Замораживание спермы

Сперму котов замораживают в желточно-лактозном буфере (табл. 10.5). Замораживание в гранулах и пайеттах дает сопоставимые результаты в отношении сохранения подвижности сперматозоидов, доли сперматозоидов с неповрежденным акросомами, проникновения через zona pellucida и связывания с оолеммой. Свежую сперму разбавляют раствором Ham's F 10 в соотношении 1:3 (с добавлением 5 % эмбриональной сыворотки телят), центрифугируют, затем смешивают с буфером. Разбавленную сперму помещают в 0,25 мл пайетты, оставляют на 10 минут при температуре 22 °C и на 60 секунд вручную опускают в пары жидкого азота, охлаждают там до -10 °C, после чего замораживают до -100 ºС, понижая температуру со скоростью -40 °C/мин, затем опускают в жидкий азот. Сперму размораживают в течение 10 секунд на воздухе, затем в течение 20 секунд на водяной бане при температуре 37 °C, после чего смешивают с раствором Ham's F 10. Кроме названного раствора, для разбавления спермы применяют буферы TesT и Трис. Подвижность сперматозоидов и количество неповрежденных акросом снижаются после размораживания.

Использование искусственного осеменения

Работы по искусственному осеменению домашней кошки проводятся преимущественно в научных целях, поскольку ее биология имеет сходство с биологией диких кошачьих, однако разработанные методы искусственного осеменения и сохранения спермы могут найти применение в племенном разведении кошек. Численность племенных животных у многих пород ограничена, в частности, из-за того, что большинство котов подвергается кастрации в связи с поведенческими проблемами (например, нанесения мочевых меток), осложняющими их содержание в домашних условиях. Недостаток производителей, а также дисбаланс численности некастрированных кошек и котов рано или поздно приводит к инбридингу и дегенерации, что оборачивается распространением врожденных дефектов и заболеваний. Замораживание спермы позволяет обеспечить не только ее экспорт в любую страну мира, но и возможность получать потомство даже от кастрированных или погибших котов. Кроме того, искусственное осеменение значительно снижает риск распространения заболеваний.

Методы искусственного осеменения Индукция овуляции

В отсутствие вязки овуляцию стимулируют посредством инъекции человеческого ХГ, повышающего секрецию ЛГ. Индукция овуляции наиболее эффективна на 3 день эструса. Внутримышечное введение 100 ME человеческого ХГ обеспечивает овуляцию у большинства кошек, повышение дозы приводит к гиперстимуляции яичников и дегенерации ооцитов. Анестезия угнетают овуляцию, если проводится после ее индукции или непосредственно перед овуляцией. В качестве альтернативного метода можно использовать внутримышечное введение 25 мкг ГнРГ.

Искусственное осеменение свежей спермой

Имеются сообщения об успешном осеменении свежей спермой (как вагинальном, так и внутриматочном). Если осеменение спермой, разбавленной 0,1 мл физраствора, проводят в день введения человеческого ХГ и повторно через 24 часа, т. е. в момент овуляции, обеспечивается более надежное оплодотворение по сравнению с однократным осеменением в день введения человеческого ХГ. Хирургическое внутриматочное осеменение обеспечивает наилучшие результаты, если проводится через 31–50 часов после введения человеческого ХГ. Оплодотворение происходит в течение 49 часов после индукции овуляции. Для выполнения интравагинального осеменения назначение транквилизаторов обычно не требуется.

Длина преддверия влагалища домашней кошки составляет 1–2 см, диаметр 2,5–3,0 см. Французский катетер калибра 3,5 может быть использован для интравагинального осеменения. Его вводят на 45–50 мм во влагалище до шейки матки, выдавливают сперму (фиг. 10.6), после чего в течение 10 минут животное удерживают в положении с приподнятой тазовой частью. Для осеменения свежей спермой в спермодозе должно содержаться не менее 5 х 10⁶ сперматозоидов.

Табл. 10.6. Искусственное осеменение

Индукция овуляции — 100 МЕ чХГ на 3 день эструса;

Овуляция — Через 26–29 часов после инъекции человеческого ХГ;

Оплодотворение — Может происходить в интервале до 49 часов после индукции овуляции;

Анестезия — Может подавлять овуляцию;

Общая длина преддверия влагалища и влагалища — 45–50 мм.