учебники микра / UMP_Vozbuditeli_difterii_tuberkuleza___2023

3.Характеристика возбудителя псевдомембранозного колита, микробиологическая диагностика.

Clostridium difficile – возбудитель энтерального клостридиоза (антибиотикоассоциированная диарея). Это острое инфекционное заболевание, проявляющееся симптомами токсикоза, диарейным синдромом с развитием псевдомем-

бранозного колита.

Морфо-тинкториальные свойства: грамположительные палочки с овальными субтерминальными спорами, перетрихи.

Чистая культура C. difficile. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: облигатные анаэробы, растут на специальных питательных средах лучше в анаэробных условиях.

Факторы патогенности: токсин А (энтеротоксин) – вызывает диарею,

токсин В (цитотоксин) – нарушает функцию мембран и синтез белка.

Патогенез и клиника: заболевание развивается, как правило, на фоне приема антибиотиков. Антибиотики, подавляя резидентную микробиоту кишечника, способствуют его колонизации C. difficile, который нередко является симбионтом этого биотопа. Бактерия синтезирует токсины, поражающие толстую кишку с образованием пленки из фибрина и слизи. Заболевание проявляется приступообразными болями в животе, диареей, повышенной температурой.

Пленки из фибрина на слизистой оболочке кишечника.

21

Микробиологическая диагностика. Материал на исследовании: фекалии

1.Бактериологический метод: выделяют на специальных средах чистую культуру, которую тестируют на токсигенность.

2.ПЦР.

3.ИФА (определение токсинов).

Специфическая профилактика и специфическая терапия не разработаны.

4.Характеристика возбудителя столбняка, специфическая профилактика и лечение.

Возбудитель столбняка – Clostridium tetani.

Морфо-тинкториальные свойства: грамположительная тонкая палочка, перитрих, капсулу не имеет. Спора круглой формы, больше диаметра клетки, располагается терминально и придает клетке сходство с барабанной палочкой.

Чистая культура C. tetani. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: анаэробы, растут на соответствующих питательных средах.

Антигенная структура: О- и Н-антигены, по жгутиковому (Н) антигену выделяют 10 сероваров C. tetani.

Факторы патогенности: все серовары возбудителя продуцируют экзотоксин, состоящий из двух фракций: тетаноспазмин (нейротоксин) и тетанолизин. Основной фактор патогенности – тетаноспазмин, который блокирует все типы синаптического торможения. Тетанолизин обладает гемолитическим,

кардиотоксическим и летальным действием.

Заражение происходит при попадании спор возбудителя с почвой через поврежденные кожные покровы (небольшие царапины, ссадины, проколы на конечностях) и слизистые оболочки вследствие бытовых, производственных и

22

сельскохозяйственных травм. У новорожденных заражение происходит через пупочную ранку.

Патогенез: возбудитель размножается и остается в воротах инфекции (колотые раны). Клиника заболевания развивается только за счет экзотоксина, выделяемого возбудителем. Экзотоксин (тетаноспазмин) проникает в нервные клетки и посредством аксонного транспорта попадает в ЦНС. При этом развивается сначала местное, а затем и генерализованное подавление синаптического торможения на уровне двигательных нейронов, так как токсин препятствует выходу тормозных медиаторов в синаптическую щель. В связи с этим в мионевральных синапсах распространяются только процессы возбуждения. Это приводит к гипертонусу скелетных мышц больного и судорогам.

Клиника: симптомы столбняка развиваются по нисходящему типу (tetanus descendens) и начинаются со спазма жевательной мускулатуры (тризм), затем наступают судороги мимической мускулатуры. Позже судороги переходят на мышцы шеи, туловища и конечностей. Вследствие резкого сокращения мышц спины больной выгибается в виде дуги с опорой на затылок и пятки (опистотонус). Смерть чаще наступает от асфиксии из-за паралича мышц грудной клетки и диафрагмы.

Опистотонус. Картина сэра Чарлза Белла (шотландский физиолог и анатом, член Лондонского королевского общества).

Столбняк новорожденных (tetanus neonatorum). Протекает по типу гене-

рализованной инфекции. Вначале у ребенка нарушается акт сосания и глотания, а затем начинаются судороги. Вследствие резкого сокращения мышцсгибателей у ребенка отмечается характерная поза.

23

Микробиологическая диагностика направлена на обнаружение и опре-

деление типа токсина, а также выделение возбудителя.

Материал на исследование: кровь, фекалии, промывные воды желудка, рвотные массы, моча и остатки пищевых продуктов.

1. Определение типа ботулинового токсина:

Классический метод – реакция нейтрализации (РН) на белых мышах (см. учебно-методическое пособие «Учение об инфекции и иммунитете. Основы иммунологии»).

Экспресс-методы – РНГА по Рыцаю, ИФА.

2. Выделение возбудителя:

Бактериологический метод – посев исследуемого материала на соответствующие для анаэробов питательные среды.

Специфическое лечение: до установления типа токсина вводят полива-

лентную антитоксическую сыворотку типов A, B, E, после установления типа токсина – моновалентную антитоксическую сыворотку.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА.

1.Изучение схемы бактериологического исследования отечной жидкости при подозрении на газовую гангрену.

I этап исследования.

Посев исследуемого материала на регенерированные среды Китта-

Тароцци, Вильсона-Блера. Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов. II этап исследования.

1.Изучение характера роста на питательных средах, приготовление мазков с окраской по Граму.

2.С целью выделения чистой культуры производят пересев со среды КиттаТароцци на кровяной агар Цейсслера. Посевы инкубируют при 370С 24

часа.

III этап исследования.

1.Изучение характера роста на среде Цейсслера.

2.С целью определения -токсина (лецитиназа) производят посев чистой культуры на желточный агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа.

IV этап исследования.

1.Учет роста на желточном агаре.

2.Вывод (определение вида выделенной культуры).

2.Световая микроскопия готовых препаратов чистых культур бактероидов, возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма в окраске по Граму.

26

Занятие № 3

Тема. Микробиологическая характеристика возбудителей спирохетозных ин-

фекций, риккетсиозов, хламидиозов и микоплазмозов.

Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей сифилиса, боррелиозов,

лептоспирозов, риккетсиозов, хламидиозов и микоплазмозов,

микробиологическую диагностику вызываемых ими заболева-

ний. Освоить методы диагностики спирохетозов, хламидиозов и микоплазмозов.

I.Теоретические знания:

1.Характеристика возбудителя сифилиса, микробиологическая диагностика.

2.Характеристика возбудителей боррелиозов, микробиологическая диагно-

стика.

3.Характеристика возбудителей лептоспироза, микробиологическая диагно-

стика, специфическая профилактика.

4.Возбудитель Ку-лихорадки, диагностика, специфическая профилактика.

5.Характеристика возбудителей сыпного тифа, серодиагностика.

6.Характеристика возбудителей хламидиозов, микробиологическая диагно-

стика.

7.Характеристика микоплазм, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика.

II.Практические навыки:

1.Световая микроскопия готовых препаратов чистой культуры трепонем,

бореллий, лептоспир в окраске по Романовскому-Гимзе.

27

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Характеристика возбудителя сифилиса, микробиологическая диагностика.

Возбудитель сифилиса – Treponema pallidum.

Морфо-тинкториальные свойства: извитые бактерии (спирохеты) спи-

ралевидной формы, имеют мелкие равномерные первичные завитки, спор и капсулу не образуют. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет. При неблагоприятных условиях (действие антибиотиков и антител) трепонемы способны сохраняться в виде цист или переходить в L-форму. Подвижность трепонем связана с наличием фибрилл, которые обеспечивают различные виды движения: сгибательное, поступательное, вращательное и др.

Чистая культура Treponema pallidum.

Культуральные свойства: строгие анаэробы, плохо растут на искусственных питательных средах.

Факторы патогенности:

факторы адгезии;

факторы инвазии;

цисты и L-формы, способствующие длительной персистенции.

Сифилис – заболевание, чаще передаваемое половым путем. Сифилис – «великий» имитатор», так как имеет множество клинических проявлений.

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: половой, трансплацентарный, интранатальный, трансфузионный, контактно-бытовой.

Патогенез: возбудитель размножается в месте внедрения (слизистые оболочки половых путей, ротовой полости, прямой кишки), мигрирует в регионарные лимфатические узлы (первичный сифилис). Далее, при гематогенном и

28

лимфогенном распространении трепонем, процесс генерализуется (вторичный сифилис). Последующее размножение микробов в различных органах приводит к их грубым органическим поражениям (третичный сифилис).

Клинические формы.

Первичный сифилис проявляется формированием в месте внедрения возбудителя твердого шанкра (безболезненной язвы с плотным основанием), увеличением и воспалением регионарных лимфатических узлов (регионарный лимфаденит). Продолжительность течения первичного сифилиса – 6 недель. Затем эти признаки исчезают.

Вторичный сифилис характеризуется появлением на коже и слизистых оболочках розеолезно-папулезных высыпаний и генерализованным лимфаденитом. Эти проявления носят рецидивирующий характер. Продолжительность вторичного сифилиса колеблется от двух до пяти лет.

При отсутствии лечения возникает третичный сифилис. Во внутренних органах и костях наблюдается формирование гумм (висцеральный сифилис). Гуммы – это сифилитические гранулемы в виде плотных узлов, склонных к распаду и рубцеванию.

У пациентов без лечения и также у ВИЧ-инфицированных, может развиться нейросифилис – тяжелое поражение ЦНС (сифилитический менингит, прогрессивный паралич и др.).

При трансплацентарном инфицировании плода от больной матери развивается врожденный сифилис, который подразделяется на ранний (проявляется у детей до 2 лет) и поздний (проявляется у детей старше 2 лет).

Микробиологическая диагностика.

Для выявления возбудителя при первичном и вторичном сифилисе с клиническими проявлениями используют:

1.Бактериоскопический метод (темно-полевая микроскопия);

2.Иммуногистохимическое исследование (ИГХ);

3.ПЦР.

Для выявления антител используют серологический метод. Существу-

ют нетрепонемные и трепонемные тесты.

Нетрепонемные тесты: применяют для проведения массового скрининга населения. Это отборочные тесты. Предусматривают использование неспецифического антигена (например, экстракта липидов мышц бычьего сердца, так как он идентичен липоидному антигену трепонем).

Кнетрепонемным тестам относят:

1.Реакцию микропреципитации (РМП);

2.Другие экспресс-тесты: аналоги реакции микропреципетации (RPR, VDRL).

29

Трепонемные тесты – для подтверждения положительных результатов нетрепонемных тестов, но с использованием специфического трепонемного антигена:

1.ИФА;

2.Иммуноблоттинг (модификация ИФА);

3.РИФ;

4.РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем);

5.РПГА (РНГА);

6.ИХЛ (иммунохемилюминесцентное исследование)

Микробиологическая диагностика врожденного сифилиса.

Представляет собой комплекс нетрепонемных и двух трепонемных тестов:

1.Нетрепонемные тесты: РМП, RPR, VDRL;

2.Трепонемные тесты: РПГА, ИФА

Специфическая профилактика и лечение на разработаны.

2.Характеристика возбудителей боррелиозов, микробиологическая диагностика.

Возбудители боррелиозов – Borrelia recurrentis, B. duttoni, B. persica, B.burgdorferi, B. garini, B. afzelii.

Морфо-тинкториальные свойства: извитые бактерии (спирохеты), име-

ют крупные неравномерные первичные завитки и заостренные концы. Спор, капсул не имеют. Подвижны за счет наличия фибрилл. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.

B. recurrentis в мазке крови больного эпидемическим возвратным тифом.

Культуральные свойства: практически не культивируются на искусственных питательных средах, строгие анаэробы.

30