10. Определение резус-принадлежности

Определение резус-принадлежности заключается в выявлении в эритроцитах крови человека наличия или отсутствия особого белка (антигена), названного резус-фактором.

Выделяют три разновидности резус‑антигена: D, С, Е. Наи­большей активностью обладает антиген D, поэтому именно его определение имеет важное значение. Группы крови, в которых содержится антиген Rh(D), условно принято считать резус-поло­жительными (Rh+), а группы крови, не содержащие антигена Rh(D), — резус-отрицательными (Rh-).

Для определения резус-фактора в настоящее время использу­ют стандартную сыворотку, содержащую определенный титр аг­глютининов или цоликлон анти-D.

Действующим началом цоликлона анти-D являются антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов М. Они вызывают прямую агглютинацию эритроцитов, содержащих резус-фактор.

На пластину со смачиваемой поверхностью нано­сится большая капля (около 0,1 мл) реагента, рядом помещается маленькая капля (0,01—0,05 мл) исследуемой крови. Затем кровь смешивается с реагентом. Реакция агглютинации начинается через 10 — 15 с, четко выраженная агглютинация наступает через 30 — 60 с.

Использование подогретой до температуры 37 ‑ 40 °С пластинки со­кращает время наступления агглютинации. Результаты реакции учи­тывайте через 3 мин. Пластинку после смешивания реагента с кро­вью покачивают не сразу, а через 20 — 30 с, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

11. Определение индивидуальной совместимости крови

Переливание крови — серьезная операция по трансплантации живой ткани человека. Перед переливанием крови помимо опре­деления групповой и резус-принадлежности крови донора и ре­ципиента определяют индивидуальную совместимость, учитывая не только агглютиногены донора и реципиента, но и агглютини­ны крови донора.

Для работы необходимы: микроцентрифуга с пробирками; пред­метное стекло; две глазные пипетки; стеклянная палочка; 5 % ра­створ цитрата натрия; изотонический раствор натрия хлорида; кровь донора; стерильный скарификатор; спирт; эфир; йод; вата.

Из пальца реципиента берут кровь в количестве 1 — 2 мл, помещают в центрифужную пробирку, добавляют одну каплю 5 % раствора натрия цитрата и центрифугируют 10 ‑ 15 мин, для отделения сыворотки от форменных элементов.

На предметное стекло помещают каплю сыворотки реципиен­та и рядом каплю крови донора в соотношении 10 : 1, перемешивают капли стеклянной палочкой в течение 5 мин, после чего до­бавьте каплю изотонического раствора натрия хлорида. Оценивают результат — наличие или отсутствие агглютинации.

Дата печати стр. 10 из 10