Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Микра_Практ

.pdf
Скачиваний:
16
Добавлен:
10.06.2023
Размер:
5.6 Mб
Скачать

99

Общепринятым показателем санитарно-микробиологического ис­ следования воды является показатель коли-индекс, т. е. количество бак­ терий группы кишечных палочек в I л воды или коли-титр - наимень­ шее количество или наибольшее разведение воды, в котором еще обна­

руживается кишечная палочка.

Задание

Определить количество микроорганизмов (микробное число) в во­

допроводной воде и загрязненных водах.

Работа 29. Микробиолоrические методы исследования

воздуха

Воздух не является средой обитания микроорганизмов, а является

транзитной средой.

Микрофлору воздуха можно условно разделить на постоянную,

часто встр<ечающуюся, и переменную, представители которой, попадая в воздух из свойственных им мест обитания, недолго сохраняют жизне­

способносtь. Постоянно в воздухе обнаруживаются пиrментообразую­ щие кокки, палочки, дрожжи, грибы, актиномицеты, спороносные ба­

циллы и клостридии и др., т. е. микроорганизмы, устойчивые к свету, высыханию. В воздухе крупных городов количество микроорганизмов

больше, чем в сельской местности. Над лесами, морями воздух содер­

жит мало микробов (в 1 м3 - единицы микробных клеток). Дождь и снег

способствуют очищению воздуха от микробов.

В воздухе закрытых помещений микробов значительно больше, чем в открытых воздушных бассейнах, особенно зимой, при недоста­

точном проветривании. Состав микрофлоры и количество микроорга­

низмов, обнаруживаемых в 1 м3 воздуха (микробное число воздуха),

зависят от санитарно-гигиенического режима, числа находящихся в по­

мещении людей, состояния их здоровья и других условий.

В воздух моrут попадать и патогенные микроорrанизмы от живот­

ных, людей (больных и носителей).

Для миkробиологическоrо исследqвания воздуха пользуются мето­ дами, в основу которых положены оседание (седиментация) и аспирация.

При помощи седиментационных методов можно получить общее пред­

ставление о встречающихся в воздухе микроорганизмах,_Аспирационные

методы дают возможность определить не только качественное, но и ко­

личественное содержание бактериif в определенном объеме воздуха. Метод оседания.- Простейший метод бактериологического иссле­

дования воздуха - метод оседания, который основан на оседании бакте-

101

Среди приборов для исследования воздуха помещений самым рас­ пространенным является прибор Кротова. Механизм улавливания мик­

рофлоры основывается на ударно-прибивном действии струи воздуха, который проходит через узкую клиновидную щель и с большой скоро­ стью ударяется о влажную поверхность питательной среды. В результате удара находящиеся в воздухе аэрозоли, в том числе содержащие бакте­ рии пылевые частицы и капли, прибиваются к поверхности МПА или элективнь1х сред. Во время отбора пробы воздуха чашка Петри вращает­

ся вместе со столиком, благодаря чему достигается равномерное обсеме­

нение поверхности агара мmсрофлорой воздуха. Дпя отбора проб следует

подбирать чашки Петри с плоским дмом, а количество mrrательной сре­ ды в чашке не должно превышать 15 мл.

Прибор Кротова характеризуется эффективностью улавливания

микрофлоры в пылевой фазе аэрозоля, дает четкие сопоставимые ре­ зультаты, прост в_работе, позволяет за короткое время произвести отбор проб воздуха непосредственно на чашки Петри с МПА или элективны­

ми средами. Производительность прибора от 20 до 40 л/мин. Основной недостаток прибора состоит в том, что он нуждается для работы в элек­

троэнергии; это ограничивает возможности его применения для иссле­

дования атмосферного воздуха.

Для исследования атмосферного воздуха используется ряд прибо­

ров, в которых аэрозоль улавливается в жидкую среду. Принцип уст­

ройства этих приборов прост. Они представляют собой стеклянные ем­

кости, в которых через отверстия в пробке пропущены две трубки. Одна

трубка кончается чуть ниже пробки и соединена с аспиратором, другая - опущена на дно цилиндра, куда поступает исследуемый воздух. В ци­ линдр наливают стерильный изотонический раствор хлорида натрия или водопроводную воду (жидкости, необразующие пену) и через нее про­

сасывают определенный объем воздуха. В качестве аспиратора могут быть использованы воздуходувки, пылесосы, насос. Посев жидкости производят на питательный arap или дифференциальные среды. На

МПА засевают по 0,1-0,2 мл улавливающей жидкости, а на элективные среды - по 0,3-0,5 мл.

Для исследования атмосферного воздуха используются также при­

боры-бактериоуловители. т. е. трубки с размещенными в них плотными фильтрами (хлопчатобумажная или стеклянная вата). После окончания отбора пробы воздуха в количестве 100--300л ватный тампон помещают

в склянку с изотоническим раствором хлорида натрия и тщательно от­

мывают встряхиванием со стеклянными бусами. Полученную суспен-

102

зию подвергают бактериологическому анализу посевом на поверхность

плотных питательных сред.

Мембра11ные фильтры. Для бактериологического исследования воздуха могут быть использованы стерилизованные и высушенные мем­ бранные фильтры №4. При помощи воздуходувки через фильтр проса­ сывают воздух. Мембранные фильтры должны быть хорошо просушены, так как мокрые и даже влажные фильтры практически воздухонепрони­ цаемы. Преимуществом метода мембранных фильтров является их пор­

тативность и возможность концентрировап" на них микроорганизмы из

относительно больших объемов воздуха. Мембранные фильтры могут

быть использованы при исследованиях атмосферного воздуха в зимних

условиях.

Для обнаружения вирусов в воздухе наиболее целесообразно ис­

пользовать приборы, в которых улавливание вирусного аэрозоля осуще­

ствляется в жидкой улавливающей среде.

8 зависимости от поставленной задачи исследования микрофлоры

воздуха и условий отбора проб могут проводиться определения общей бактериальной обсемененности воздуха, содержания санитарно­

показательных микроорганизмов и наличия патогенных или условно­

патогенных микроорганизмов.

Пробы воздуха следует отбирать на уровне дыхания сидящего или

стоящего человека.

З~ание

Определить содержание микроорганизмов в воздухе лабораторных

помещений методом седиментации и с помощью аппарата Кротова.

Работа 30. Микробиологические методы исследования

пищевых продуктов и других твердых

продуктов

Порядок взятия проб, методы их исследования и нормативы каче­ ства регламентируются серией ГОСТ или другой нормативно­

технической документацией.

Исходным материалом для посевов продуктов плотной консистен­ ции обычно является IО %-ная взвесь продукта. Для ее приготовления

стерильно взятую из разных мест пробы навеску (обычно 15 r) измель­

чают в гомогенизаторе (или растирают в стерильной ступке), прибавляют 135 мл стерильной водопроводной воды или изотонического раствора

хлорида натрия. Жидкие и полужидкие продукты тщательно перемеши-

103

вают и в случае резко кислой реакции подщелачивают 10% стерильным

раствором бикарбоната натрия до рН 7,2-7,4. Жидкий продукт или по­

лученную взвесь плотного продукта используют для приготовления

ряда десятикратных разведений в зависимости от характера продукта и·

от предполагаемого обсеменения.

,

Общую обсемененность или общее количество бактерий в I r/мл nродукТс1 учитывают по росту колоний мезофильных микроорганизмов

на мясо-пептонном arape.

Тема 8. Участие микроорганизмов

впревращении веществ и энергии

вбиосфере (биогеохимические циклы превращения веществ)

Микроорганизмы принимают активное участие в биогеохимиче­

ских циклах ~евращения веществ в биосфере. Глобальное значение

имеет деятельность микроорганизмов в циклах углерода, азота и серы.

Процесс круговорота углерода состоит из синтеза и минерализации ор­

ганических веществ. Ежегодно накапливаемое органическое вещество в

процессе фотосинтезирующей деятельности, главным образом, расте­

ний и водорослей перерабатывается на разных. уровнях жизни консу­ ментами и деструкторами. К первым принадлежат, в основном, живот­

ные, ко вторым - rриqы и бактерии. Последовательность этих событий выражается в трофических цепях или цепях питания. Конечное, дест­

руктивное, звено этой цепи - минерализация органических веществ с

возвратом СО2 в атмосферу - осуществляется гетеротрофными микро­

организмами.

Первыми деструкторами природных биополимеров (белки, нук­

леиновые кислоты, rемицеллюлоза, пектин, крахмал, целлюлоза, лигнин

и др.) могут выступать лишь те микроорганизмы, которые синтезируют

гидролитические ферменты. В аэробной зоне к таким микроорганизмам

относятся грибы, некоторые, главным образом, грамположительные бактерии, в том числе и актиномицеты. В анаэробной зоне - это только бактерии, в основном из группы клостридий. В аэробной зоне происхо­ дит практически полное превращение полимеров с освобождением СО2• В анаэробных условиях в процессе первичного разложения органиче­

ских веществ в качестве продуктов распада образуются жирные кисло­

ты, спирты и молекулярный водород, которые частично используются

105

При разложении остатков животных, растений, микроорганизмов

освобождаются серосодержащие аминокислоты, тиоспирты, тиофенолы,

тиоэфиры, гетероциклические соединения, в которых сера находится в

восстановленном состоянии.

В цикле превращения серы участвуют разнообразные rруппы мик­ роорганизмов, бактерий и архебактерий, аэробных, анаэробных, хемо- и фототрофов (рис. 28).

Sx молекулярная

2

SO/·; S20/·

 

 

 

 

 

1

17

 

 

 

 

з

 

 

 

 

 

 

5

 

 

 

 

 

 

s2-

 

SO/·

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

вi

 

 

 

1

-----

 

 

 

 

14

 

 

 

 

------

 

 

 

 

Органические

 

1

 

 

L.-.

- ..,

 

 

 

 

 

 

 

 

 

соединения серы

Рис..28. Цикл превращения среды:

1

11

/tl

I - аосстановительffые процессы: II - без перемены валентности серы; lfl - окислительные процессы. Возбудители процессов: / - бесцветные серобакте­ р11и, тионовые (е аэробныхуслов11ЯХ) и фотосинтезирующие серные бактерии (в

анаэробныхусловиях): 2,3- тионовые бактерии, архебактерий; 4- всемикроор­ ганизмы и ра(3_mения (ассимиляция); 5 - сульфатрвдуциру_ющие бактерии; 6 -

термоацидофильные анаэробные бактерии; 7 - облигатно анаэрабные термо­

фильные К11Остриди11

В аэробных условиях окислительные процессы серы и ее восста­ новленных неорганических и органических соединений осуществляют

хемоавтотрофные прокариоты (серные, тионовые бактерии), а также некоторые типичные гетеротрофные бактерии родов Bacillus, Pseudo-

monas идр.

·

В анаэробных процессах участвуют фототрофные серные пурпур­

ные и зеленые бактерии, осуществляющие бескислородный фотосинтез.

При ассимиляции сульфатов, как источника серы, происходит вос­ становление серы в процессах конструктивного метаболизма - ассимиля­

ционная сульфатредукция. Биологическое закрепление растворимых

сульфатов в микробных клетках называется также иммобилизациейсеры.

Соседние файлы в предмете Биотехнология