9. Какие виды лучистой энергии губительно действуют на микробы и применяются на практике? Определение понятия: асептика, антисептика, дезинфекция, стерилизация.
Неионизирующее излучение — ультрафиолетовые и инфракрасные лучи солнечного света, а также ионизирующее излучение — гамма-излучение радиоактивных веществ и электроны высоких энергий губительно действуют на микроорганизмы через короткий промежуток времени. УФ-лучи применяют для обеззараживания воздуха и различных предметов в больницах, родильных домах, микробиологических лабораториях. С этой целью используют бактерицидные лампы УФ-излучения. Ионизирующее излучение применяют для стерилизации одноразовой пластиковой микробиологической посуды, питательных сред, перевязочных материалов.
Асептика – комплекс мер, направленных на предупреждение попадания возбудителя инфекции в рану, органы больного при операциях, лечебных и диагностических процедурах. Методы асептики применяют для борьбы с экзогенной инфекцией, источниками которой являются больные и бактерионосители.
Антисептика – совокупность мер, направленных на уничтожение микробов в ране, патологическом очаге или организме в целом, на предупреждение или ликвидацию воспалительного процесса.
Дезинфекция — процедура, предусматривающая обработку загрязненного микробами предмета с целью их уничтожения, чтобы они не смогли вызвать инфекцию при использовании данного предмета.
Стерилизация предполагает полную инактивацию микробов в объектах, подвергающихся обработке.
10. Перечислите методы стерилизации, охарактеризуйте каждый из них: аппаратура, режим стерилизации (температура и время), стерилизуемые материалы, контроль успешной стерилизации.
Существует три основных метода стерилизации: тепловой, лучевой, химической.
Тепловая стерилизация основана на чувствительности микробов к высокой температуре. При 60 "С и наличии воды происходит денатурация белка, деградация нуклеиновых кислот, липидов, вследствие чего вегетативные формы микробов погибают. Споры, содержащие очень большое количество воды в связанном состоянии и обладающие плотными оболочками, инактивируются при 160—170 °С. Применяют сухой жар и пар под давлением. Сухим жаром осуществляют в воздушных стерилизаторах («сухожаровые шкафы или печи Пастера»). Воздушный стерилизатор представляет собой металлический плотно закрывающийся шкаф, нагревающийся с помощью электричества и снабженный термометром. Обеззараживание материала в нем производят, как правило, при 160 °С в течение 120 мин. Стерилизуют сухим жаром лабораторную посуду и другие изделия из стекла, инструменты, силиконовую резину, т. е. объекты, которые не теряют своих качеств при высокой температуре. Большая часть стерилизуемых предметов не выдерживает подобной обработки. Обработка паром под давлением в паровых стерилизаторах («автоклавы») является наиболее универсальным методом стерилизации. Паровой стерилизатор — металлический цилиндр с прочными стенками, герметически закрывающийся, состоящий из водопаровой и стерилизующей камер. Аппарат снабжен манометром, термометром и другими контрольно-измерительными приборами. В автоклаве создается повышенное давление, что приводит к увеличению температуры кипения. Поскольку кроме высокой температуры на микробы оказывает воздействие и пар, споры погибают уже при 120 °С. Наиболее распространенный режим работы парового стерилизатора: 2 атм — 121 °С — 15—20 мин. Время стерилизации уменьшается при повышении атмосферного давления, а следовательно, и температуры кипения (136 °С — 5 мин). Стерилизуют в автоклаве большую часть предметов: перевязочный материал, белье, коррозионно-устойчивые металлические инструменты, питательные среды, растворы, инфекционный материал. Одной из разновидностей тепловой стерилизации является дробная стерилизация, которую применяют для обработки материалов, не выдерживающих температуру выше 100 °С, (для стерилизации питательных сред с углеводами, желатина). Их нагревают в водяной бане при 80 °С в течение 30—60 мин. В настоящее время применяют еще один метод тепловой стерилизации, предназначенный специально для молока — ультравысокотемпературный (УВТ): молоко обрабатывают в течение нескольких секунд при 130—150 °С.
Химическая стерилизация предполагает использование токсичных газов: оксида этилена, смеси ОБ (смеси оксида этилена и бромистого метила в весовом соотношении 1:2,5) и формальдегида.
Стерилизация газами осуществляется в присутствии пара при температуре от 18 до 80 °С в специальных камерах. В больницах используют формальдегид, в промышленных условиях — оксид этилена и смесь ОБ. Перед химической стерилизацией все изделия, подлежащие обработке, должны быть высушены. После очистки и дезинфекции прибор помещают на определенное время (от 45 до 60 мин) в стерилизующий раствор, затем прибор должен быть отмыт стерильной водой. Для стерилизации и отмывки используют стерильные емкости с крышками. Простерилизованное и отмытое от стерилизующего раствора изделие высушивают стерильными салфетками и помещают в стерильную емкость. Все манипуляции проводят в асептических условиях и в стерильных перчатках. Хранят эти изделия не более 3 суток.
Лучевая стерилизация осуществляется либо с помощью гамма-излучения, либо с помощью ускоренных электронов. Лучевая стерилизация является альтернативой газовой стерилизации в промышленных условиях, и применяют ее также в тех случаях, когда стерилизуемые предметы не выдерживают высокой температуры.
1
1.
Методы контроля стерильности: физическим
методом; биологическим методом (назовите
применяемый микроб). Как простерилизовать:
стеклянную посуду, МПА, мясо-пептонный
бульон (МПБ), среды Гисса, физиологический
раствор, питательную среду, содержащую
белок?
Ф
изические
методы
контроля осуществляются с
контрольно-измерительной аппаратуры
и приборов, фиксирующих в процессе
стерилизации температуру, давление и
временные параметры.
Современные стерилизаторы оснащены также записывающими устройствами, фиксирующими отдельные параметры каждого цикла стерилизации.
Биологический метод контроля основан на процессе тепловой инактивации спор тестовой культуры. Биотест модификаций «БИОСТЕР ПАР», «БИОСТЕР ГАЗ» представляет собой специальную полужесткую пластмассовую пробирку, в которую помещено определенное количество высушенных спор и специальная легколомающаяся стеклянная ампула, заполненная цветной питательной средой.
Биотест является автономным биологическим индикатором и выполнен по раздельной схеме – до момента начала контроля споры и питательная среда изолированы друг от друга, что позволяет транспортировать и хранить его продолжительное время без охлаждения.
Биотесты просты в применении. Никакое специальное лабораторное и аналитическое оборудование не требуется для их применения. Биотест может быть использован только однократно.
Упакованные биотесты помещают в те же контрольные точки стерилизационной камеры, что и средства физического и химического контроля.
Учет результатов биологического контроля производится путем периодического визуального осмотра биотестов в течение 48 часов:
- сине-зеленый либо фиолетовый цвет (зависит от модификации биотеста) свидетельствует об эффективности работы контролируемого оборудования;
- изменение цвета на желтый хотя бы одного биотеста, а также его помутнение свидетельствует о наличии нарушений в работе стерилизатора.
Основанием для заключения об эффективной работе стерилизационной аппаратуры является отсутствие роста тест - культуры при бактериологических исследованиях всех биотестов в сочетания с удовлетворительными результатами физического и химического контроля.
Новую стеклянную посуду предварительно кипятят 30 мин в 1-2% растворе хлороводородной кислоты или погружают в этот раствор на ночь, после чего в течение часа прополаскивают в проточной воде.
Режим стерилизации зависит от состава среды и указан в ее рецепте. Жидкие и плотные питательные среды, содержащие сахара, стерилизуют в кипятильнике Коха ежедневно по 20 мин в течение трех дней, либо в автоклаве под давлением не выше 0,05 Мпа в течение 20 мин. Среды, не содержащие сахаров, стерилизуют в автоклаве при давлении 0,1 Мпа и температуре 121°С в течение 20 мин. Обычные питательные среды. К ним относятся мясо-пептонный бульон (МПБ) и мясо-пептонный агар (МПА). Приготовленный мясной экстракт разливают по флаконам и 20-30 минут стерилизуют в автоклаве. МПБ стерилизуют 15-20 мин в автоклаве при давлении 1 атм. Стерилизуют среды Гисса при 110° в течение 10 минут или текучим паром в течение 30 минут 3 дня подряд. Для стерилизации питательных сред, содержащих в своем составе нативные белки, пользуются фильтрацией через мембранные фильтры Зейтца. Подготовленные питательные среды проверяют на стерильность. Для этого их ставят в термостат при температуре 37° С. Среды, простерилизованные в автоклаве, выдерживают в термостате 1 сут, простерилизованные текучим паром -3 сут.