- •Глава1.Обзорлитературы 10
- •Глава2.Методыисследования 42
- •Глава3.Результатысобственныхисследований 55
- •Глава4Влияниелекарственныхпрепаратовнавыраженностьклиническихсимптомовзаболевания,состояниекишечноймикрофлорыиуровень качестважизни 96
- •Введение
- •Цельисследования
- •Задачиисследования
- •Научнаяновизна
- •Глава1.Обзорлитературы
- •1.1Понятиемикробиома
- •Методыдиагностики кишечноймикрофлоры
- •Качественныйиколичественныйсоставмикрофлорыжелудочно-кишечноготрактауздоровыхлиц
- •Качественныйиколичественныйсоставмикрофлорыжелудочно-кишечноготрактаубольныхСрк
- •Количественный составмикрофлорыубольныхСрк
- •КачественныйсоставмикрофлорыубольныхСрк
- •Физиологическоезначениекишечной микрофлоры
- •Пищеварительнаяфункциякишечноймикрофлоры.
- •ПатогенетическоезначениекишечноймикрофлорыубольныхсCрк
- •СвязьклиническихсимптомовзаболеванияскачественнымиколичественнымсоставоммикрофлорыубольныхСрк
- •Методыкоррекциикишечноймикрофлоры.Доказательнаябазаэффективности пробиотиковубольныхСрк
- •ВозможныепутивлиянияпробиотиковнамеханизмыразвитияиклиническиепроявленияСрк
- •СрКимикрофлора:нерешенныевопросы
- •Глава2.Методыисследования
- •Ультразвуковое исследование органов брюшной полости
- •Тестированиепопсихометрическимшкалам
- •Глава3.Результатысобственныхисследований
- •ОбщаяхарактеристикабольныхСрк
- •ОсобенностиклиническойкартиныубольныхСрк-ДиСрк-з
- •ПоказателианоректальнойманометриивысокогоразрешенияубольныхСрКилицконтрольной группы
- •СостояниекишечноймикрофлорыупациентовсСрКилицконтрольной группы
- •Состояниекишечноймикрофлорыподанныммолекулярно-генетическогоисследования (секвенирование16SрРнк)
- •СостояниемикрофлорытолстойкишкиупациентовсразличнымивариантамиСрКилицконтрольнойгруппыподаннымбактериологическогоисследованиякала
- •Типымикробиологическихнарушений
- •СостояниемикрофлорытонкойкишкиупациентовсразличнымивариантамиСрКилицконтрольнойгруппыподаннымдыхательноготеста
- •3.5.РезультатытестированиябольныхСрк-ДиСрк-Зпометодике
- •СравнительнаяхарактеристикаподгрупппациентовсСрк-Ддоначалатерапии
- •Сравнительная эффективность препаратов Флорасан-д иЭнтеролвгруппепациентовсСрк-д
- •ДинамикавыраженностиклиническихсимптомовупациентовсСрк-ДнафонеприемапрепаратовФлорасан-ДиЭнтерол
- •ДинамикавыявленияСибРубольныхСрк-ДнафонеприемапрепаратовФлорасан-ДиЭнтерол
- •Динамикапоказателейкачестважизни(опросникSf-36)убольныхСрк-Днафонелечения препаратами Флорасан-ДиЭнтерол
- •Сравнительная эффективность препарата Флорасан-д иплацебовгруппепациентовсСрк-д
- •ДинамикавыраженностиклиническихсимптомовупациентовсСрк-Днафонеприемапрепарата Флорасан-Диплацебо
- •ДинамикавыявленияСибРубольныхСрк-Днафонелеченияпрепаратом Флорасан-Диплацебо
- •Динамикапоказателейкачестважизни(поопросникуSf-36)убольныхСрк-ДнафонелеченияпрепаратомФлорасан-Диплацебо
- •СравнительнаяхарактеристикаподгрупппациентовсСрк-Здоначалатерапии
- •Сравнительная эффективность препаратов Флорасан-д иРезолорвгруппепациентовсСрк-з
- •ДинамикавыраженностиклиническихсимптомовупациентовсСрк-ЗнафонеприемапрепаратовФлорасан-ДиРезолор
- •Неделятерапии
- •Неделятерапии
- •Неделятерапии
- •ДинамикавыявленияСибРубольныхСрк-Знафонелеченияпрепаратами Флорасан-ДиРезолор
- •Динамикапоказателейкачестважизни(опросникSf-36)убольныхСрк-Знафонелечения препаратами Флорасан-ДиРезолор
- •Сравнительная эффективность препарата Флорасан-д иплацебовгруппепациентовсСрк-з
- •ДинамикавыраженностиклиническихсимптомовубольныхСрк-Знафонеприемапрепарата Флорасан-Диплацебо
- •Неделятерапии
- •Количестводефекаций внеделю 10
- •ДинамикавыявленияСибРубольныхСрк-Знафонелеченияпрепаратом Флорасан-Диплацебо
- •ДинамикапоказателейкачестважизниубольныхСрк-з(опросникSf-36)нафонелеченияпрепаратом Флорасан-Диплацебо
- •Практическиерекомендации
- •Список литературы
- •Приложение1
- •Возраст:
- •Нафонеприемакакихлекарственныхсредствпроисходитуменьшениеболи(перечислите):
- •Нафонеприемакакихлекарственныхсредствпроисходитулучшениестула:
- •Метеоризм (вздутиеживота)
- •Нафонеприемакакихлекарственныхсредствпроисходитуменьшениеметеоризма:
- •Регистрационныйбланккшкалегамильтона (тревога)
- •Ажитация
- •Психическаятревога
- •(Депрессия)
- •Приложение4
- •Приложение5
- •Приложение6ОпросникSf-36
- •Приложение7
Ультразвуковое исследование органов брюшной полости
выполнялосьврачамиотделенияультразвуковойдиагностики3/10УКБ№2
ПервогоМГМУимениИ.М.Сеченова(зав.отделениемТ.Л.Лемина)сприменениемаппаратаVoluson730фирмы«GeneralElectric»(США).ПрипроведенииУЗИоценивалисьсостояниежелчногопузыря(размеры,наличиеконкрементов,толщинастенок),поджелудочнойжелезы(наличиекальцинатоввпаренхиме,изменениедиаметрапанкреатическогопротока,наличиепсевдокист,увеличениеразмеровжелезы,выраженностьгипоэхогенностипаренхимы),размерыселезенки,печени,вне-ивнутрипеченочныхжелчныхпротоков, диаметрворотнойвены.
Эзофагогастродуоденоскопия(ЭГДС)проводиласьврачомотделениялечебно-диагностическойэндоскопииУКБ№21МГМУимениИ.М.Сеченова(зав.отделениемТ.В.Антонова)М.Ю.КоньковымсиспользованиемгастроскопаEG-250WR5фирмы«Fujinon»(Япония).Впроцессеэндоскопическогоисследованияоценивалосьсостояниеслизистойоболочкижелудкаидвенадцатиперстнойкишки,наличиеилиотсутствиеэрозийиязвенныхдефектов,характеривыраженностьгастритическихизменений,сопутствующиеизмененияпищевода.Принеобходимостипроводиласьбиопсия.
Колоноскопиявыполняласьврачамиотделениялечебно-диагностическойэндоскопииУКБ№2(зав.отделениемТ.В.Антонова)сприменениемколоноскопаExeraIICLV–180ивидеомонитораOlympusOEV
191Hфирмы«OlympusEVIS»(Япония).Припроведенииисследованияоценивалосьсостояниеслизистойоболочкитолстойкишкиитерминальногоотделаподвздошнойкишкисцельюисключениявоспалительныхзаболеванийкишечникаиновообразованиятолстойкишки.
ВодородныйдыхательныйтестслактулозойпроводилсяличнодиссертантомсцельюисключенияСИБР.ДляэтойцелиприменялсяаппаратGASTROLYZER(Bedfont,Великобритания),которыйпозволяетоценитьстепеньферментацииуглеводов(вчастностилактулозы)втонкомкишечнике.Приферментацииуглеводовобразуетсяводород,которыйвсасываетсяизкишечникавкровь,достигаетлегкихивыделяетсясвыдыхаемымвоздухом.
Концентрация водорода в выдыхаемом воздухе косвенно отражаетметаболическую активность бактерийвкишечнике.
Наканунеисследованияпациентамрекомендовалосьисключитьизрационапитаниямедленновсасываемыеуглеводы(хлеб,картофель,злаки)ирастительнуюклетчатку,которыеспособствуютзадержкеэкскрецииводородасвыдыхаемымвоздухом.Дляпредотвращениягипервентиляцииипоследующегоизмененияконцентрацииводородапациентамзапрещалоськуритьиследовалоизбегатьфизическойнагрузкиза2часадоисследованияивовремяпроведениятеста.Утром,после12-часовогоголоданияисанацииротовойполости,производилсязаборобразцавыдыхаемоговоздуха(базальныйуровеньсодержания водорода).Далеепациент употреблял10глактулозы,раствореннойв400млводы,послечеговновьпроводиласьсанацияротовойполостивоизбежаниеактивизацииеемикрофлоры.Втечение первогочасапослепринятиясубстратакаждые15минутсобиралисьобразцывыдыхаемоговоздуха,втечениевторогочаса–каждые30минут(всего6проб).
Уздоровогочеловекаповышениеуровняконцентрацииводородапроисходитпримерночерез2-3часапослепринятиялактулозыисвязаносееметаболизмомвтолстойкишке.Учитывалосьдвапикаконцентрацииводородаввыдыхаемомвоздухе:первый,связанныйсбактериальнойактивностьювтонкойкишке,второй,обусловленныйбактериальнойферментациейлактулозывтолстойкишке.Дыхательныйтестслактулозойрасценивалсякакположительныйвслучаеопределениядвухфазного(двухпикового)повышенияконцентрацииводорода,либораннего(втечение30-60минут)ееповышения
≥12pmm.
БактериологическоеисследованиекалапроводилосьсотрудникамибактериологическойлабораторииПервогоМГМУимениИ.М.Сеченова(зав.лаб.О.А.Морозова).Собранныйматериалвколичественеменее3гпомещалсявстерильныйконтейнеридоставлялсявлабораториюнепозднее2часовсмоментасборапробы.
Согласнопротоколуведениябольныхсдисбиотическиминарушениями,известнычетыреосновныхтипанарушениясоставакишечноймикрофлоры[30].
нарастаниеколичестваусловно-патогенныхмикроорганизмоводногоилинесколькихвидоввкишечникепринормальномколичествебифидобактерий;
повышениесодержанияодногоилинесколькихвидовусловно-патогенныхмикроорганизмовприумеренномсниженииконцентрациибифидобактерий(на1-2порядка);
снижениесодержанияоблигатныхпредставителеймикробиоценоза(бифидобактерийи/илилактобацилл)безрегистрируемогоувеличенияколичествасапрофитнойилиусловно-патогенноймикрофлорыкишечника;
умеренное или значительное (<107) снижение содержания
бифидобактерий,сочетающеесясвыраженнымиизменениямиваэробноймикрофлоре–редукциейлактобацилл,появлениемизмененныхформкишечнойпалочки,обнаружениемодногоилинесколькихпредставителейусловно-патогенныхмикроорганизмовввысокихтитрах(до107–108КОЕ/г).
Впротоколведениябольныхвключенотакже3степенивыраженности
нарушениясоставакишечноймикрофлоры[30]:
степень:снижениесодержаниябифидобактерийдо108–107КОЕ/г,лактобактерийдо106–105КОЕ/г,типичныхэшерихийдо106-105КОЕ/г,возможноповышениесодержаниятипичныхэшерихийдо109–1010КОЕ/г;
степень:снижениесодержаниябифидобактерийдо107инижеКОЕ/г,лактобактерийдо105инижеКОЕ/г,повышениесодержаниягемолитическихэшерихийилидругихусловнопатогенныхбактерийдоконцентрации105-107КОЕ/гилиобнаружениеассоциацийусловнопатогенныхмикроорганизмоввконцентрации104-105КОЕ/г;
степень:снижениесодержаниябифидобактерийдо107инижеКОЕ/г,
лактобактерийдо105инижеКОЕ/г,обнаружениеассоциацийусловнопатогенныхмикроорганизмоввконцентрации106-107КОЕ/ги выше.
Информативностьметодабактериологическогоанализакаларассчитываласьпонижеприведеннымформулам.Определялисьтакиехарактеристики,какчувствительностьиспецифичностьуказанногодиагностическоготеста.Показательчувствительностиотражаетдолюположительныхрезультатовубольныхлюдей,аспецифичность–долюотрицательныхрезультатовуздоровыхлиц.
Вкачестве«золотогостандарта»считаласьпостановкадиагнозаСРКнаоснованиисоответствияжалобпациентаРимскимкритериямIIIиотсутствияорганическихзаболеванийпорезультатампроведенныхлабораторныхиинструментальныхисследований.
Ч Ип
ИпЛо
C Ио
ИоЛп
х100%
х100%
Ч-чувствительность;
С-специфичность;
Ип-истинноположительныйрезультатИо-истинноотрицательныйрезультатЛо-ложноотрицательныйрезультат
Лп-ложноположительныйрезультат
Вслучаебактериологическогоисследованиякалаистинно-положительнымсчиталсярезультатобнаружениянарушенийсоставакишечноймикрофлорыприустановленномдиагнозеСРК,ложноположительным–результат,прикоторомнарушениясоставакишечноймикрофлорыотмечалисьуздоровыхлиц,отрицательным–приотсутствиинарушенийуздоровыхлиц,ложноотрицательным–приотсутствиинарушенийубольныхсустановленнымдиагнозомСРК(Таблица2.1).
Результаттеста |
НаличиеСРК |
ОтсутствиеСРК |
Имеютсянарушениясостава кишечноймикрофлоры |
истинно положительныйрезультат |
ложно положительныйрезультат |
Отсутствуют нарушениясостава кишечноймикрофлоры |
ложно отрицательныйрезультат |
отрицательный результат |
Таблица2.1Информативностьбактериологическогоанализакала
Аноректальнаяманометриявысокогоразрешения(HighAnorectalResolutionManometry,HRAM)проводиласьврачомотделенияфункциональнойдиагностикик.м.н.О.А.СтороновойсприменениемаппаратногокомплексаSolarGI,MMS(Нидерланды).Данныйметодоснованнарегистрацииизмерениядавленияанальныхсфинктероввсостояниипокояинапряжения,атакжеоценкичувствительностипрямойкишкиспомощью20-тиканальногозонда,располагающегосявпросветекишкивовремяпроведенияисследования.Зондпредставляетсобойгибкийполивиниловыйтвердотельныйкатетердиаметром3мм,наконцекоторогопомещенбаллонизлатекснойрезинысотверстиемдлявведениявнеговоздухасцельюпроведенияразличныхпроб.Напереднемконцебаллонаимеютсясоединенныесдатчикаминадругомконцезондаотверстия,вкоторыесопределѐннойскоростьюиподдавлениемподаетсявоздух.Колебаниядавлениявпросветекишкипередаютсяврегистрирующееустройство,преобразующееихвэлектрическиесигналы.Наблюдениеианализизменениядавленияосуществлялсяприпомощикомпьютернойпрограммы,включающейвсебяавтоматическийобсчѐтрезультатов.
Секвенирование16SрРНКсиспользованиемобразцовкалаосуществлялосьсовместносостаршимнаучнымсотрудникомлаборатории
молекулярнойбиологииигенетикиНИИфизико-химическоймедициныКострюковойЕ.С.(зав.лабораториейд.б.н.,профессорВ.М.Говорун).ЭмульсионнаяПЦРпроводиласьсиспользованиемнаборовGSFLXTitaniumSVemPCRKit(Lib-L)иGSFLXTitaniumemPCRFiltersSV64pcsKit,процедурасеквенирования–сиспользованиемнаборовSequencingKitXL+иGSFLXTitaniumPicoTiterPlateKit70x75нагеномномсеквенатореGSFLX+(RocheDiagnostics).