учебники микра / UMP_Vozbuditeli_difterii_tuberkuleza___2023

ции. Мелкие капли сохраняются в воздухе во взвешенном состоянии до 2-3 часов;

-воздушно-пылевой: МБТК накапливаются в пыли помещений, в которых находился или находится пациент с туберкулезом в течение длительного времени. Для прерывания этого пути заражения в очагах туберкулезной инфекции обязательно ежедневное выполнение уборки, которая должна быть только влажной;

-алиментарный: МБТК, находящиеся в молоке, молочных продуктах, мясе животных, больных туберкулезом, могут стать причиной инфицирования и заболевания, особенно в детском возрасте. Входными воротами инфекции в таком случае становятся лимфатические узлы пищеварительного тракта;

-контактный: МБТК могут накапливаться на предметах, которые использует пациент с туберкулезом;

-внутриутробный.

В развитии заболевания различают первичный и вторичный туберкулез. Первичные формы туберкулеза с точки зрения патогенеза характеризуются развитием гиперсенсибилизации, поражением лимфатической системы,

генерализацией и частым появлением внелегочных форм заболевания. Вторичные формы заболевания формируются в результате:

•эндогенной реактивации туберкулеза на фоне ослабления иммунитета, характеризуются формированием локальных форм;

•экзогенной суперинфекции – повторного проникновения МБТ в организм из внешней среды.

Основные клинические формы туберкулеза:

•туберкулезная интоксикация у детей и подростков;

•туберкулез органов дыхания (первичный туберкулезный комплекс,

туберкулез внутригрудных лимфатических узлов, диссеминированный туберкулез легких и др.);

•туберкулез других органов и систем.

ТУБЕРКУЛЕЗ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ. Первичный туберкулезный комплекс (очаг Гона) состоит из: (1) воспалительного очага некроза (участок затемнения),

(2) пораженных регионарных лимфатических узлов и (3) «дорожки» измененных лимфатических сосудов (лимфангит) между ними.

12

Распространение микробов может происходить бронхогенно, лимфогенно и гематогенно. При заживлении очаг воспаления рассасывается, некротические массы уплотняются, а вокруг формируется соединительнотканная капсула (очаг Гона), микобактерии трансформируются в L-формы. Активация этих очагов ведет к развитию вторичного туберкулеза.

ТУБЕРКУЛЕЗ ДРУГИХ ОРГАНОВ И СИСТЕМ: мозговых оболочек и ЦНС,

кишечника, костей и суставов, мочевых, половых органов и др.

Формы туберкулеза по бактериовыделению:

•с выделением микобактерий туберкулеза (МБТК+);

•без выделения микобактерий туберкулеза (МБТК-).

Материал на исследование:

•туберкулез легких: мокрота (сбор материала проводится в соответствии с приказом Минздрава России от 20 марта 2003 г. № 109: «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»), промывные воды бронхов, промывные воды желудка (у детей младшего возраста, которые плохо откашливают мокроту и часто проглатывают ее);

•внелегочный туберкулез: в зависимости от локализации процесса, а также мокрота не зависимо от локализации.

Микробиологическая диагностика.

1.Микроскопический: световая микроскопия с окраской по ЦилюНильсену или люминесцентная микроскопия с окраской аурамином-родамином (эффективность по сравнению со световой микроскопией выше на 10%).

2.Бактериологический (основной): посев на соответствующие питательные среды с последующей идентификацией и определением чувствительности выделенной культуры к противотуберкулезным препаратам.

С помощью культурального метода удается выявить на 20-40% больше случаев туберкулеза с бактериовыделением по сравнению с методом микроскопии.

3.Молекулярно-генетический (ПЦР): выявление в исследуемом материале ДНК МБТК и мутаций, определяющих устойчивость МБТК к некоторым противотуберкулезным препаратам (рифампицин, изониазид, фторхинолоны).

4.Аллергологический: внутрикожная проба Манту с туберкулином или проба с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (диаскинтест), который

содержит антигены только вирулентных штаммов M. tuberculosis и не содержит антигены вакцинного штамма БЦЖ.

Специфическая профилактика – живая туберкулезная вакцина BCG,

живая туберкулезная вакцина BCG-м.

13

3. Характеристика возбудителей проказы, микробиологическая диагностика.

Возбудители проказы (лепры) – Mycobacterium leprae, M. lepromatosis

(регистрируют в северной и центральной Африке).

Морфо-тинкториальные свойства: прямые или слегка изогнутые палочки, неподвижны, спор и капсулу не имеют. Кислотоустойчивы, окрашиваются по Цилю-Нильсену в красный цвет. В мазках из очагов поражения располагаются внутриклеточно шаровидными скоплениями или параллельными группами («пачки сигар»).

M. leprae в мазке из очага поражения. Окраска по Цилю-Нильсену.

Культуральные свойства: не растут на питательных средах. Являются облигатными внутриклеточными паразитами.

Лепра – хроническое генерализованное гранулематозное инфекционное заболевание, характеризующееся разнообразными по клиническим проявлениям поражениями кожи, слизистых верхних дыхательных путей, периферической нервной системы, костно-мышечного аппарата и внутренних органов.

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: воздушно-капельный, контактный.

Для проказы характерен очень длительный инкубационный период (в среднем 3-7 лет, но может удлиняться до 15-20 лет).

Патогенез: возбудитель проникает через слизистые оболочки и кожу в лимфатические и кровеносные капилляры, нервные окончания, вызывает демиелинизацию и медленно распространяется по организму. Это приводит к формированию гранулем различной поверхностной локализации.

По МКБ 10 выделяют 9 вариантов заболевания, в частности, туберкуло-

идную и лепроматозную.

Основные клинические признаки:

-интоксикация;

-характерные поражения кожных покровов;

-утолщение пораженных периферических нервов;

14

- нарушение чувствительности (температурной, болевой, тактильной).

Микробиологическая диагностика.

1.Микроскопическое исследование скарификатов кожи и соскобов со слизистой носа (окраска по Цилю-Нильсену).

2.Молекулярно-биологический метод – ПЦР.

Специфическая профилактика и специфическое лечение не разработаны.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА.

1.Изучение схемы бактериологического исследования мазков со слизистой оболочки ротоглотки и носа больного при подозрении на дифтерию.

I этап исследования.

Посев исследуемого материала на 5% кровяной агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа.

II этап исследования.

1.Изучение характера роста на кровяном агаре, приготовление мазков из подозрительных колоний, окраска по Нейссеру, микроскопия.

2.С целью выделения чистой культуры производят пересев подозрительных колоний на 10% сывороточный агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа.

III этап исследования.

1.Изучение чистоты выделенной культуры макро- и микроскопически.

2.С целью идентификации выделенной культуры производят посев в среды с глюкозой, сахарозой, мочевиной и цистином. Для определения ток-

сигенности культуры ставят реакцию преципитации в геле. IV этап исследования.

1.Учет биохимических свойств.

2.Учет пробы на токсигенность.

3.Вывод (определение вида выделенной культуры и ее токсигенности).

2.Световая микроскопия препарата из мокроты больного туберкулезом в окраске по Цилю-Нильсену.

15

Занятие №2

Тема. Микробиологическая характеристика патогенных анаэробов.

Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей неклостридиальных анаэробных инфекций, возбудителей газовой гангрены, столб-

няка, ботулизма, микробиологическую диагностику вызывае-

мых ими заболеваний. Изучить схему бактериологического ме-

тода исследования при подозрении на газовую гангрену. Изу-

чить препараты для специфической профилактики и специфиче-

ского лечения газовой гангрены, столбняка, ботулизма.

I.Теоретические знания:

1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диагностика.

2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диа-

гностика, специфическая профилактика и лечение.

3.Характеристика возбудителя псевдомембранозного колита, микробиологи-

ческая диагностика.

4.Характеристика возбудителя столбняка, специфическая профилактика и ле-

чение.

5.Характеристика возбудителя ботулизма, микробиологическая диагностика,

специфическое лечение.

II.Практические навыки:

1.Изучение схемы бактериологического исследования отечной жидкости при подозрении на газовую гангрену. Учет и интерпретация результатов иссле-

дования.

2.Световая микроскопия готовых препаратов чистых культур бактероидов,

возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма, окрашенных по Гра-

му.

16

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диагностика.

Неклостридиальные (неспорообразующие) анаэробы являются предста-

вителями симбионтной микробиоты ротовой полости, верхних дыхательных путей, кишечника, влагалища и др. биотопов макроорганизма. По таксономической характеристике они относятся к различным родам (табл. 3).

Чистые культуры неклостридиальных анаэробов. Окраска по Граму.

17

Неклостридиальные анаэробы (НА): условно-патогенные микроорга-

низмы, которые могут вызывать различные эндогенные инфекции при снижении иммунного статуса организма.

Факторы патогенности для большинства НА:

1.Факторы адгезии.

2.Капсула.

3.Ферменты патогенности (гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин).

4.Эндотоксин, цитотоксин.

НА чаще вызывают заболевания в ассоциациях, что приводит к более быстрому и тяжелому течению заболевания.

Все НА, за исключением бифидо- и лактобактерий, могут вызывать следующие гнойно-септические заболевания:

послеоперационные абдоминальные инфекции: перитонит, аппендицит, абсцесс печени;

гинекологические инфекции: септический аборт, эндометрит;

аспирационную пневмонию, абсцесс легкого;

сепсис, эндокардит;

флегмоны, абсцессы кожи и мягких тканей, остеомиелит (при ушибах и травмах);

одонтогенные инфекции после удаления или пломбирования зубов.

Лактобактерии значительно реже, чем другие НА, вызывают заболевания и могут быть причастны к формированию кариеса, острого язвенного стоматита, язвенного вульвита.

Бифидобактерии чрезвычайно редко, на фоне глубокого иммунодефицита, могут вызывать септицемию.

Микробиологическая диагностика.

Микробиологическая диагностика необходима для этиологической расшифровки заболеваний и определения чувствительности возбудителей к антибиотикам.

Материал на исследование (в зависимости от клинической формы): кровь, гной, пунктаты абсцессов и полостей, отделяемое из глубоких отделов ран, язв, свищей и др.

1.Экспресс-методы:

микроскопия нативных мазков в окраске по Граму;

газовая хроматография, основанная на обнаружении продуктов метаболизма анаэробов (летучие жирные кислоты – муравьиная, уксусная, пропионовая).

2.Бактериологический метод (основной). Материал доставляют в одноразовых шприцах или в стерильных пробирках с транспортной средой для анаэ-

18

робных микроорганизмов. Необходимое условие: быстрая (не позднее 2-х часов) доставка исследуемого материала в лабораторию. Производят посев на специальные для анаэробов питательные среды. Посевы инкубируют в анаэростатах, заполненных газовой смесью (80% N2, 10% H2 и 10% CO2), или с помощью AnaeroHiGas Pak, с дальнейшей идентификацией выделенных возбудителей и определением чувствительности к антибиотикам.

Специфическая профилактика и специфическая терапия не разработаны.

2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.

Основной возбудитель газовой гангрены Clostridium perfringens (7080%). Реже заболевания вызывают: Clostridium novyi (20-40%), Clostridium septicum (до 20%), Clostridium histolyticum (4-6%) и др.

Морфо-тинкториальные свойства: C. perfringens крупные, неподвижные грамположительные палочки, имеют капсулу, образуют спору, расположенную центрально или субтерминально. Диаметр споры превышает диаметр клетки.

Чистая культура C. perfringens. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: факультативный анаэроб. На среде КиттаТароцци – помутнение, на среде Вильсона-Блера – рост в виде черных колоний. Характерной особенностью роста возбудителя на этих средах является интенсивное газообразование с разрывами агара. На кровяном агаре Цейсслера растут в виде гладких сероватых колоний с зонами гемолиза.

Рост C. perfringens на специальной среде Вильсона-Блера.

19

Антигенная структура: выделяют 6 сероваров (A-F). Заболевания человека чаще связаны с сероваром А.

Факторы патогенности: характерной особенностью возбудителей газовой гангрены является многообразие продуцируемых токсинов, обозначаемых буквами греческого алфавита. Причем, у каждого вида и серовара свой набор ток-

сических факторов, которые представляют собой не только экзотоксины, но

и различные ферменты патогенности:

α-токсин (лецитиназа С) обладает дермонекротическим действием, что приводит к некрозу мышечной ткани. Лецитиназа также вызывает лизис эритроцитов и повреждает липидные мембраны нервных клеток;

коллагеназа, гиалуронидаза, ДНК-аза, гемолизин – усиливают действие α-

токсина;

энтеротоксин (экзотоксин) – вызывает пищевые отравления при массивном обсеменении пищевых продуктов (см. учебно-методическое пособие «Основная бактериальная патология желудочно-кишечного тракта»).

Газовая гангрена чаще возникает при различных травмах вследствие инфицирования ран почвой, содержащей споры возбудителя.

Признаки газовой гангрены.

1.Некроз мышечной ткани.

2.Интенсивное накопление газов (H2, CO2, H2S, аммиак и др.) в пораженных тканях, что определяется при пальпации кожных покровов (симптом крепитации).

3.Обширный отек тканей. Из раны выделяется серозно-геморрагический экссудат с гнилостным запахом.

4.Сепсис и синдром токсического шока, что обычно приводит к летальному исходу.

Микробиологическая диагностика.

Материал на исследование: мазки-отпечатки из раны, кусочки некротизированных тканей, отечная жидкость, перевязочный материал, кровь (при подозрении на сепсис).

1.Бактериоскопический метод: микроскопия мазков-отпечатков в окраске по Граму.

2.Бактериологический метод (основной): посев исследуемого материала на специальные среды с целью выделения и идентификации возбудителя.

3.ПЦР.

Специфическая профилактика: при ранениях и травмах – поливалент-

ная противогангренозная антитоксическая сыворотка (против C. perfringens, C. novii, C. septicum).

Специфическое лечение: поливалентная противогангренозная анти-

токсическая сыворотка (против C. perfringens, C. novii, C. septicum).

20