диссертации / 49

71

полученные результаты, нами отмечено, что в случаях с диагностированной

преэклампсией выявлялись патологически низкие уровни а-АТ к ДНК и одному

из почечных а-АТ.

Таблица 14.

Диагностика преэклампсии при одновременном снижении уровней 3

аутоантител (в том числе а-АТ к ДНК и одному из почечных антигенов),

чувствительность и специфичность

Примечание: * - результаты обследования всех беременных с ПЭ

** - результаты обследования всех пациенток, беременность которых не осложнилась ПЭ

Таким образом, в соответствии с данными, представленными в таблице 14, сывороточное содержание а-АТ в количестве 55% и менее от реакции КС для, по меньшей мере, трех из исследованных видов аутоантител, один из которых относился к а-АТ почечной ткани, а другой – к двуспиральной ДНК можно считать достоверным диагностическим маркером развития преэклампсии у беременных (патент на изобретение № 2483311 от 27.05.2013 г.).

72

Диаграмма 9.

Диагностика преэклампсии при одновременном снижении уровней 3

аутоантител (в том числе а-АТ к ДНК и одному из почечных антигенов)

Как видно на диаграмме 9, вероятность получения истинноположительных результатов при данном алгоритме интерпретации результатов обследования достаточно высока и соответствует 91,4%. Сравнительно с этим количество полученных ложноотрицательных результатов ничтожно мало (8,6%). Оценка чувствительности и специфичности говорит о высокой диагностической ценности данного метода.

Для лучшего понимания производимых расчетов, предполагающих методику Эли – теста, мы предлагаем использовать следующую формулу:

для каждого вида исследованных методом ИФА антител определяют показатель К = N/NK, где

N – абсолютное содержание аутоантител в опытной сыворотке (в ед. опт.

плотности),

NK – абсолютное содержание аутоантител в контрольной сыворотке,

соответствующее нормальной иммунореактивности.

При показателе К меньшем или равном 0,55 по меньшей мере для трех видов аутоантител, один из которых относится к антителам к почечной ткани, а другой

73

– к двуспиральной ДНК, с высокой степенью достоверности диагностируют преэклампсию у беременной.

В проведенном нами исследовании отмечен некоторый дисбаланс в содержании а-АТ в подгруппах 2А и 2Б. В то время как в группе 1 характерно равномерное снижение содержания всех исследуемых а-АТ, при сочетанных формах преэклампсии и в подгруппе 2А отмечена некоторая тенденция к повышению уровня тромбоцитарных антител. Кроме того, при сравнении подгрупп 2А и 2Б выявлено снижение маркеров почечной патологии ниже 55%

от реакции КС у 24 (96%) обследованных в подгруппе 2Б и лишь у 9 (25%)

подгруппы 2А, что, несомненно, может быть также использовано с дифференциально-диагностической целью при верификации диагноза

«преэклампсия» у пациенток с хронической артериальной гипертензией.

Помимо этого, стоит отметить, что у пациенток из подгруппы 2А, исходно страдающих хронической артериальной гипертензией, не отмечено существенных отличий в сывороточном содержании определяемых аутоантител в сравнении с контрольной группой.

Полученные результаты сравнения пациенток подгруппы 2А с контрольной группой не показали достоверной разницы, в отличии от сравнения групп беременных с преэклампсией (группа 1 и подгруппа 2Б) и контрольной группы

(табл. 12, диаграмма 7). Это позволяет сделать вывод, что наличие сопутствующей артериальной гипертензии не влияет на результаты обследования при выявлении преэклампсии у беременных в случае использования данной панели а-АТ.

Из таблиц 12, 13, 14 и диаграмм 7, 8, 9 видно, что уровень а-АТ при различных формах преэклампсии значительно ниже уровня, характерного для физиологического течения беременности.

Таким образом, наиболее характерной особенностью беременных как с чистой, так и с сочетанной преэклампсией явилось выраженное снижение сывороточного содержания всех исследовавшихся а-АТ, т.е. поликлональная

74

иммуносупрессия. Некоторый иммунологический дисбаланс был типичен и для женщин с ХАГ, но не для женщин контрольной группы.

3.1.2. Сравнительный анализ уровней аутоантител у беременных

сумеренной и тяжелой преэклампсией

Вгруппе 1 и в подгуппе 2Б проведено сравнительное исследование уровней аутоантител у пациенток с преэклампсией в зависимости от степени тяжести

(табл. 15).

Табл. 15

Содержание ряда а-АТ у пациенток с умеренной и тяжелой преэклампсией

Примечание: * р <0.05 при сравнении уровней а_АТ у беременных с умеренной и тяжелой преэклампсией.

Как следует из представленных в таблице 15 данных, выявлена статистически достоверная разница при сравнении уровней аутоантител у беременных с умеренной и тяжелой преэклампсией (группа 1 и подгруппа 2Б). Степень тяжести преэклампсии обратно пропорциональна уровню а-АТ в сыворотке крови. Таким образом, можно сделать вывод, что нарастание степени тяжести преэклампсии коррелирует со снижением уровня а-АТ в сыворотке крови. При

75

этом особенно показательным является сывороточное содержание а-АТ к ДНК,

Kis-07-120, HMMP.

Заслуживает внимания и тот факт, что при сравнении беременных с преэклампсией разной степени тяжести, выраженное снижение гепатотропных а-АТ (HMMP) в большинстве случаев отмечено у пациенток с тяжелыми формами преэклампсии (табл. 16, диаграмма 10).

Таблица 16.

Оценка чувствительности и специфичности диагностики тяжелой

преэклампсии при выявлении низких титров а-АТ к HMMP

Примечание: * - результаты обследования всех беременных с тяжелой преэклампсией

** - результаты обследования всех беременных с умеренной преэклампсией

Из таблицы 16 видно, что чувствительность (81,0%) и специфичность

(81,3%) диагностики тяжелой преэклампсии при выявлении патологически низких титров гепатотропных а-АТ достаточно высока. Патологически низкие уровни гепатотропных а-АТ соответствовали в нашем исследовании диапазону

18-46% от реакции контрольной сыворотки.

76

Диаграмма 10.

Чувствительность и специфичность диагностики тяжелой преэклампсии

при уровнях а-АТ к HMMP в интервале 18 — 46% от реакции КС

Наши данные совпадают с данными В.С. Мериакри (1993), который обнаружил резкое снижение Ig G в плазме крови прямо пропорционально тяжести преэклампсии [65]. Таким образом, определение уровня гепатотропных а-АТ (а-АТ к HMMP) может быть дополнительно использовано, как метод диагностики тяжелой преэклампсии и прогнозирования нарастания степени тяжести преэклампсии.

3.1.3. Иммунологические изменения при преэклампсии на доклиническом этапе При динамическом исследовании показателей аутоиммунитета у некоторых пациенток уже при первом обследовании уровни исследуемых аутоантител были достоверно ниже показателей у здоровых беременных. Учитывая, что сывороточное содержание а-АТ в количестве 55% и менее от реакции КС для, по меньшей мере, трех из исследованных видов аутоантител, один из которых относился к а-АТ почечной ткани, а другой – к двуспиральной ДНК с высокой диагностической точностью может указывать на развитие преэклампсии у беременных (патент на изобретение № 2483311 от 27.05.2013), в проведенном

77

исследовании нами была предпринята попытка использования Эли – теста для ранней доклинической диагностики преэклампсии.

У части обследованных уровень аутоантител, соответствующий развитию преэклампсии, определен задолго до появления клинической симптоматики и верификации диагноза общепринятыми лабораторными методами. На момент обследования клинические проявления преэклампсии отсутствовали: не было патологической прибавки массы тела, скрытых отеков, гипертензии,

протеинурии. Исследование уровней а-АТ у данных пациенток было включено в программу текущего обследования беременных на этапе наблюдения в женской консультации. Характерная клиническая картина преэклампсии разворачивалась спустя 2–4 недели после проведенного исследования, тогда же диагноз преэклампсии был окончательно верифицирован (диаграмма 11).

Диаграмма 11.

Соотношение уровня а-АТ и уровня протеинурии в динамике

78

Спустя 2–4 недели после проведенного исследования у данных пациенток клинически выявлялась гипертензия, отеки, лабораторно была выявлена протеинурия.

Результаты клинико-иммунологических анализа позволяют предполагать, что одним из непосредственных патогенетических факторов развития преэклампсии может явиться аномальное снижение продукции многих а-АТ, участвующих в механизмах клиренса. Последнее сопровождается нарушением утилизации фрагментов клеток, отмирающих в ходе физиологического апоптоза и снижение эффективности клиренса организма от других продуктов катаболизма. Эти нарушения, в свою очередь, запускают каскад реакций или процессов,

приводящих к нарушениям микроциркуляции, в частности, за счет усиления микротромбообразования с последующим развитием эндотелиальной дисфункции, поражением паренхиматозных органов и формированием типичной синдромальной картины преэклампсии.

3.1.4. Корреляционный анализ уровней аутоантител в группах обследованных В нашем исследовании у пациенток с преэклампсией проведен

корреляционный анализ между исследуемыми показателями аутоиммунитета, а

также уровнями а-АТ и данными общепринятых лабораторных исследований,

при проведении которого мы вычисляли коэффициент корреляции, который од-

ним числом дает представление о направлении и силе связи между признаками

(явлениями), пределы его колебаний от 0 до ± 1.

Результаты изучения корреляционной связи представлены двумя способами:

1.график (диаграмма рассеяния)

2.коэффициент корреляции

Проведена оценка направления корреляционной связи (прямая, oбратная), сила корреляционной связи:

-сильная: ±0,7 до ±1

-средняя: ±0,3 до ±0,699

79

-слабая: 0 до ±0,299

Внастоящем исследовании выявлено наличие корреляции между уровнем а-АТ к ДНК и а-АТ к Tr — 0,01 (табл. 17, диаграмма 12).

Таблица 17.

Корреляционный анализ между уровнем а-АТ к ДНК и а-АТ к Tr — 0,01

Диаграмма 12.

Корреляционный анализ между уровнем а-АТ к ДНК и а-АТ к Tr — 0,01

80

Корреляция между остальными показателями аутоиммунитета выявлена только у беременных в 3 группе – с физиологически протекающей беременностью. Это, вероятно, можно объяснить тем, что последовательность и стадийность нарушений при преэклампсии также последовательно отражается на изменении сывороточного содержания отдельных аутоантител. Возможно поэтому корреляция получена только в норме, в состоянии физиологического баланса.

Отсутствие четкой корреляционной связи между различными показателями аутоиммунитета в приведенном исследовании указывает на необходимость использования в диагностике всей панели аутоантител, а не ориентироваться на изменения отдельно взятых показателей.

В группе 1 и в подгруппе 2Б проведен корреляционный анализ между показателями аутоиммунитета у пациенток с тяжелой преэклампсией.

Корреляция между уровнем а-АТ к ДНК и Tr-0,01 выявлена в обеих группах

(табл. 18).

Таблица 18.

Корреляционный анализ между уровнем а-АТ к ДНК и а-АТ к Tr-0,01 у

беременных с тяжелой преэклампсией

Как представлено в таблице 18, снижение показателя общей иммуносупрессии

(а-АТ к ДНК) коррелирует со снижением а-АТ, тропных к антигенам мембран тромбоцитов у беременных с тяжелой преэклампсией, что указывает на наличие функцциональных изменений тромбоцитарного звена гемостаза.

Корреляция между уровнем а-АТ к ДНК и а-АТ к Kim 05-300 выявлена в обеих группах (табл. 19).