- •Розділ і загальна мікробіологія тема і. Мікробіологічна (бактеріологічна) лабораторія
- •Правила роботи й техніка безпеки в бактеріологічних лабораторіях і на студентських мікробіологічних практикумах
- •Мікроскопія
- •Тема 2. Морфологія бактерій
- •Морфологія мікоплазм
- •Морфологія рикетсій та хламідій
- •Тема 3. Дослідження забарвлених мікроорганізмів Лабораторне заняття 1. Дослідження забарвлених мікроорганізмів.
- •1. Нанесення досліджуваного матеріалу на предметне скло.
- •Тема 4. Дослідження бактерій у непофарбованому вигляді
- •Тема 5. Морфологія грибів та актиноміцетів
- •Тема 6. Методи стерилізації
- •Залежність температури від тиску
- •Тема 7. Культивування мікроорганізмів
- •Tema 8. Визначення виду мікроорганізмів
- •Тема 9. Вплив біологічних факторів на бактерії
- •Тема 10. Бактеріологічне дослідження матеріалів у лабораторії
- •Тема 11. Серологічні методи дослідження у ветеринарній мікробіології
Морфологія мікоплазм
Мікоплазми — бактерії, які не мають клітинної стінки й належать до класу Mollicutes. Це дрібні мікроорганізми, величина яких коливається в межах 0,3-0,9 мкм. Відрізняються надзвичайним поліморфізмом, який пояснюється відсутністю у складі оболонки такої жорсткої структури, як клітинна стінка, і її основного компоненту - пептидоглікану. Крім кулястих, мікоплазми бувають серпоподібними, нитчастими, розгалуженими, химерними.
Мікоплазми досить поширені у природі. Крім сапрофітів, зустрічаються також патогенні, які уражують практично всі види сільськогосподарських тварин, викликаючи пневмонію, кон'юнктивіт, артрит, мастит, ендометрит, аборт.
Морфологія рикетсій та хламідій
Рикетсії - облігатні внутрішньоклітинні паразити кокоподібної, паличкової або ниткоподібної форми величиною 0,2-0,3 х 0,3-1,0 мкм. За будовою рикетсії нічим не відрізняються від грамнегативних бактерій. Вони не утворюють спор і капсул, в переважній більшості нерухливі, аероби, розмножуються поперечним поділом або дробленням.
У циклі розвитку рикетсій особливе місце займають членистоногі (воші, клопи, блохи).
Хламідії - близькі до рикетсій внутрішньоклітинні облігатні паразити, зріла форма яких має вигляд сферичних чи овальних елементарних тілець величиною 0,25—0,3 мкм. У процесі розвитку з'являються проміжні ініціальні, або ретикулярні тільця овальної форми величиною 0,5-1,0 мкм і навіть гігантські структури діаметром до 3 мкм. Проміжні форми дробляться внутрішньою фрагментацією або брунькуються. Типовим для хламідій є поперечний поділ. Всі тільця, що з'являються внаслідок складного циклу розмноження, поступово дозрівають до елементарних тілець, які фігурують як інфекційні структури (рис. 10).
Хламідії культивують у курячих ембріонах, клітинних культурах. Дані мікроби є збудниками у тварин специфічних хвороб, що мають загальну назву хламі-діоз. Хламідії належать до класу МісгоІаІоЬШез, 18-ї групи систематики Берджі .
Тема 3. Дослідження забарвлених мікроорганізмів Лабораторне заняття 1. Дослідження забарвлених мікроорганізмів.
Мета роботи. Навчити студентів виготовляти препарати-мазки, препарати-відбитки, фарбувати їх.
Реактиви та обладнання. Матеріал для виготовлення мазків (суспензія бактерій, шматочки м 'яса), знежирені предметні скельця, бактеріологічні петлі, пінцети, спиртівка, набір бактеріологічних фарб, фломастери чи ін., зливні чашки, спиртівки (газові горілки), засоби для хімічної фіксації мазків, мікроскопи, таблиці з методиками виготовлення препаратів, фіксації, фарбування та ін.).
При вивченні морфології бактерій найчастіше застосовують метод виготовлення препаратів (мазків) із наступним їх забарвленням. Цей прийом дозволяє виявити бактерії у досліджуваному матеріалі й диференціювати їх за формою.
Для отримання чистих знежирених скелець їх попередньо кип'ятять в 1 % розчині соди, промивають водою, споліскують слабким розчином соляної кислоти, потім знову водою, висушують і зберігають у банці з притертою пробкою в суміші етилового спирту та ефіру (порівну). При повторному використанні скельця на 2 години занурюють у концентровану сірчану кислоту або краще у цю ж кислоту, насичену двохромовокислим калієм, після чого кип'ятять у лужному розчині, ретельно промивають водою, споліскують дистильованою водою, висушують і зберігають у пакетах.
Бактеріологічну петлю або пастерівську піпетку (рис. 11) виготовляють із спеціальних сплавів, які при стерилізації вогнем швидко розжарюються і порівняно швидко остигають. Кращим матеріалом для їх виготовлення є платина. Вона швидко нагрівається під час стерилізації над полум'ям та швидко остуджується. Останнім часом з'явились бактеріологічні петлі для разового користування (вони стерильні). Пастерівські піпетки, виготовлені із скляних трубок, простерилізовані шляхом автоклавування, разового користування. Після закінчення роботи їх кладуть у посуд з дезінфікуючим розчином.
Процес виготовлення мазків здійснюють, дотримуючись правил бактеріологічної техніки (асептики, антисептики). Він включає кілька послідовних етапів (рис. 12).