- •1. Основные представления о микробиологических средах и их компонентах
- •1.1. Классификация сред, терминология
- •1.2. Питательные основы
- •1.3. Агар-агар и его заменители
- •1.4. Сыворотка крови животных и человека
- •1.5. Твины
- •1.6. Минеральные соли
- •1.7. Селективные агенты Красители
- •2. Грамотрицательные аэробы 2.1. Род Псевдомонады
- •2.2. Сем. Нейссерии
- •2.3. Род Бордетеллы
- •2.4. Род Бруцеллы
- •4.3. Сем. Пастереллы Род Пастереллы
- •8.4. Род бациллы
- •8.5. Род микобактерий
2.4. Род Бруцеллы
Возбудители бруцеллеза имеют систему ассимиляции эритри-тола—основного источника углевода и энергии для бактерий данного вида (Румянцев С. Н., 1983). Бруцеллы относятся к аминоге-терогенным микроорганизмам, требующим для обеспечения роста наличия свободных аминокислот в качестве источника азота(Кондратьева О. В., 1968). Поскольку наиболее богаты по аминокислотному составу белки животного происхождения, до настоящего времени в практических лабораториях преимущественно используются питательные среды на их основе. Из субстратов животного происхождения чаще всего применяются мясо, печень, селезенка (Аверкиева Р. С, Ременцова М. М., 1968). В состав многих сред для культивирования бруцелл входит кровь, чаще сыворотка (Колесникова Н. С, 1961; Альтон Дж., Джонс Л., 1968).
Особый интерес с экономической точки зрения представляет применение тех компонентов крови, которые до сих пор не использовались или использовались не полностью. Грушина Т. А. и соавт. (1978) предлагают для выращивания бруцелл козье-
овечьего, свиного и, в меньшей степени, бычьего видов применять (3-глобулиновые среды на основе гидролизата (J-глобулино-вой фракции (отход производства у-глобулина) с аминным азотом 200—250 мг%. Эти среды рекомендуются и для бактериологической диагностики бруцеллеза у людей, так как с их помощью выделяется в 2,4 раза больше гемокультур, чем на широко применяемой мясо-пептонной среде. Затраты при этом сокращаются на 53,8%. Предлагается также использование твина-40 и твина-60 для повышения ростовых качеств сред, поскольку установлена способность бруцелл разных видов их гидролизо-вать (Рыкова В. И., Домарадский И. В., 1963).
Другие авторы рекомендуют для повышения ростовых качеств сред, помимо твинов, заменяющих сыворотку крови животных, использовать глюкозу и глицерин. Предлагается также в качестве основы сред гидролизат из китобойной муки, отходов плацентарной и абортной крови, экстрактов куриного эмбриона и ворсинок плаценты (Смирнова В. И., 1960,1962; Мухарвер Р. В. и соавт., 1961; Бабушкин И. Н., 1964;GardiniG.,DominiM., 1954;WilliamsA.etal., 1962). Ишанова Р. Ж. и соавт. (1978) показали возможность замены мясных настоев гидролизатами крови, печени, селезенки и плаценты крупного и мелкого рогатого скота.
Ускорению роста бруцелл способствует введение в среду, содержащую агар-агар, глюкозу, глицерин, хлорид натрия и воду, веществ, в которых присутствует аминный азот: неполных панкреатических гидролизатов казеина и придатков с семенниками, а также аминокислотыL-цистина (Бедарева 3. М. и соавт., 1983). Для ускорения адаптации свежевыделенных бруцелл в среду, содержащую питательный агар, глюкозу и глицерин, добавляют риванол (Резников Б. Ф., 1987).
Способность бруцелл дезаминировать серии выявили Бело-баб В. И. и соавт. (1969), Меринов С. П., Широков В. А. (1971). Позднее механизм деградации бруцеллами серина, треонина и некоторые свойства ферментов, участвующих в этом процессе, изучали Широков В. А., Меринов С. П. (1976).
Исходя из полученных ранее данных о питательных потребностях вакцинного штамма Br. abortus 82 (Хазипов Н. 3. и соавт., 1973; Корунов В. П., 1974), атакже анализа литературы по данному вопросу (Передереев Н. И., Журавель Е. Ш., 1968; Вершилова П. А, 1972), Корунов В. П. (1980) подобрал компоненты полусинтетической среды, содержащей гидролизат лактальбумина фабричного производства, 1% глюкозы и набор неорганических солей и витаминов: хлорид и фосфат натрия, гипосульфат, сульфат магния, железо, марганец, тиамин, никотиновую кислоту, пантотенат кальция. Сравнение с классическим печеночно-пеп-тонным бульоном (ППБ) физико-химических характеристик показало их сопоставимость, причем количество аминного азота-одного из основных показателей качества среды—в полусинтети-
92
чз
PSST;HAE;BTBST;SS-VN;STA; НАЕВ;SPB;WBAYB;TBS;GSTB7.4 иGSTB8.5; а такжеSTB.
В настоящее время в коммерческом варианте у нас в стране для культивирования и выделения вибрионов выпускаются агаровые среды Иркутским НИПЧИ (состоит из гидролизатов казеина и кормовых дрожжей, хлорида, фосфата и метабисульфита натрия, едкого натрия и агара) и НПО «Питательные среды» г. Махачкала (щелочной и МА-агары). Ассортимент сред зарубежных производителей, работающих на нашем рынке, гораздо шире. Это агары TCBS(«Difco», «Sanofi», «Sinn»),SDS,Rippey-Gabelli(«Himedia») и другие.
компонента не обеспечивали приемлемого роста пастерелл. Показана стимуляция дыхания и роста их некоторыми аминокислотами, например лейцином и тирозином, гидролизатом рыбно-костной муки, пептоном, при индифферентном отношении популяции к добавлению пантотената кальция и валина. Вакцинные препараты, приготовленные из выращенных культур были безвредны и иммуногенны.
Попова Т. Е. (1997) сравнивала кулыурально-морфологиче-ские свойства P.multocidaпри выращивании в среде 199 и бульоне Хоттингера. Установлено влияние различных концентраций глюкозы в среде 199.