Лекции
.pdfОптические детекторы
Рисунок 2 - Схема фотометрического детектирования:
1 — источник света;
2 — фотоприемник;
3 и 4 — ввод и выход раствора;
5 — проточная кювета
В настоящее время все шире используются хемолюминесцентные и
биолюминесцентные детекторы
15
Электрохимические детекторы
Наиболее распространенными способами детектирования являются вольтамперометрия, амперометрия и ионометрия.
Вольтамперометрия — метод анализа, основанный на исследовании
зависимости тока поляризации от напряжения, прикладываемого к
электрохимической ячейке, когда электрический потенциал электрода значительно отличается от равновесного значения.
Рисунок 3 - Конструкция тонкослойной ячейки ВАД. 1,3-корпус ячейки из двух пластин;
2-прокладка;
4-рабочий электрод;
5-стягивающие пластины;
6,7-выход и вход элемента.
рабочего
16
Электрохимические детекторы
Амперометрия – частный случай постояннотоковой вольтамперометрии, основанной на измерении тока при постоянном
фиксированном значении потенциала в области предельного тока.
Ионометрия - это прямая потенциометрия, где индикаторным электродом служит ионоселективный электрод (ИСЭ).
17
Санкт-Петербургский государственный электротехнический университет им. В.И. Ульянова (Ленина)
Гематологические
автоанализаторы
Историческая справка
Долгое время в гематологии для подсчета и анализа клеток использовали ручные методы исследований. Концентрацию клеток определяли визуальным подсчетом в камере Горяева, а морфологические характеристики – исследованием мазка крови под микроскопом.
1953 год – прорыв в лабораторной диагностике: У. Культер разработал кондуктометрический метод подсчета форменных элементов в крови. Данная методика легла в основу принципа работы гематологических анализаторов.
2"
Гематологический анализатор
Предназначен для количественного анализа клеток крови, основными параметрами которого являются значения количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.
По способу подготовки проб гематологические анализаторы делятся на две группы: автоматические и полуавтоматические. "
3"
Аналитические возможности гематологических анализаторов
• высокая производительность (до 100-120 проб в час)
• небольшой объем крови для анализа (12-150 мкл)
• анализ большого количества (десятки тысяч) клеток
• высокая точность
• оценка большого числа параметров
• возможность графического представления результатов
4"
Система реагентов гематологического анализатора
В работе используются 3 основных раствора:
1. Изотонический (буферный) разбавитель (дилюент); 2. Лизирующий раствор; 3. Промывающий раствор (после каждой пробы);
Эти растворы включены в проточную систему анализатора.
При техническом обслуживании для очистки через камеру подачи образцов используются:
- Промывающий раствор (энзиматический очиститель); - Очищающий раствор (хлорсодержащий реагент).
5"
Физико-химический принцип
В |
основе |
кондуктометрического метода |
лежит |
регистрация |
импульса |
||
напряжения |
при |
прохождении |
клетки крови через |
микроотверстие |
|||
(апертуру) под |
действием электрического |
тока. |
|
|
Внутренний электрод Апертура Взвесь клеток крови
Внешний электрод
6"
Дифференцировка и подсчет клеток
|
" |
|
-" лейкоциты (WBC): 120…1000 мкм3" |
|
- эритроциты (RBC): 85…95 мкм3" |
Принцип работы датчика объема" |
- тромбоциты (PLT): 2…30 мкм3" |
Разделение эритроцитов и тромбоцитов производится по разнице в амплитуде сигнала (в одном разведении одновременно). Содержащимися в образце лейкоцитами пренебрегают. Отличить по размеру эритроциты и лейкоциты гораздо труднее. Поэтому они подсчитываются в другой кювете
– два измерительных канала.
7"