- •Часть1. (5 семестр. 19 занятий по 2 академических часа. Итоговые занятия: 7, 13, 19)
- •Часть1.
- •5 Семестр.
- •19 Занятий по 2 академических часа. Итоговые занятия: 7, 13, 19 занятие № 1
- •Последовательный процесс поиска модели
- •Литература
- •Дополнительная литература
- •Рекомендуемая дополнительная литература для самостоятельной работы
- •Занятие № 2
- •Литература
- •Дополнительная литература
- •Рекомендуемая дополнительная литература для самостоятельной работы
- •Занятие № 3
- •Литература
- •Рекомендуемая дополнительная литература для самостоятельной работы
- •Занятие № 4
- •Литература
- •Занятие № 5
- •Литература
- •Занятие № 6
- •Литература
- •Занятие № 7
- •Занятие № 8
- •Литература
- •Занятие № 9
- •Литература
- •Занятие № 10
- •Литература
- •Занятие № 11
- •Литература
- •Занятие № 12
- •Правила, используемые при интерпретации спектров ямр
- •Литература
- •Занятие № 13
- •Занятие № 14-15
- •Открытая ферментативная система с субстратным угнетением
- •Колебания в ферментативных системах Литература
- •Занятие № 16
- •Литература
- •Занятие № 17
- •Термодинамическая вероятность и энтропия
- •Внутренняя энергия и теплосодержание
- •Концентрации натрия и потенциалы внутри и вне клетки (гигантский аксон кальмара в морской воде)
- •Литература
- •Занятие № 18
- •Часть2.
- •6 Семестр.
- •19 Занятий по 3 академических часа. Итоговые занятия: 6, 13, 17 занятие № 1 (лабораторная работа)
- •Литература
- •Занятие № 2 (лабораторная работа)
- •Литература
- •Занятие № 3 (лабораторная работа)
- •Литература
- •Занятие № 4 (лабораторная работа)
- •Литература
- •Занятие № 5 (лабораторная работа)
- •Литература
- •Занятие № 6
- •Занятие № 7
- •Литература
- •Занятие № 8
- •Литература
- •Занятие № 9
- •Литература
- •Занятие № 10
- •Литература
- •Занятие № 11
- •Литература
- •Занятие № 12
- •Литература
- •Занятие № 13
- •Занятие № 14
- •Литература
- •Занятие № 15
- •Литература
- •Занятие № 16
- •Литература
- •Занятие № 17
- •Методы определения молекулярных масс биомакромолекул: осмометрия, гельхроматография, электрофорез, рассеяние света, вискозиметрия, седиментация.
- •Часть3.
- •7 Семестр.
- •18 Занятий по 3,5 академических часа. Итоговые занятия: 6, 13, 17 занятие № 1
- •Литература
- •Занятие № 2
- •Литература
- •Занятие № 3
- •Литература
- •Занятие № 4
- •Литература
- •Занятие № 5-6
- •Литература
- •Занятие № 7
- •Литература
- •Занятие № 8
- •Литература
- •Занятие № 9
- •Литература
- •Занятие № 10
- •Литература
- •Занятие № 11
- •Занятие № 12
- •Литература
- •Занятие № 13
- •Литература
- •Занятие № 14
- •Литература
- •Занятие № 15
- •Литература
- •Занятие № 16
- •Литература
- •Занятие № 17
- •Литература
- •Занятие № 18
- •Оглавление
Литература
-
Чанг Р. Физическая химия с приложениями к биологическими системам. М.: «Мир», 1980
Занятие № 3 (лабораторная работа)
ТЕМА: Равновесное связывание лигандов с биомакромолекулами
Цель: Приобрести практические навыки определения физико-химических характеристик взаимодействия
Вопросы для рассмотрения на занятии:
-
Закон Бугера-Ламберта-Бера, отклонения. Физический смысл молярного коэффициента погашения (экстинции). Оптическая плотность.
-
Характер зависимости концентрации комплекса «белок-лиганд» от концентрации лиганда.
-
Способы линеаризации зависимости «Концентрация лиганда - Эффект». Координаты Лайнуивера-Берка, Скетчарда, Эди-Хофсти.
-
Определение параметров уравнения линейной регрессии с использованием утилит программы MS Excell.
-
Выполнение практической работы по определению параметров связывания бромкрезолового зеленого с альбумином на спектрофотометре СФ-46
Практическая работа:
Реактивы и оборудование: Спектрофотометр СФ-46, буферные растворы рН = 4.4 и рН = 7.4, альбумин 5 мг/мл (на физ.растворе) , бромкрезоловый зеленый 8 мг/мл (на буфере).
-
Приготовить необходимое количество (см. задание по группам) раствора БКЗ с концентрацией 0,1 ммоль/л из маточного (8 мг/мл)
-
Приготовить растворы БКЗ заданной молярной концентрации (С1-С6, от 0,01 до 0,1 мкм/л).
-
Приготовить серию контрольных и опытных проб. В опытной пробе к 2 мл точного раствора БКЗ добавляется 100 мкл раствора альбумина. В контрольной пробе, вместо раствора альбумина берется дистиллированная вода.
-
Измерить оптическую плотность растворов при 625 нм. Оптическая плотность опытной пробы меряется относительно соответствующего контроля.
-
Построить график зависимости D от D/[L].
-
Рассчитать константы связывания.
-
Применить функции программы Exell в расчетах характеристик связывания и оценки аналитических ошибок. Добавить на график линию тренда и уравнение прямой с достоверностью уровня аппроксимации.
D
D/[L]
Задание по группам
|
БКЗ 0,1 ммоль/л |
Буфер рН 4,4 |
|
№ |
Контроль 100 мкл H2O |
Опыт 100 мкл альбумина |
C1 |
1 мл |
9 мл |
|
1 |
По 2мл С1 |
По 2мл С1 |
C2 |
1 мл |
4 мл |
|
2 |
По 2мл С2 |
По 2мл С2 |
C3 |
2 мл |
3 мл |
|
3 |
По 2мл С3 |
По 2мл С3 |
C4 |
3 мл |
2 мл |
|
4 |
По 2мл С4 |
По 2мл С4 |
C5 |
4 мл |
1 мл |
|
5 |
По 2мл С5 |
По 2мл С5 |
C6 |
5 мл |
0 мл |
|
6 |
По 2мл С6 |
По 2мл С6 |
Mr (БКЗ) = _______
Ксв = ______
Самостоятельная работа
-
Чем спектрофотометр отличается от фотоэлектроколориметра?
-
Какие кюветы необходимо использовать при работе на длинах волн УФ-диапазона?
-
Дайте определение понятию «хромофор».
-
Спектр поглощения.