7.4. Реакция аминокислот с формальдегидом

При взаимодействии α-аминокислот с формальдегидом образуются имины. Реакция протекает с участием аминогруппы через промежуточное образование относительно устойчивых продуктов присоединения к карбонильной группе формальдегида – так называемых формольных производных:

Поскольку водный раствор аминокислоты (амфотерного соединения) имеет значение рН, близкое к 7, а в ходе реакции по аминогруппе оснóвный центр исчезает, то реакция сопровождается понижением рН.

Эта реакция лежит в основе количественного определения α-аминокислот методом формольного титрования (метод Серенсена).

Выполнение работы

Реактивы	Исследуемые вещества	Вещества для холостого опыта
формалин (40% р-р формальдегида)	глицин	винная кислота

В одну пробирку наливают 5 капель 1%-го раствора глицина, а в другую – раствор винной кислоты. В каждую пробирку прибавляют по 1 капле индикатора метилового красного. В пробирке с аминокислотой раствор окрашивается в желтый цвет (нейтральная среда). Затем в каждую пробирку добавляют равный объем 40%-го раствора формальдегида (формалина). В пробирке с аминокислотой появляется красное окрашивание (кислая среда).

8. Реакции углеводов

8.1. Общая реакция на углеводы с -нафтолом (реакция Молиша)

При действии серной кислоты на различные углеводы происходит расщепление ди- и полисахаридов с последующей внутримолекулярной дегидратацией моносахаридов и образованием, в числе прочих продуктов, гидроксиметилфурфурола. Последний вступает в реакцию конденсации с двумя молекулами -нафтола, давая соединение хиноидной структуры, которое, в свою очередь, подвергается сульфированию с образованием ярко окрашенного красно-фиолетового продукта. Цветную реакцию дают все углеводы, причем кетозы реагируют более интенсивно.

Описанная реакция очень чувствительна, и при недостаточно аккуратной работе даже случайно попавшие в пробирку волокна фильтровальной бумаги или пыль могут вызвать положительную реакцию с -нафтолом.

Положительную реакцию теста Молиша дают и некоторые соединения, не являющиеся собственно углеводами, например, таннин, содержащий в молекуле остаток глюкозы, а также гликопротеины (например, яичный альбумин).

Выполнение работы

Реактивы	Исследуемые вещества (1 в-во)	Вещества для холостого опыта
α-нафтол (10% спиртовой р-р), серная кислота (конц.)	глюкоза сахароза крахмал целлюлоза	винная кислота

Помещают в пробирку 0.5-1 мл воды и вносят в нее очень немного исследуемого углевода (например, несколько крупинок сахара или крахмала или маленький кусочек фильтровальной бумаги). Затем добавляют 2 капли спиртового раствора -нафтола. Затем, наклонив пробирку, осторожно приливают по стенке из пипетки 1-1.5 мл концентрированной серной кислоты. Тяжелый слой кислоты должен опуститься на дно пробирки, почти не смешиваясь с водным слоем. На границе слоев быстро образуется красно-фиолетовое кольцо. При взбалтывании смесь разогревается и окрашивается по всему объему, а при разбавлении ее водой выделяются окрашенные хлопья.

Параллельно проделывают опыт с винной кислотой по этой же методике. В отсутствие углеводов фиолетового кольца не образуется, хотя жидкость может позеленеть или пожелтеть.