … докт. биол. наук. Киров, 2013. 350 с.

3.Яхно Т. А., Яхно В. Г. Основы структурной эволюции высыхающих капель биологических жидкостей // Журнал технической физики. 2009.-№ 79 (8). – С. 133 – 141.

4.Wikipedia.ru [электронный ресурс].

311

УДК 619:611

Е.В. Ожигова – студентка 3 курса; С.В. Седегов – научный руководитель, кандидат ветеринарных наук,

ФГБОУ ВО Пермская ГСХА, г. Пермь, Россия

МОНИТОРИНГ ОССИФИКАЦИИ ПОЗВОНКОВ СОБАКИ ПО СРЕДСТВАМ ЦИФРОВОЙ РЕНТГЕНОГРАФИИ

Аннотация. Проведена цифровая рентгенография хвостовых позвонков собак. Выявлены закономерности развития костной ткани у животных разных возрастов. Определены критерии оценки оссификации нозвонков по средствам цифровой рентгенографии.

Ключевые слова: собаки, цифровая рентгенография, оптическая плотность, пиксель, хвостовые позвонки, минеральный состав.

Рентгенография -это диагностический метод исследования животных с помощью рентгеновских лучей. Получение изображения основано на ослаблении рентгеновского излучения при его прохождении через различные ткани с последующей регистрацией его на рентгеночувствительную плѐнку. Современное цифровое рентгенографическое исследование позволяет ветеринарному специалисту выявить не только патологии в строении твердых и мягких тканей, но и провести точные расчѐты [1, 2, 5].

Для получения рентгенограммы используют одно из основных свойств рентгеновского излучения - проникать через различные среды и ткани организма и поглощаться ими в различной степени в зависимости от их физико-химических свойств. Единицу площади цифрового изображения называют пикселем. Каждый пиксель имеет на матрице свои пространственные координаты и значение плотно-

сти [2].

Известно, что костная ткань существенно плотнее окружающих мягких тканей. В состав кости входят как органические, так и неорганические вещества кристаллической природы. Минеральные вещества, состоящие преимущественно из солей кальция и фосфора, имеют высочайший атомный вес, который обуславливает существенное поглощение рентгеновских лучей костной тканью. Таким образом, рентгеновская картина кости - это изображение минерального остова кости, представленного комплексным изображением компактного и губчатого вещества и называется «скелетом кости»[7, 9].

Хвостовые позвонки развиваются по энхондральному типу оссификаци которая происходит в так называемых вторичных костях,проходящих соединительнотканную, хрящевую и костную стадии. В данном процессе выделяют несколько этапов. Эмбриональный период: формирование хрящевой модели, перихондральное окостенение (возникновение первичных точек окостенения от диафиза к эпифизам трубчатых костей) [3]. Между эпифизами идиафизами сохраняются зоны, сформированные гиалиновым хрящом (эпифизарные пластинки), благодарякоторым кость растѐт в длину.

После постэмбрионального периода до 4 - 5 месяцев: активнаяоссификация костей. Взрослое животное: окончены все процессы окостенения. С возрастом

312

соотношение органических (оссеин) и неорганических веществ (мин. соли) в кости меняется. Молодость- 1:1; зрелость- 1:2; Старость- 1:7; (кости твѐрдые, хруп-

кие)[6].

В медицинской практике наиболее достоверную информацию о минеральной плотности костной ткани дает компьютерный томограф, на рентген снимке данный показатель определяют визуально, что может предоставлять субъективные данные [3, 6] В настоящее время ветеринарные врачи используют цифровую рентгенографию, которая обладает широким спектром диагностических возможностей. Одной из них является определение суммарной рентгеновской плотности исследуемого объекта, которая может быть использована для мониторинга оссификации скелетных структур в процессе развития организма [3]. В изученной нами научной литературе отсутствует информация о возможном применении данного метода в ветеринарной практике, что говорит об актуальности нашего исследования.

Целью нашей работы явилось изучение возможности использования цифровой рентгенографии для мониторинга оссификации скелета собаки на примере хвостовых позвонков.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1)Определить концентрацию кальция и фосфора в сыворотке крови собак для исключения из опыта животных с нарушением минерального обмена.

2)Провести количественный анализ содержания кальция и фосфора в хвостовых позвонках собак.

3)Провести рентгенографические исследования на группе собак для вычисления суммационной рентгеновской плотности хвостовых позвонков.

4)Выявить закономерности изменения суммационной рентгеновской плотности хвостовых позвонков у собак различных возрастов.

Материалы и методы.Исследование проводили на базе учебно-научного центра «Ветлайн» при ФГБОУ ВО Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова в период с 1 сентября 2015 по 1января 2016 года.

Исследование проводилось на группе из 10 разновозрастных собак (таблица 1). На первом этапе каждой собакепроводился забор венозной крови производился из вены предплечья (Venacephalica) с помощью стерильной одноразовой инъекционной иглы типа "Луер" (0,9 x 40 мм) и стерильной вакуумной пробирки. Свежую венозную кровь отстаивали при комнатной температуре 30 – 60 минут, после чего еѐ центрифугировали 10 минут со скоростью 1500 оборотов в минуту. Отцентрифугированную сыворотку собирали с помощью дозатора NichiryoLeв стерильную микропробирку. Анализ на содержание Са и Рв сыворотке крови проводился наСТАТФАКС 4500. Животные с нарушением минерального обмена из исследования исключались. После того, как у каждого из пациентов был установлен нормальный уровень кальция (Ca 2,3-2,8 ммоль\л) и фосфора (Р 0,7-1,8 ммоль\л) им проводилась цифровая рентгенография хвостового отдела позвоночника. Съѐмку осуществляли рентгеновским аппаратом ORANGE-1040HF в вен- тро-дорсальной и латеро-латеральной проекциях. Использовали один режим съѐмки. Цифровое изображение получали применяя систему компьютерной радиографии FireCRFlash и монитор с высоким разрешением экрана фирмы DELL.

313

На следующем этапе проводился анализ суммарной рентгеновской плотности15го и 16го хвостового позвонка при помощи программного обеспечения QuantorVetFlash. Промеры делали на эпифизах позвонков (по одной точке измерения на каждом), диафизе (одна точка измерения) и от верхнего края краниального эпифиза до нижнего края каудального эпифиза (вычисление средней плотности позвонка) (рисунок 1). Результаты исследования рассчитывались, анализировались и сохранялись в памяти персонального компьютера.Количественные измерения указаны в таблице 1

Рисунок 1.

А) точки промера эпифизов и диафиза

Б) вычисление средней плотности позвонка

Таблица

Сравнительная таблица измерения суммарной рентгеновской плотности позвонков и концентрации кальция и фосфора сыворотки крови у группы собак

Одновременно нами был произведѐн количественный анализ содержания кальция и фосфора в эпифизах и диафизе 15 и 16 позвонков у 5 собак, подвергшихся эутаназии по причине несвязанных с темой данного исследования. Для

314

в диафизе кости на 25% меньше чем в эпифизах хвостового позвонка, а минерализация краниального эпифиза на 5% больше каудального. Данные результаты подтверждают проведенные исследования на цифровой рентгенографии, что говорит о возможности применения данного способа диагностики.

Подводя итог, следует отметить огромный потенциал цифровой рентгенографии, который позволяет ветеринарным специалистам изучать не только морфологические особенности строения опорно-двигательного аппарата собаки, но и проводить мониторинг оссификации костяка. Данный неинвазивный диагностический метод может быть использован как для выявления отклонений развития кости от возрастной нормы, так и для примерного определения возраста пациента (при условии отсутствия у него нарушения минерального обмена).

Литература

1.Бегунец В.П. Сравнительная оценка методов рентгенографии и пальпации последних хвостовых позвонков при диагностике остеодистрофии у крупного рогатого скота//Профилактика

илечение заболеваний с.-х. животных на юге Украины. -Одесса, 1968. -176 с.

2.Белопольский В.А. и др. Практикум по курсу «Ветеринарная рентгенология». -Омск: ИВМ ОмГАУ, 2004.- 153с.

3.Воккен Г.Г. Некоторые закономерности дифференциации костного скелета млекопитающих: Дис..д. б. н. -Л.: ЛВИ, 1949.- 75с.

4.Домрачев Г.В. К вопросу о значении рентгенологии в ветеринарии//Вет.-зоотехн. вестник. -1930.- 32 с.

5.Козловская Н.Г. Диагностические исследования//Рос.вет. ж. МДЖ. -2010. -№ 1. –

27с.

6.Морган, .Д.Ж П.ВулвекампРентгенологическйи атлас по травмотологии собак и кошек. Пер. с англ.-М.: ООО «Аквариум-Принт» , 2005.-240с.: ил

7.Оробец В.А., Деркачев Д.Ю.Сравнительный анализ диагностической эффективности аналоговой и компьютерной рентгенографии на запоминающих люминофорах. Труды Кубанского государственного аграрного университета. № 43. 2013- 153-155 с.

8.Степанова, Е. А. Цифровая (CR) рентгенография в муниципальном и региональном здравоохранении Российской Федерации: дис. канд. мед. наук/Е. А. Степанова. -Москва, 2006. -164 с.

9.Федоров А.Н. Определение возраста собак на основе рентгенографии периферического скелета//Акт.пробл. вет. хирургии: Тр. Междунар. науч.-производ. конф., посвящ. 75-летию УГАВМ. -Троицк, 2004. – 72 с.

УДК 619:616.9:636.5

Д.В. Пермякоа - студентка; Т.С. Прохорова - научный руководитель, доцент,

ФГБОУ ВПО Пермская ГСХА, г.Пермь, Россия

ДИНАМИКА ПОРЧИ ДОМАШНИХ КУРИНЫХ ЯИЦ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЗАРАЖЕНИИ

Аннотация. Яйцо — распространѐнный продукт питания человека. В статье рассматривается проблема заражения человека различными заболеваниями через яйцо. Были проведены исследования, в результате которых удалось установить динамику порчи яиц при экспериментальном заражении микроорганизмами.

Ключевые слова: яйцо, заражение, пути обсеменения, сальмонелла.

Яйца — ценный пищевой продукт. Яйцо состоит из трех частей: белок составляет 56%, желток – 32% и скорлупа – 12 % массы яйца.

316

Скорлупа предохраняет содержимое яйца от внешних воздействий. Снаружи она покрыта надскорлуповой оболочкой, а внутри – эластичными подскорлупной и белковой пленками. Поверхность скорлупы пронизана порами, необходимыми для газообмена и выделения влаги из яйца. Через эти поры в яйцо могут проникать микроорганизмы и вызывать порчу белка и желтка. На тупом конце яйца между подскорлупной и белковой пленками имеется воздушная камера (пуга). Химический состав яиц зависит от вида и породы птицы, условий ее содержания, кормления, времени снесения и т.д.

Яйцо стареет особенно быстро при температуре хранения выше установленных норм. Иммунитет его снижается, и создаются достаточно благоприятные условия для проникновения и размножения в нем микроорганизмов. Свежеснесенное яйцо, как правило, стерильно. [3]

При снижении бактерицидной активности скорлупы и подскорлупных оболочек микроорганизмы, находящиеся на поверхности яйца, проникают в содержимое яйца.

Признаком бактериальной обсемененности яиц является: появление гнилостного запаха, появление зеленых колоний на подскорлупной оболочке яйца и разжижение белка. Если процесс более глубокий, то оболочка желтка разрывается, происходит смешивание желтка с белком и образуется мутно-грязная жидкость. Содержимое такого яйца становится непрозрачным, скорлупа приобретает серый цвет. [4]

Инфицирование яиц микроорганизмами может происходить эндогенным и экзогенным путями.

При эндогенном заражении микроорганизмы проникают в яйцо в процессе его формирования в яичнике или яйцеводе больной птицы.

Яйца, полученные от больной птицы, имеют важное эпидемиологическое и эпизоотологическое значение. Нередко возникновение токсикоинфекций у людей связано с потреблением яиц. Возбудители многих инфекционных болезней птиц передаются трансовариальным путем, т. е. через яйцо.

Экзогенное обсеменение яиц связано с загрязнением скорлупы пометом, почвой, подстилкой, пером и пр. Чистота скорлупы – важный показатель качества пищевых яиц. Загрязненная скорлупа не только портит их товарный вид, но и резко сокращает продолжительность хранения. В зависимости от загрязненности скорлупы количество микроорганизмов на ней варьирует в больших пределах. [3]

Сальмонеллез птиц - болезнь, характеризующаяся острым течением в виде септицемии у молодняка и латентной инфекцией у взрослой птицы.

Основным источником возбудителя инфекции служит больная птица, выделяющая с пометом большое количество возбудителя. Число зараженных яиц, снесенных курами-несушками, колеблется в больших пределах и увеличивается в период усиленной яйцекладки. Возбудитель инфекции содержится в желтке и вызывает гибель зародышей на всех стадиях эмбрионального развития.

Переболевшая птица пожизненно остается носителем и источником возбудителя инфекции, накапливая его в том числе и в продукции птицеводства — яйцах. Птица и яйца служат опасными источниками сальмонеллеза для людей, который протекает в виде тяжелых кишечных расстройств и интоксикации.

317

По данным литературы, сальмонелла при экзогенном заражении проникает через скорлупу через 2 часа. Целью работы было проследить через какое время сальмонелла сможет проникнуть внутрь яйца и сможет ли вызвать порчу при разных путях заражения. [5]

Для анализа были взяты свежие яйца домашней курицы. Исследования проводили в соответствии с ГОСТ.

Всего было взято 12 яиц. Пробы с №1 по №10 были заражены экзогенно, путем искусственного нанесения на скорлупу яиц чисто культуры Salmonella choleraesuis, а пробы №11 и №12 были заражены на хорион-аллантоисную оболочку (на ХАО). После заражения брали пробы от каждого яйца в определѐнные сроки:

•Через 2 часа после заражения;

•Через 4 часа после заражения;

•Через 24 часа после заражения;

•Через 48 часов после заражения;

•Через 5 дней после заражения;

•Через 6 дней после заражения.

Эти пробы сеяли на среду накопления (селенитовая среда) и инкубировали

втечении 24 часов. Полученные культуры пересевали на висмут-сульфит агар и термостатировали при температуре 37оС в течение 24 часов. После этого проводилась идентификация выросших колоний. Параллельно в эти же сроки яйца просматривались на овоскопе. Во время исследований яйца находились при комнатной температуре.

При экзогенном заражении домашних яиц микроорганизмами путѐм искусственного нанесения на скорлупу чистой культуры, с дальнейшим взятием проб и посевом, роста культуры не наблюдали. Был сделан вывод, что микроорганизмы через скорлупу не проникли.

При органолептическом осмотре яиц было обнаружено, что нетипичная для яиц, подвижная сальмонелла при эндогенном экспериментальном заражении на хорион-аллантоисную оболочку вызвала порчу.

Установлено, что Salmonella choleraesuis при искусственном экзогенном заражении не может проникнуть внутрь яйца и вызвать его порчу даже через 6 суток. При эндогенном заражении на хорион-аллантоисную оболочку она размножается и вызывает порчу на 7 сутки.

Литература

1.ГОСТ 31659-2012 Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Salmonella

2.Нецепляев С.В., Панкратов А.Я. Лабораторный практикум по микробиологии пищевых продуктов животного происхождения: учебник.- М.: ВО Агропромиздат, 1990.-222 с.

3.Жарикова Г.Г., Козьмина А.О. Микробиология, санитария и гигиена пищевых продуктов.: практикум.- М.: Гелан, 2001.-254 с.

4.Бессарабов Б.Ф., Вашутин А.А., Воронин Е.С., Сидорчук А.А. Инфекционные болезни животных. - М.:КолосС, 2007.-671с.

318

УДК: 579:639’2’067: 637’8

М.П. Пищита – студентка 4 курса; Т.С. Прохорова - научный руководитель, доцент, кандидат биологических наук.

ФГБОУ ВО Пермская ГСХА, г. Пермь, Россия

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОХЛАЖДЕННОЙ И МОРОЖЕНОЙ МОРСКОЙ РЫБЫ

Аннотация. В статье рассматриваются вопросы микробиологического анализа охлажденной и мороженой морской красной, белой рыбы, с целью выявления общей микробной обсемененности, БГКП, патогенных микроорганизмов и микроорганизмов порчи. Рассматриваются изменения, в процессе длительного хранения при низкой температуре, органолептических показателей (внешний вид, наружные повреждения, консистенция, запах).

Ключевые слова: охлажденная и мороженая морская рыба, микрофлора, органолептические показатели, микробиологические исследования, динамика развития микрофлоры.

Добывают морскую рыбу в промышленных масштабах, в открытых водоемах в свежем, доброкачественном виде, так как микрофлора морской воды специфична из-за высокой концентрации солей и не содержит гнилостных микроорганизмов, которые могут вызывать процесс порчи в рыбе [5].

Однако воды Мирового океана загрязнены необработанными сточными водами промышленных предприятий, дождевыми и талыми водами, которые содержат токсины, пестициды, которые негативно влияют на рыбу, так как она способна аккумулировать токсичные вещества в своѐм организме. Она может быть поражена инфекционными и паразитарными заболеваниями, возбудители которых могут быть опасными для здоровья, как человека, так и животного [6].

Морская рыба широко используется в повседневном рационе человека, она служит источником полноценного белка, легкоусвояемого жира, который состоит из полиненасыщенных жирных кислот (омега -3 и омега -6). Рыба содержит в себе витамины группы В, никотиновую кислоту и жирорастворимые витамины А и D, она богата йодом, бромом и микроэлементами, которые необходимы для человеческого организма [6].

Рыба, добываемая, в морских глубинах – скоропортящийся продукт и относится к товарам, которые имеют ограниченный срок хранения и ограниченный срок реализации. В процессе вылова, производства, хранения, упаковки, маркировки, перевозки, реализации в рыбной продукции может произойти контаминация чужеродными веществами биологической и химической природы, что непреднамеренно делает продукцию небезопасной и не пригодной для употребления [8].

В связи с этим, рыбная продукция должна проходить качественный ветери- нарно-санитарный контроль, цель которого вовремя предупредить и не допустить в продажу морскую рыбную продукцию с внешними и внутренними изменениями, произошедшие в процессе оборота рыбной продукции. Для достижения цели были поставлены и выполнены следующие задачи:

1.Определение органолептических показателей морской рыбы при разных условиях хранения;

2.Определение влияния длительного хранения и температурного режима на микробную контаминацию морской рыбы.

Материалом для исследований послужили:

1)Охлажденная белая морская рыба – минтай;

2)Мороженая белая морская рыба – минтай;

3)Мороженая белая морская рыба – минтай, которая хранилась в течение 8 месяцев при низкой температуре(-120С);

319

4)Мороженая красная морская рыба – кижуч.

Перед микробиологическим анализом проверялись органолептические показа-

тели, являющиеся первыми признаками качества продукции. Определяли показатели, указывающие на изменение в рыбной продукции, которая может произойти в результате неправильного хранения, истечения срока годности или появления чужеродной микрофлоры: внешний вид, наружные повреждения, консистенция, запах. Органолептические исследования были проведены в соответствии ГОСТ 814-96 «Рыба охлажденная. Технические условия» и ГОСТ 32366-2013 «Рыба мороженая. Технические условия». Результаты органолептического исследования представлены в таблице

1 [2,3].

По органолептическим показателям выявлено, что охлажденная и мороженая морская рыба минтай и кижуч соответствовала требованиям, которые указаны в ГОСТ. Однако, мороженая морская белая рыба - минтай, которая хранилась в течение 8 месяцев при низкой температуре (-120C) имела: незначительные подкожные пожелтения, наружные надрывы мяса, консистенция ослабевшая, местами дряблая, запах специфический, неприятный. Данный образец не отвечал требованиям ГОСТ 323662013, так как в процессе длительного хранения произошли внешние и внутренние изменения.

Перед посевом образцов, готовились специальные, питательные среды, для роста определенных микроорганизмов, подготавливалась специальная посуда, после проводился отбор проб для микробиологического анализа. Все проводили в соответствии ГОСТ.

Микробиологический анализ проводился для определения качественного и количественного состава микроорганизмов с их последующей идентификацией [4].

Сначала отбирались пробы образцов массой 1г., и проводился посев на специальные среды. По требованию санитарно – микробиологических показателей для рыбы и рыбопродуктов СанПиН 2.3.2.1078-01 для выявления сальмонелл были проведены дополнительные посевы морской рыбы массой 25 г., сначала на среду накопления, а затем на дифференциальную среду - висмут – сульфит агар [7].

После определения качественного и количественного состава микроорганизмов была проведена идентификация колоний, результаты представлены в таблице 2.

320