Вопрос 29(коа)

Этот тип иммунологической реакции основан на способности специфических антител — антитоксинов подавлять биологическую активность экзотоксинов бактерий.

Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой in vitro 1) Реакция флокуляции. Феномен флокуляции — помутнение — внешнее проявление образования комплекса экзотоксин (анатоксин) + антитоксин в оптимальных количественных соотношениях ингредиентов.

Реакция применяется: - для определения специфической активности токсинов (анатоксинов) по стандартной антитоксической сыворотке (МЕ/мл), - для титрования антитоксических сывороток по известному анатоксину или токсину (метод Рамона). Активность сывороток выражается в МЕ/мл принимается то минимальное количество сыворотки, которое даёт интенсивную «инициальную» флокуляцию. Например, эта реакция применяется для определения активности дифтерийного, столбнячного, ботулинического, гангренозного анатоксинов и титрования противодифтерийной, противостолбнячной, протиаоботулинической, прогивогангренозной и др. антитоксических сывороток.

 Реакция нейтрализации на животных применяется: - для определения специфической активности анатоксинов по стандартной антитоксической сыворотке и по опытной дозе токсина. Активность анатоксинов выражается в единицах связывания (ЕС), ЕС -количество анатоксина, которое целиком связывается с ШЕ/мл антитоксической сыворотки; - для идентификации бактерий (возбудители газовой анаэробной инфекции, столбняка, ботулизма и др.) по стандартной антитоксической сыворотке; - для титрования антитоксических сывороток (противодифтерийная, противостолбнячная и др.) по стандартному токсину. Специфическая активность сывороток выражается в международных антитоксических единицах (МЕ). 1МЕ —минимальное количество сыворотки, которое способно нейтрализовать определенную дозу токсина, выражающуюся в стандартных единицах: смертельных, некротических или реактивных дозах, в зависимости от вида токсина и способа титрования.

Титрование антитоксических сывороток по известной смертельной (опытной) дозе токсина.

Проводится в 2 этапа: 1) определение опытной дозы токсина. Смертельная доза — это количество токсина, которое в смеси с 1МЕ стандартной сыворотки вызывает гибель 50 % взятых в опыт животных; 2) к различным разведениям испытуемой сыворотки добавляют опытную дозу токсина, инкубируют 45 минут и вводят животным. По результатам производят расчет титра сыворотки.

Вопрос 30

Реакция флоккуляции(РФ) –

ПРИМЕНЕНИЕ: используется для титрования

антитоксических сывороток, токсинов и анатоксинов.

В реакции флоккуляции в качестве антигена участвует токсин или анатоксин. При

смешивании их в эквивалентных соотношениях с антитоксической

сывороткой появляется помутнение, а затем рыхлый осадок. Механизм РФ

сходен с таковым реакции преципитации.

В реакциях флоккуляции участвуют в качестве компонентов

токсины, анатоксины, антитоксины (антитоксические сыворотки).

Необходимым условием  флокуляции  является адсорбция одной макромолекулы или ассоциата макромолекул на нескольких частицах и образованием хлопьев, состоящих из частиц, связанных полимерными мостиками.

Реакция состоит в том, что при смешении токсина с соответствующей иммунной сывороткой происходит помутнение в ряде пробирок. Сначала в одной из них, а затем и в других ближайших к ней выпадает хлопьевидный осадок (флокулят). Этот ряд давших помутнение и осадок пробирок называется «зоной   флокуляции », а пробирка, в к-рой раньше других выпал флокулят, называется пробиркой «инициальной»  флокуляции . Выпадение осадка происходит при условии полной нейтрализации токсина антитоксином. Инициальная Ф. обычно соответствует той предельной дозе антитоксической сыворотки, к-рая еще способна обезвредить данное количество токсина. Поэтому по инициальной Ф. можно вычислить антитоксический титр сыворотки. С другой стороны, зная сколько антитоксических единиц содержится во взятой дозе сыворотки, можно по инициальной Ф. определить и антигенную силу токсина.