Добавил:
krasnodar.anruis@yandex.ru Общественный деятель Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
современные проблемы вет акушерства.doc
Скачиваний:
308
Добавлен:
03.05.2018
Размер:
5.95 Mб
Скачать

Изменение функционального состояние клеточного иммунитета и апоптоз иммунокомпетентных клеток при мастите коров Желавский н.Н.

Подольский государственный аграрно-технический университет,

Каменец-Подольский, Украина, e-mail: docgmm@mail.ru

Маститы коров относятся к наиболее распространенным акушерским заболеваний промышленного и фермерского животноводства (Головко А.Н. с соавт, 2001; Париков В.А., Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г., 2005). Большинство ученных относят эту патологию в категорию факторных в патогенезе которого происходит активное взаимодействие микробного фактора с иммунными механизмами защиты организма (Слободяник В.И., 1998; Burvenich C. et al., 2003; Mehrzad J. et al., 2004).

Последнее время ученых всего мира все больше интересуют вопросы физиологической старости и гибели (апоптоз) клеток (Mehrzad J. et al., 2004). На сегодняшний день уже достаточно изучено количественные показатели иммунитета коров при патологии молочной железы, однако, изучение функциональных параметров иммунной защиты и апоптоза иммунокомпетентных клеток является центральным объектом изучения современной клинической иммунологии (Яблонский В.А., Желавский Н.Н., 2009; Желавский Н.Н., 2012).

Целью было изучить изменения в системе иммунной защиты организма коров в различные периоды лактации и при развитии субклинического мастита. При этом было поставлены следующие задачи: определить функциональное состояние клеточного звена иммунитета клинически здоровых коров и больных субклиническом маститом; определить состояние апоптоза иммунокомпетентных клеток секрета молочной железы при субклиническом мастите; изучить динамику параметров иммунитета подопытных коров в процессе проведенной терапии.

Материал и методы исследования. Исследования проводили на коровах-аналогах украинской молочной черно-пестрой породы, 3-5-летенего возраста, в различные периоды лактации и при возникновении субклинического мастита. Подопытные животные принадлежали ППФ «Деметра», СТзОВ ВФ «Гуменецьке» и СТОВ «Обрій» Каменец-Подольского района Хмельницкой области Украины. Для проведения исследований было сформировано две группы коров: клинически здоровых (n=17) и больных субклиническим маститом (n=17). Пробы крови и секрета молочной железы доставляли в специализированую лабораторию Подольского государственного аграрно-технического университета. При иммунологическом тестировании изучали функциональное состояние клеточного звена иммунитета в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с фитогемагглютинином (ФГА). При морфологической оценке иммунокомпетентных клеток, характеризирующих апоптоз, учитывали специфические изменения в ядре, цитоплазме, мембраны и изменения цитометрических их размеров. Общую сумму цитоморфологических признаков апоптоза в исследованных микропрепаратах, выраженную в процентах, принимали за индекс апоптоза (ИА). Лабораторную диагностику мастита проводили с использованием димастиновой пробы и серии бактериологических методов. Биометрическую обработку полученных массивов проводили с помощью статистического пакета программ Statistica v. 5.5 A.

Результаты исследование и их обсуждения. При иммунологическом исследовании коров в разные периоды лактации было определено, что функциональная активность Т-мононуклеаров характеризуется своими физиологическими особенностями. Нами установлено некорые закономерности бласттрансформационной способности активных Т-лимфоцитов. В начале лактации функциональная способность Т-клеток была наименьшей (42,23±1,17%). Однако далее с нарастанием лактационной кривой происходила некоторая активизация их трансформации в бласты (50,52±2,00%). В период запуска отмечали волнообразное снижение активности иммунокомпетентных клеток, содержание которых достигало минимального значения (в период сухостоя 39,32±1,19%), что напрямую указывает о связи морфо-функциональных процессов, которые происходят в молочной железе подопытных коров в исследованные периоды. Параллельно с этим также отмечали изменение индекса бластной трансформации, который в начале лактации составлял 0,79±0,03; в пик лактации 0,95±0,02; и постепенно снижался в период сухостоя и запуска.

Особенные изменения в функциональном состоянии клеточного иммунитета происходили в патогенезе субклинического мастита. Воспалительная патология вымени коров сопровождалась незначительным снижением бластной трансформации лимфоидных клеток в иммунологических реакциях с ФГА (47,23±1,17%, p<0,05), что свидетельствует о начальных нарушениях иммунной реактивности.

Оригинальные результаты получены при изучении апоптоза иммунокомпетентных клеток секрета молочной железы в генезе развития субклинического мастита коров. Субклинический воспалительный процесс в организме больных коров при этом сопровождался характерными изменениями в исследованных цитоморфологических показателях, которые в основном затрагивали нейтрофильных гранулоцитов. В наших предыдущих исследованиях мы наблюдали активную миграцию в зону патологического процесса реактивных фагоцитов (НСТ-теста) (Желавский Н.Н., 2012). Дальнейшие эксперименты позволили детально изучить изменения апоптоза нейтрофильных гранулоцитов. При субклиническом мастите апоптоз фагоцитов проявлялся в основном изменениями в ядре (рексис, фрагментация, пикноз), при этом общий индекс активации апоптоза составлял 42,3±0,71% (р<0,001). Этот феномен, следует рассматривать, как следствие активации цитохимической реактивности фагоцитов при которой интенсивно экскретируєтся внеклеточное пространство большое количество активных форм кислорода (например, О, О2•-ОН, О22- ,OCl- и др.). Это в свою очередь не только проявляет мощную противомикробную защиту, а также являются специфическими активаторами апоптоза.

В процессе проведенной терапии с использованием препарата «Изатизон» происходила нормализация нарушенных параметров иммунитета. В периферической крови возобновлялась бласттрансформация лимфоцитов в реакции РБТЛ. В секрете молочной железы уменьшалось количество соматических клеток, угасание их реактивности, нормализация клеточной регуляции (апоптоз), что свидетельствует о возобновлении клеточного гомеостаза локального иммунитета.

Выводы. В разные периоды лактации коров происходит физиологические колебания в параметрах клеточного звена иммунитета, что напрямую зависит от морфо-функциональных изменениях, происходящих в молочной железе подопытных коров в исследованные периоды. Субклинический мастит коров характеризируется существенными изменениями в Т-системе иммунной защиты, что проявляется уменьшением количества в периферической бласттрансформированных лимфоидных клеток. В патогенезе субклинического воспаления отмечено некоторые изменения локального иммунитета молочной железы. Доказано, что в процессе развития ИА нейтрофильных гранулоцитов составлял 42,3±0,71% (р<0,001), что указывает о нарушения клеточного гомеостаза. В процессе проведенной терапии с использованием препарата «Изатизон» происходила нормализация нарушенных параметров иммунитета. В периферической крови возобновлялась их бласттрансформация в реакции РБТЛ. В секрете молочной железы уменьшалось количество соматических клеток, угасание их реактивности, нормализация клеточной регуляции (апоптоз), что свидетельствует о возобновлении клеточного гомеостаза локального иммунитета.

Литература. 1. Головко А.Н., Вечтомов В.Я., Гужвинская С.А. Этиология и терапия мастита у коров // Ветеринария, 2001, № 11.- С.35-38. 2.Париков В.А., Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г. Состояние и перспективы научных исследований по борьбе с маститом у коров // матер. Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы органов размножения и молочной железы у животных».- Воронеж, 2005.- С 3-7. 3. Желавский Н.Н. Состояние клеточного и гуморального иммунитета коров при мастите // Инновационные технологии производства и переработки сельскохозяйственной продукции: Материалы Международной научно-практической конференции.- Владикавказ, 2012.- С.150-151. 4. Слободяник В.И. Локальные факторы защиты молочной железы коров // Ветеринария, 1998, № 11.- С.32-34. 5. Яблонский В.А., Желавский Н.Н. Локальный иммунитет и апоптоз иммунокомпетентных клеток при субклиническом мажете в коров // Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных: Материалы Международной научно-практической конференции.- Воронеж: Истоки, 2009.- С.393-397. 6. Burvenich C., Van Merris V., Mehrzad J. et al. Severity of E. coli mastitis is mainly determined by cow factors // Vet. Res., 2003, Vol. 34.- Р.521-564. 7. Mehrzad J., Duchateau L., Burvenich C. Viability of milk neutrophils and severity of bovine coliform mastitis // J. Dairy Sci., 2004, Vol. 87.- Р.4150-4162.

THE CHANGES IN THE FUNCTIONAL STATE OF THE CELLULAR IMMUNITY AND APOPTOSIS OF IMMUNE CELLS DURING MASTITIS OF COWS

Zhelavsky M.M.

State Agrarian and Engineering University on Podilya, Kamyanetc-Podilsky, Ukraine

In the paper presents the main results of the study of functional status on the study of functional status and apoptosis of immune cells in subclinical mastitis. The determined by the physiological limits of variation in the lymphocyte blast transformation reaction RBTL at different periods of operation of the breast cows. It is proved that in subclinical mastitis, changes in functional status and apoptosis of immune cells.

УДК 619:616-08:618.14–002:636.22/.28:636.4