Тема 12. Изучение защитных свойств организма

В защите организма от патогенных воздействий важную роль играет ретикуло-макрофагальная система, функцио­нальное состояние которой зависит от нервной деятельности. Основной функцией клеток РМС является способность их поглощать вещества, попавшие в кровь.

Цель занятия: на лабораторных животных познакомить­ся с некоторыми методами изучения функции ретикуло-эндо-телия.

Опыт 1. Определение конгоротового индекса

Оборудование: центрифуга, центрифужные пробирки, ге­мометр, пипетки, шприц стерильный, конгорот — 1% р-р, лимоннокислый натр 5%, дистиллированная вода, кролик.

Порядок работы. В две центрифужные пробирки налить по 1 мл лимоннокислого натра. Кролику в ушную ве­ну ввести 4 мл 1 % р-ра конгорота и ровно через 4 мин взять кровь, обозначив ее № 1. Через 30 мин в другую цен­трифужную пробирку снова взять кровь, в которой также есть раствор лимоннокислого натра. Эту кровь обозначим

45

№ 2. Обе пробирки отцентрифугировать, получить плазму й перенести в пробирки гемометра для колориметрии. Плаз­му в пробирку берут до метки 20. К плазме № 1 доливать дистиллированную воду до тех пор, пока окраска в обеих про­бирках станет одинаковой при рассматривании сбоку. Под­считать деления добавленной воды и разделить их на 20 (число делений взятой плазмы). Полученное число называ­ется конгоротовым индексом.

Расчет: к плазме № 1 для получения одинаковой окрас­ки добавлено 9 делений 9:20=0,45 (конгоротовый индекс).

Опыт 2. Поглощение клетками РМС полуторахлористого железа

Лягушку фиксируют на дощечке брюшком кверху и от­крывают доступ к сердцу- Вводят уколом шприца в верхуш­ку сердца 1 мл 1 % р-ра полуторахлористого железа. Ля­гушку оставляют лежать в течение 10—!1б мин , потом ее вскрывают, нарезают ножницами кусочки всех органов и кладут их в чашку с дистиллированной водой для отмыва­ния от крови. Затем кусочки стеклянной палочкой переносят в чашку с 5% р-м соляной кислоты для отмывания, после чего их переносят в чашку с 5% р-м желтой кровяной соли, а потом переносят на чистый лист бумаги. В результате ре­акции, происходящей между железом, захваченным клетка­ми PlMC и желтой кровяной солью, в кислой среде образу­ется краска берлинской лазури, придающая органам зеле­ную окраску. Сильнее всего окрашиваются кусочки органов, содержащих большое количество клеток ретикуло-макрофа-гальной системы. Интенсивность окраски отмечается креста­ми: сильная окраска — четырьмя, средняя — тремя, сла­бая — одним.

Иммунопатология

Тема 13. Аллергия и аллергические заболевания

Цель занятия: получить в эксперименте развитие в орга­низме некоторых аллергических реакций на антигенный раз­дражитель и изучить их основные механизмы,

46

Аллергия — состояние извращенной чувствительности ор­ганизма к веществам с антигенными свойствами или даже без них. Одной из форм проявления аллергии является ана­филаксия. Анафилаксия может быть как общая, так и ме­стная. Общая анафилаксия проявляется в виде анафилакти­ческого шока — это тяжелая своеобразная реакция организ­ма в ответ на воздействие чрезмерных раздражителей, кото­рая сопровождается расстройством нервной регуляции, кро­вообращения, дыхания, обмена веществ, функции желез вну­тренней секреции.

Существуют две теории, объясняющие патогенез шока: гуморальная и клеточная.

По течению различают три вида шока: острый, подост-рый и хронический.

Сенсибилизировать животных м'ожно различными путя­ми, а именно: введением антигена подкожно, интраперитоне-ально, интравенозно и т. д.

Анафилаксия — состояние повышенной чувствительности организма к повторному парентеральному введению гомоло­гичного антигена.

Сенсибилизация — повышенная чувствительность орга­низма к антигену.

Десенсибилизация — устранение повышенной чувстви­тельности организма к антигену, ранее введенному в орга­низм, особенно белков.

Аллергены — вещества, вызывающие у животных состо­яние повышенной чувствительности.

Аутоаллергены — аллергены, образовавшиеся в больном организме из его собственных тканей под влиянием различ­ных повреждающих факторов.

Идиосинкразия — врожденная, а иногда приобретенная повышенная чувствительность организма к некоторым ве­ществам.

Опсонины — белки сыворотки крови, облегчающие ма­крофагам фагоцитоз бактерий.

Сывороточная болезнь — аллергическая реакция орга­низма в ответ на введение, минуя пищеварительный тракт, чужеродного белка (сыворотки).

47

Опыт 1. Реакция сердца сенсибилизированной лягушки

на антиген

Порядок работы. Лягушек предварительно сенси­билизируют лошадиной сывороткой, вводя в лимфатический мешок но 0,3 мл лошадиной сыворотки (трех-, пятикратное введение с 3—4-дневными промежутками). После фиксации сенсибилизированной лягушки на дощечке брюшком кверху обнажают мышцы грудной стенки. С помощью пинцета зах­ватывают и приподнимают мышцы грудной стенки и груди­ну в области мечевидного хряща. После удаления нижней половины грудины обнажают сердце от перикарда. Серфи-ном (или крючком), соединенным с плечом рычажка для за­писи, ^захватывают верхушку сердца. Затем наносят на серд­це сенсибилизированной лягушки 5—8 капель лошадиной сы­воротки. Наблюдают изменение сокращений сердца: непра- вильный ритм сердца. Кратковременное усиление амплиту­ды сокращений с последующим ослаблением и. временной

остановкой.

Деятельность сердца может постепенно восстановиться после отмывания его физиологическим раствором.

Опыт 2. Анафилактический шок у морской свинки

(демонстрация)

Порядок работы. Предварительно производят сен­сибилизацию морской свинки введением ей подкожно 0,1— 0,05—0,2 мл лошадиной сыворотки. На высоте развития сенсибилизации (18—21-й день, не ранее чем через 8— 10 дней) морской свинке вводят 0,5—1,0—1,5—2,0 мл лоша­диной сыворотки внутривенно или в сердце. Наблюдают за . развитием анафилактического шока. Делают запись резуль­татов опыта, анализируют, делают выводы.

Опыт 3. Острый анафилактический шок у кролика

Порядок работы. С целью сенсибилизации кроли­ку вводят под кожу 0,2—0,5 мл антигена (лошадиной сыво­ротки), инъекции повторяют 5—6 раз через 5—16 дней. Раз­решающую дозу антигена в количестве 2—3 мл вводят в яремную вену шприцем. Обычно через 1—2 мин у животного

48

наблюдают анафилактический шок в виде некоторого воз­буждения и кратковременного повышения кровяного давле­ния. В дальнейшем отмечаются резкая одышка и падение кровяного давления.

Оснащение: морские свинки, лягушки, кролики, сенсиби­лизированные лошадиной сывороткой, термометр (электри­ческий), шприцы, аппарат для измерения кровяного давле­ния.

Вопросы к теме

1. Определение аллергии, анафилаксии, анафилактиче­ского шока и механизм его развития.

2. Специфическая и неспецифическая десенсибилизация и антианафилаксия.

3. Клиническая картина острого и подострого анафилак-­ тического шока.

4. Теории анафилактического шока: гуморальная и цел- люлярная.