Лекции
.pdfАМПЛИФИКАТОР
21
МЕТОДЫ ДЕТЕКЦИИ ПРОДУКТОВ ПЦР
•Электрофоретическое разделение в агарозном геле
•Флоуресцентная метка («в режиме реального времени»)
22
АМПЛИФИКАТОР REAL-TIME
CFX384 TOUCH™
•Нагреваемая крышка с автоматической регулировкой высоты
•Определение оптимальных параметров реакции благодаря функции температурного градиента
•Скорость нагревания – 2.5 °С/сек
•Температурный диапазон – 0 -100 °С
•Точность температуры - ±0.2 °С
•Количество ячеек - 384
23
АМПЛИФИКАТОР REAL-TIME
ДТ-ЛАЙТ
•Возможность установки двухсекционного термоблока с независимой регулировкой температур по зонам и 192луночного термоблока
•Мультиплексная детекция флуоресценции с широким динамическим диапазоном с использованием до пяти независимых каналов
•LED-светодиоды, используемые в качестве источника света, отличаются длительной эффективной работой (до 100 000 ч) и стабильностью оптических характеристик
•Температурный диапазон – 0 -100 °С
•Автоподстройка крышки блока по высоте пробирок
•Дискретность установки температуры - 0,1°С
24
Санкт-Петербургский государственный электротехнический университет «ЛЭТИ» им. В.И. Ульянова (Ленина) Кафедра БТС
Автоанализатор с использованием технологии полимеразной цепной реакции
1
Полимеразная цепная реакция
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это осуществляемая in vitro специфическая амплификация нуклеиновых кислот, инициируемая синтетическими олигонуклеотидными праймерами;
а) |
б) |
Рисунок 1 - Центрифуга–вортекс для ПЦР. а) Внешний вид; б) внутренний вид
2
Этапы ПЦР-анализа
1. Пробоподготовка |
2. Амплификация |
3. Детекция результатов
3
Амплификация
Рисунок 2 – Циклы амплификации |
4 |
|
Амплификация
Рисунок 3 – Схема используемых температур на этапе амплификации
5
Амплификация
В каждом цикле синтезированные ранее молекулы ДНК вновь вступают в реакцию амплификации и удваиваются.
Количество продукта в ходе ПЦР нарастает в геометрической прогрессии по формуле 2n.
Рисунок 4 – Количество продукта в |
6 |
|
ходе ПЦР |
||
|